E、蒸馏完后 先撤热源、再开活塞 ，压力平衡后关气泵与打开 毛细管夹。
３、旋转浓缩蒸馏法
一般用于提取液浓缩 １）浓缩原理 使溶剂在瓶壁形成一层薄膜，扩大蒸馏
面积，提高蒸馏速度。 ２）应用条件 压力400～600mmHg 转速50～160转/分。
４、水蒸汽蒸馏
１）主要用途 沸点比较高，容易热分解，或者糊状混合物中的成
脱水力强。 Na2 SO4 多数溶剂可用，脱水能力不强。 K2 CO3 碱性化合物、醇、酯 脱水力较强。 P2 O5 卤烃、烃（醇、酸不可用），脱水力强。 NaOH 饱和烃、肼、胺（酸性物质不可用） 分子筛 多数可用，脱水力强。
２、减压蒸馏
１）减压蒸馏的原理
液体的沸点随液面压强降低而降低。
对沸点和压强进行估算。
压强小
过如下途径进行估算。
２）查T-P关系图
A线标减压沸点数据，
B线正常压强沸点
沸点低
C线压强刻度（mmHg). A B
压强大
C
３）用 近似公式估算
用 近似公式 lgP=A+B/T P 蒸汽压; T 绝对温度; A 、B为常数（可以通过化合物物理性质手
活 有性机碳磷有—机中化性合氧物化。铝，CHCl3淋洗由于提纯
9、淋洗剂选择
１）极性递增顺序： R-X < C=C <R-OCH3 < <R-CO2R < R2C=O < R-CHO <R-SH<R-NH2 < R-OH<R-CO 2H ２）吸附力与淋洗剂性质有关。 选淋洗剂时应考虑被洗脱物质的极性与溶解度。 极性大的化合物用极性大的淋洗剂洗脱； 极性小的化合物用小极性淋洗剂洗脱； 几种极性差别大的混合物用几种不同极性的淋洗剂分
分配柱层析法：把有机氯有机化合物从极性 小的有机化合物样品中分配到极性大的溶剂 中去。主要分离含脂肪、蜡质试样的有机氯 。
凝胶渗透柱层析法：用凝胶sephadex LH-20 作有机磷有机化合物.分离净化。
被纯化物质的分子量范围：有机磷200-400 ；色素500-900。用118g葡聚糖LH-20装柱。 乙醇或丙酮淋洗；淋洗速度V=4.5ml/h。
有机物分离与纯化的方法、柱层析的一些技巧 _图文.ppt
一、固体有机物分离提纯方法
二、液体有机物分离提纯方法
液体有机化合物蒸馏法 蒸馏法原理：依液体混合物中各组分沸点不同而
分离。 关键：控制温度缓慢上升，收集不同温度范的围馏
份。 蒸馏方法分类： 常压蒸馏适用于b.p较低，在b.p时不分解的物质。 减压蒸馏适用于b.p较高，或在b.p发生分解的物质。 水蒸气蒸馏适用于不与水反应，b.p较高的物质。
a、装好仪器 b、调热浴温度高于b.p10℃以上 c、冷却水接蛇形冷凝管（低于b.p20℃
） d、接真空泵（不低于300mmHg） e、加热、开自动加液旋塞， f、开动电机使旋转，收集馏出液。 g、关电机、除热源、关加液旋塞、压
力平衡停抽气
４）水蒸气蒸馏操作
水蒸气蒸馏操作与常压蒸馏操作类似，其装置比常 压蒸馏装置多一个水蒸气发生器。
8、影响Rf的因素
薄层厚度 吸附剂种类、活度、展开剂极性、展层的饱和度 展开方法：一般不加黏合剂，薄板水平展开。 单向上行一次展开，倾角70-80° R开f值剂接，近也的可物不质同要的多展次开单剂向。展开。每次可用同一展 双向展开法：用正方形薄板，展开剂一次走到上沿
后取出风干，旋转90°后再展开 边使色缘斑效大应小：及溶形剂状前不沿规线则一般朝下弯造成Rf不准，且 显色是配合薄层进行鉴别。
压力达要求。 停止：慢慢打开安全瓶活塞 ，压力与外界平衡， 可旋转多用接头
松毛细管螺丝夹，关抽气泵。 B、加液料、关活塞、开抽气、调毛细（气泡与线）、达到 压力
后（平衡、稳定）再 加热。 C、热源温高于b.p20-30℃，压力不稳调热源。
馏出速度0.5～1D/S
D、多组分蒸馏：馏出温度上升时转换接收器（使用多头接 受器）。
。 B、分配色谱柱：惰性载体表面涂高沸点液体
，被分离物在淋洗剂与高沸点液体之间溶解 分配。 C、凝胶色谱柱：多凝胶填粒、淋洗，凝胶
4、吸附柱的装填要求
吸附剂要装填均实，淋洗剂等速水平下降， 分离效果好。
１）干装：先装洗脱剂于柱内，吸附剂通过 漏斗直接装入盛有洗脱剂的色谱柱（边装边 敲），最后应使吸附剂上有一薄层溶剂。
安全管 T形管
水蒸气发生器
三、柱层析分离（固／液）有机物
1、柱层析技术用途 架设一个带活塞的玻璃柱，填入吸附剂，可
以用于分离混合物是分离混合物的重要方法 。 2、柱色谱的几种技术指标 直径与长度比：1：10~1：40 短而粗的柱子，分离快，分离效果差 长而细的柱子，分离慢，分离效果好 色谱柱的分离效果还与吸附剂和洗脱剂的选择 、柱子的装填质量有关。
批洗脱。 亦可以用混合淋洗剂。
10、淋洗剂洗脱能力与洗脱要点
１）常用淋洗剂洗脱能力： 正 〈 〈己CC3H烷HC7〈lO3〈CHCE〈tl42M〈OeC〈O6HCHH5〈-C3CHHO23O〈2CC2H6H5〈6〈MCeH2C2COl2 ２）淋洗要点：连续不断，不快不慢，吸
附剂不露出液面。 ３）淋洗速度 V=1～２滴/S为宜。 洗脱快则交换不平衡； 洗脱慢则具有大表面的吸附剂使某些成分
多数有机磷（.水平0.05—0.005ppm）淋洗 体积在305—428ml；回收率可达66-98%。
六）薄层色谱分离提纯
比柱色谱更加应用广泛的分离分析手段。 用于分离提纯具有简单快速的特点。分离
容量不及柱色谱大，效果也不及柱色谱好 。 薄层分类：吸附与分配色谱， 分配色谱又分正相色谱与反相色谱。 正相：含水吸附剂（固定相），弱极性流 动相，极性小的移动快。 反相：钝化吸附剂（固定相），强极性流 动相，极性强的移动快。
四、化学提纯法
化学净化法是使杂质与某种试剂发生化 学反应除掉或者消除干扰。
有机化合物提取液干扰分析成分很大程 度是脂肪与色素。
最常用的化学净化法是用酸处理对酸稳 定的有机化合物或用碱处理对碱稳定的 有机化合物来除杂。
1烟、硫酸酸净（化1： ：用1）浓混H合2S液O在4或分浓液H漏2S斗O4中与处发 理萃取液，可以除脂肪、色素。
册或者化工手册查阅）
４）减压蒸馏装置
仪器装置 带橡皮套的毛细管、容积
=1/2V、不用平底接受器 减压泵 （水泵7-20mmHg）机械
泵（油泵） 0.1mmHg （要 连接吸收装置）
注意：负压与正压 操作一样要带护目
镜防爆！
减压蒸馏装置图
５）减压蒸馏操作步骤
A、查蒸馏系统可否达应有真空度 开始：关安全瓶活塞，紧毛细管螺丝夹，开抽气泵，
相容的展开剂混合，以调节展开剂极性。
7、一般薄层色谱实验操作
点样—展开—显色—计算Rf值 点样：在距薄板下沿1cm处的水平线上，毛细
管口液滴与薄层表面相切，切忌玻璃管戳破薄 层，可以重复点样。 展开：薄层板下沿水平插入层析缸，展开剂不 能淹没样点，缸内充满展开剂蒸汽，要盖上盖 子，展开剂水平线上升，接近薄层上沿时为止 。 显色：大多物质要进行物理或者化学方法显色 。 薄层板从层析缸取出，在展开剂前沿作一记号 ，待展开剂挥发干后显色。 物理方法：紫外灯照射；碘蒸汽熏蒸等。
硅胶：水玻璃加盐酸，沉淀脱水得无定形多 孔物质。表面Si-OH称硅醇，与不饱和化合物 或极性基形成氢键而吸附；Si-O-Si氧桥可水 解，称溶解度，pH = ９以上显著，故不可用 强碱性淋洗液；
硅胶层析性能与多孔骨架及坑穴体系密切相 关，加热有变。活化温度不超过２００℃。 130℃活化２h备用。用于有机氯有机化合物 分离。
薄层吸附色谱
1、固定相：硅胶、氧化铝活化。 a加石膏为G型，不加为H型，加荧光剂为GF或HF b正相分配色谱：纤维素或用缓冲水溶液处理过的
硅胶、或用极性有机溶剂处理过的硅胶。 C、反相分配色谱固定相：用硅酮、石蜡等非极性
溶剂处理过的硅胶或纤维素。 D、薄层涂层：薄层自然晾干后进行活化。 E、活化温度与时间： 硅胶板105-120℃，1h； 氧化铝板：70℃，40mi温度计水银球位置 ３）加沸石 ４）容器中液体体积 ５）热源选择 ６）馏出速度
v = 2～３ D/S
７）液体的干燥
液体含水：干燥剂脱水后蒸馏（干燥剂不可进入蒸 馏体系）（容量与速度）
干燥剂种类及性能： CaO 中、碱性化合物可用，脱水力强。 CaCl2 卤烃、烃、酯、醚可用（醇、酸不可用）
吸附能力：与颗粒粗细有关，粗则流速快，分 离效果差；粗则流速慢，分离效果好。
氧化铝分类：酸性、中性、碱性三种 酸性：１％HCl浸泡，蒸馏水洗pH4～４.５，
用于分离酸性物质 中性：pH为７.５左右，用于分离中性物质 碱性：pH９～１０，用于分离碱性物质或烃类
。
6、吸附剂的活性
⑴含水量越低活性越高。 氧化铝依含水量分为五级，含水量分别为０
2、吸附剂选择
吸附剂
用途
吸附剂
用途
硅胶
吸附，分配 氧化铝 吸附，分配
硅藻土
分配 纤维素 分配
氢氧化钙
吸附
聚酰胺
吸附
离子交换树脂 离子交换 氧化镁 吸附，分配
吸附剂粒度的要求：5-50μm。 粒度太大推进快，影响分离；
。 粒度太小则展开慢，出现拖尾或横向扩散过度
3、展开剂选择
与淋洗剂标准一致。官能团极性如下： RH＜RCl＜—CH=CH2＜ROCH3＜RNO2 ＜RNMe2＜RCOCH3＜RCO2R＜R2C=O ＜RCHO＜RSH＜RNH2＜RNHCOR ＜ROH＜RCONH2＜RCO2H 一般单一展开剂没有很适合的极性，多用