酶的提取
碱溶液提取
在碱性条件下溶解度较大且稳定性较好的酶,应采用碱溶液提取。操作时pH不能过高,以免影响 酶的活性。同时加碱液的过程要一边搅拌一边缓慢加进,以免出现局部过碱,引起酶的变性失活。
有机溶液提取
与脂质结合牢固或含有较多非极性基团的酶,可以采用能与水混溶的乙醇、丙酮、丁醇等有机溶 剂提取。例如,琥珀酸脱氢酶、胆碱酯酶、细胞色素氧化酶等采用丁醇提取,都取得良好效果。
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2016年12月11日
提前目标
提取原则
提取方法
影响因素
提取方法
盐溶液提取 酸溶液提取 碱溶液提取 有机溶剂提取
使用的溶剂或溶液
0.02~0.5mol/L的盐溶液 PH2~6的水溶液 PH8~12的水溶液 可与水混溶的有机溶剂
提取对象
用于提取在低浓度盐溶液中溶解度较大的酶 用于提取在稀酸溶液中溶解度大,且稳定性较好的酶 用于提取在稀碱溶液中溶解度大且稳定性较好的酶 用于提取那些与脂质结合牢固或含有较多非极性基团的酶
提取原则
提取方法
影响因素
b、保持生物活性
a、目的酶最大限度地 溶解出来
注意:温度升高,溶解度增加,但为防止酶 失活,一般采用低温下(0~10℃)操作。
PART.02
提取原则
提前目标
提取原则
提取方法
影响因素
相似相溶
远离等电点的pH值, 溶解度增加
PART.03
提取方法
提前目标
提取原则
提取方法
影响因素
提取液的体积对酶的提取影响
增加提取液的用量,可以提高酶的提取率。但是过量的提取液,会使酶的浓度降低,对
进一步的分离纯化不利。所以提取液的总量一般为原料体积的3~5倍,最好分几次提取。
内部沸腾法
内部沸腾是一种真正的内部沸腾,它 通过外部大量的热溶剂加热先渗透到物 料内部的少量解吸溶剂,并使之沸腾汽 化,产生内部对流,强化有效成分的扩 散,提取效率明显提高。
盐溶液提取
大多数蛋白类酶都溶于水,而且在低浓度的盐存在的条件下,酶的溶解度随盐浓度的升高而增加, 这称为盐溶现象。当盐浓度达到某一界限后,酶的溶解度随盐浓度升高而降低,这称为盐析现象。 所以一般采用稀盐溶液进行酶的提取,盐的浓度一般控制在0.02~0.5mol/L。
酸溶液提取
有些酶在酸性条件下溶解度较大,且稳定性较好,宜用酸溶液提取。提取时要注意溶液的pH不能 太低,以免使酶变性失活。例如,胰蛋白酶可用0.12mol/L的硫酸溶液提取等
酶的提取与分离纯化
环境与生物工程学院
专业:生物工程
弘德博问、和谐创新
教案:周聃一
讲解:锁进猛
教案:杨睿祎
引入课题
提取:把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程,即将
尽可能多的酶,尽量少的杂质从原料中引入溶液。
目录页
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提取目标
提取原则
提取方法
影响因素
PART.01
提取目标
提前目标
PART.04
影响因素
提前目标
提取原则
提取方法
影响因素
温度对酶的提取影响
提取时的温度对酶的提取效果有明显影响。一般说来,适当提高温度,可以提高酶的溶 解度,也可以增大酶分子的扩散速度。
pH对酶的提取影响
溶液的pH值对酶的溶解度和稳定性有显著影响。为了提高酶的溶解度,提取时 pH值应 该避开酶的等电点。