在培养液和工艺未优化情况下
细胞悬浮培养密度可达 2.5 X 107cells/ml
一个50L纸片载体灌注系统的体积产量相当于1200个大转瓶的生产车间!
20-40ml 模拟反应器系统用于工艺优化研究。
激流式灌注反应器
激流式灌注反应器配合激流式生物反应器使用,采用新型外循环式纸片灌注培养工艺,以纸片作为载体,利用激流式细胞培养器控制溶氧、pH、温度等细胞生长条件。
◆ 激流式灌注反应器细胞生长数据
● 蛋白抗体生产用纸片载体灌注式不同细胞生长密度×纸片载体总重量
细胞名称5L灌注系统(细胞数/克载
体×载体总重量150克)50L灌注系统(细胞数/克载体×
载体总重量1200克)
150L灌注系统(细胞数/克载体
×载体总重量3600克)
CHO-K1 13.7×108cells/g×150g 16.4×108cells/g×1200g 正在进行中
CHO-S 21.0×108cells/g×150g 25.0×108cells/g×1200g 18.0×108cells/g×3600g
结论:一个150L纸片载体灌注系统连续灌注和丰收一个月的体积产量相当于一个国际水平的1500L的大型流加悬浮 培养罐。
优势:一次性使用纸片灌注系统,工艺简单,细胞生存活力特别稳定,适合于发展中国家大规模蛋白质和抗体药物生产。
● 疫苗生产用纸片载体灌注式不同细胞生长密度×纸片载体总重量
细胞名称 5L灌注系统(细胞数/克载体
×载体总重量150克)
50L灌注系统(细胞数/克载
体×载体总重量1200克)
150L灌注系统(细胞数/克载
体×载体总重量3600克)
VERO(人) 6.0×108cells/g×150g 6.5×108cells/g×1200g 正在进行中
MDCK(人) 5.0×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
Marc145(兽) 3.5×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
ST1(兽) 4.0×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
DF-1(鸡) 2.5×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
CIK(鱼) 1.0×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
EPC(鱼) 1.2×108cells/g×150g 正在进行中 正在进行中
结论:1、一个50L纸片载体灌注系统的体积产量相当于1200个大转瓶的生产车间,特别适合于大规模人用、兽(包括鸡和鱼)疫苗生产。
同时,也是适合烈性传染病(例如禽流感和SARS)国家和军队的疫苗应急生产方法。
2、低成本、一次性使用,适合于发展中国家大规模疫苗生产的全部中国制造的高端生物反应器。
优势:1、由于一次性使用纸片灌注系统细胞密度特别高,所以细胞之间生长的相互支持力度大,生存活力特别强。
2、与使用转瓶和微载体冲洗和酶消化的接种方法相比,一次性使用纸片灌注系统细胞容易冲洗和酶消化,所
以解决了逐级放大的接种问题。
3、实现DO、pH、温度等培养条件的自动控制
◆ 激流式灌注反应器的优势
● 系统无气升装置、鼓泡或搅拌器,使剪切力最小化。
● 培养液以一定流速流过纸片,供给贴壁依赖性细胞所需养分,在细胞周围形成稳定的流体轨道,可提供细胞生
长、交流和形成的三维结构。
● 新型纸片适用于多种细胞系,可提供传统培养模式(转瓶等)无法比拟的细胞吸附面积,更利于细胞吸附和生
长。
● 可解决贴壁培养放大问题,且空间占用少、操作简便、条件要求低。
● 一次性纸片灌注培养系统用后就弃,可避免交叉污染、缩短批间处理周期,无需清洗、消毒、验证,极大地提
高工作效率。
● 灌注袋事先经过γ射线照射,即拆即用。
灌注袋也适用于5L,50L,150L激流式反应器。
激流式灌注反应器培养体系能力比一般反应器高出20倍,是细胞商业化培养、疫苗工业大规模生产的首选。
激流式生物反应器
激流式生物反应器是一种全新概念的生物反应器,基于无鼓泡式新型传氧机制,它通过激流式振荡器机械摇动
产生激流而使培养液反复冲刷细胞培养袋内表面的氧分子层,进而使氧分子迅速溶解于培养液中,以满足细胞正常生
长和代谢的需求。
AmProtein 新型传氧机制的溶氧效率极高,为细胞高密度生长提供了理想的环境,并且避免了传统
鼓泡式给氧方法气泡破裂时对细胞的损伤以及强机械搅拌产生的剪切力对细胞的破坏,极大地提高了细胞存活率。
◆ 激流式生物反应器悬浮生长数据
● 5L工作体积:
细胞系 培养工艺 最大细胞密度 培养液优化
CHO-S 流加补料 2.0×107cells/ml 未优化
CHO-K1 流加补料 1.5×107cells/ml 未优化
SF9(昆虫) 批式培养 1.8×107cells/ml 未优化
● 50L工作体积:
CHO-S 流加补料 2.5×107cells/ml 未优化
CHO-K1 流加补料 2.0×107cells/ml 未优化
SF9(昆虫) 批式培养 未做 未优化
● 150L工作体积:
CHO-S 流加补料 1.8×107cells/ml 未优化
CHO-K1 流加补料 1.4×107cells/ml 未优化
SF9(昆虫) 批式培养 未做 未优化
◆ 激流式生物反应器的优势
●“激流式给氧机制”传氧效率极高,具有世界专利
● 激流式生物反应器起始细胞接种体积小,可从50ml开始逐步放大培养至所需的理想体积,最大工作体积可以 达300L,细胞培养密度可以达2.5×107/ml以上,细胞活力保持在90%以上,外源蛋白的表达量可以达到克级水平。
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