• 在细胞内可形成多个虫体的集合体，称假包囊，囊内的个 体即滋体或速殖子，为急性期病例的常见形态。宿主细胞 破裂后，滋养体再侵犯其他组织细胞，如此反复增殖，可 致宿主死亡。但更多见的情况是宿主产生免疫力，使原虫 繁殖减慢，此外有囊壁形成，称为包囊，囊内原虫称缓殖 子。包囊在中间宿主体内可存在数月、数年，甚至终生 （隐性感染状态）。
• 在预防动物弓形虫病中，应限制养畜（禽）场养猫，防止 饲料被猫污染；采取灭鼠措施，切断鼠-猫-畜禽的传递环 节；用屠宰场废弃物和动物尸体做动物饲料时，必须经高 温无害处理；发现患病动物应隔离治疗；在疾病流行期， 可应用磺胺类药物预防，控制疾病的爆发流行。
• 为避免人体感染，在接触患病动物、尸体、病料后应严格 消毒；养成反前洗手的卫生习惯，不食生肉；限制养猫， 减少与猫的接触机会。
3.4检测技术
• 弓形虫病诊断方法大致可分为三类：一是 病原学的检查方法如镜检、滋养体分离法、 卵囊分离法等；二是免疫学的方法，如 ELISA、补体结合实验、免疫印迹和免疫层 析等方法；三是主要以分子生物学术如分 子杂交技术、DNA体外扩增技术即聚合酶 链反应等为基础发展起来的方法，如控针 技术、免疫Pቤተ መጻሕፍቲ ባይዱR和巢式PCR等。
关键词
• 弓形虫 检测 犬 猫
绪论
• 弓形虫病（toxoplasmosis）又称弓形体病，是由龚地弓 形虫引起的人畜共患病。在动物体内多为隐性感染，主要 侵犯眼、脑、心、肝、淋巴结等。可引发广泛的临床症状， 如弓形虫性脑炎、弓形虫视网膜炎、弓形虫性腹膜炎等。 • 传统的弓形虫检查方法如镜检、滋养体分离法、卵囊分离 法等费时、费力，且其特异性和敏感性不高，常常导致漏 诊或错误的诊断；分子生物学诊断技术虽然具有较高的敏 感性和特异性，但由于其操作复杂或实验条件要求较高， 难以推广应用；免疫学诊断方法是进行弓形虫感染调查、 临床弓形虫病筛选诊断的常规方法，具有敏感性高、特异 性强、操作简便快速等优点，所以免疫学方法仍是目前弓 形虫感染和弓形虫病的主要诊断手段。
3.2 流行病学
• 3.2.1感染来源：各种患病及带虫动物都是感染来源，其中 急性患病动物的肉、乳、分泌物及排泄物中含有滋养体， 慢性动物的肉、眼及脑中含有包囊。猫感染后经3-20天开 始排出卵囊，每天排出10-100万，并持续5-14天。 • 3.2.2 易感动物：人、各种畜禽及多种野生动物均可感染， 但以幼龄动物易感性最高。 • 3.2.3 感染途径：主要经口感染，滋养体型对绵羊和人也 可通过胎盘感染。 • 3.2.4 地理分布及季节动态：该病存在于各地，无明显季 节性，但春季和秋季发病较多。
• 弓形虫病和犬瘟热鉴别诊断的方法：弓形虫病原为龚地弓 形虫（原虫），呈稽留热型（体温一般为40-42），典型 症状为肺炎（带有脓性鼻液）、弓形虫性肌炎和肌肉麻痹； 犬瘟热病原为犬瘟热病毒（副黏病毒科麻疹病毒属，RNA 病毒），呈双相热（先升高到40随后降低，最后持续在40 以上），以肺炎（脓性鼻液，鼻尖开成结痂）、神经炎症 反应（肌肉震颤）、角腊翳、溃疡及足垫增厚、变硬为典 型症状。
1.3 结果判定
• 结果判定标准（请参照上述插图） • 阳性：检测线和对照线均出现。（注：低效价的抗体出现 的检测线有时会较浅 • 阴性；只出现检测线。 • 无效：未出现对照线。此结果出现应使用新的检测装置重 新检测
2 结果
• 统计了上海爽佳宠物诊所2007年1月至2008年3月期间就 诊的宠物犬、猫病例41例，从检测结果分析，有41%的犬、 猫感染弓形虫，感染率较高，对人和宠物危害较大。
• 1.2.3方法 • （1）检测前将待检血清样本从冰箱取出，在室温或37℃ 恒温箱中平衡10分钟。 • （2）将试剂盒置室温静置数分钟。 • （3）检测前将检测卡，试剂，样本和对照品平衡至室温 （15-30℃）。 • （4）检测卡放置于洁净的水平面上。 • （5）检测卡上矩形检测窗口底部蓝带下面的样本膜区加 10ul样本液。需将样本完全润湿膜区（这会使固定化抗原 最大限度保证捕捉到抗体，增强检测的特异灵敏度）。 • 检测所用到的10ul吸液管使用说明：压挤吸液管上部，然 后释放吸液，确保吸液水平线恰在黑色标志处。接触至装 置样本区域的膜上，轻轻释放出液体使之全部被加入到膜 上。 • （6）垂直滴加试剂满3滴（100-120ul/滴）到试剂孔 • （7）5-10分钟读取结果。
3.5治疗及预防
• 治疗本病以磺胺类药物和抗菌增效剂联合应用效果较好。 对急性感染病例，可用磺胺嘧啶（SD），每千克体重用 法70毫克，或甲氧氨苄嘧啶（TMP），每千克体重14毫 克，每天2次口服，连用3～4天。由于磺胺嘧啶溶解度较 低，较易在尿中析出结晶，内服时应配合等量碳酸氢钠， 并增加饮水。此外，可应用磺胺—6—甲氧嘧啶（磺胺间 甲氧嘧啶、制菌磺、SMM、DS—36）其用量，初次量为 0.2克/千克体重，维持量为0.1克/千克体重，1日2次，内 服。不仅可以迅速改善临床症状，并可有效地抑制速殖子 在体内形成包囊。如果严重出现腹泻者，可根据脱水情况 进行补液。
• 常用的确诊弓形虫感染的方法①体液涂片镜检：显微镜下 找弓形虫速殖子或孢囊。临床上可取标本有骨髓、脑脊液、 腹水、痰等。该法虽检出率低，但一经发现即可确诊。② 血清学检查：采用酶联免疫吸附试验检测血清弓形虫IgM 型抗体，该法微量、快捷、敏感和特异性高，且在感染早 期出现。③PCR检测弓形虫特异性DAN片段，该法灵敏度 高，但有时出现假阳性，可作为辅助诊断。④有条件单位， 采用动物接种或组织培养物分离弓形虫。所取动物最好采 用刚断乳乳鼠，观察动物的发病情况，分时间段解剖小鼠， 观察病变组织，直接镜检或作血清检测特异性抗体、抗原 复合物。
1.2方法
• 1.2.1准备工作对可疑临床病例进行饲养管理等个方面的详 细记录。准备好抽血所要用到的酒精棉球、橡皮带等工具 材料。 • 1.2.2血清样本的制备 • 先用注射器抽取可疑临床病例的前或后肢静脉血液2～ 2 3ML，于试管中，放入离心机中离心2000r/min，10min。 离心机分离出血清（无溶血），生理盐水作1比1稀释血清 后使用，或置冰箱待用。
3 分析与讨论
3.1病原学
• 弓形虫属顶端复合物亚门、孢子虫纲、真球虫目，细胞内 寄生性原虫。其生活史中出现5种形态，即滋养体（速殖 子）；包囊（可长期存活于组织内），呈圆形或椭圆形、 直径10～200µm、破裂后可释出缓殖子、裂殖体；配子体 和卵囊。前3期为无性生殖，后2期为有性生殖。弓形虫生 活史的完成需双宿主：在终宿主（猫与猫科动物）体内， 上述5种形成俱存。卵囊随动物粪便排出，在适宜温度 （24℃）和湿度环境中，约经2～4天发育成熟，抵抗力强， 可存活1年以上，如被中间宿主吞入，则进入小肠后子孢 子穿过肠壁，随血液或淋巴循环进入全身各组织细胞内以 纵二分裂法进行增殖。
• 猫弓形虫病症状 • ①急性病例： • 肺炎症状，持续高热、厌食、嗜睡、呼吸急促，咳嗽等。 也有出现脑炎症状、早产和流产的病例。 • ②慢性弓形虫病时常复发。 • 厌食、中枢神经障碍、心肌疾患，肝损伤，流产或死胎， 以及经抗生素治疗无效的发热、死前出现呼吸困难。 • 某些急性、慢性患病猫出现虹膜炎。
1. 材料与方法 1.1材料
• 血清：临床随机抽取犬与猫的血液样本来提取 • 弓形虫抗体试剂盒：该试剂盒由杭州科彤畜牧兽医研究所、 杭州亨力动物医院总经销，试剂盒置2-8℃可保存数月， 可常温运输，不可冷冻 • 10ul微量移液枪、5ML注射器、冰箱 10ul 5ML • 计时器：检测时计算试剂与样本的反应时间
• 弓形虫广泛寄生犬，而且有些犬出去时体内便带有病原， 一般在犬免疫状态良好条件下不会发病，但可终生存在于 机体，而仅有极少数能够表现临床症状。当幼龄犬在断奶 后失去母源抗体而自身免疫功能还不够完善时，便容易发 病，该阶段是犬发生各种传染病的最主要时期。此时可能 单独发生弓形虫病，也可能与犬瘟热同时发生。
江苏畜牧兽医职业技术学院
犬猫弓形虫病分析
宠医053 指导老师 谢娇 张斌
摘要
• 本文通过对上海爽佳宠物诊所41例临床病 例（主要为犬、猫）进行随机抽取血液样 本以提取血清，用层析法-弓形虫IgM试纸 条进行免疫检测，通过对检测线的识别来 判别检测其为阳性或阴性。分析检测结果 来统计家养犬、猫的弓形虫感染情况，结 果表面有41%的宠物携带弓形虫，对人畜 危害较大。
3.3 临床表现
• 犬的弓形虫病症状似犬瘟热、传染性肝炎： • 主要表现为发热、厌食、精神萎靡、虚弱、粘膜苍白，眼 鼻有分泌物咳嗽、呼吸困难，甚至发生剧烈性的出血性腹 泻。 • 少数病犬有剧烈呕吐，随后出现麻痹和其他神经症状。 • 怀孕母犬发生流产或早产，所产仔犬往往出现排稀便、呼 吸困难和动失调等症状。
致谢
• 本毕业论文得到了张斌老师的精心指导， 在此表示忠心感谢！
参考文献
• [1] 蒋金书. 动物医生手册[M]. 北京：中国农业出版社， 2005年 • [2] 张秀美. 新编兽医实用手册[M]. 山东科文技术出版社， 2004年 • [3] 李慧珠. 弓形虫与弓形虫病[J]. 生物学通报, 2002,(05) . [J]. , • [4] 陈西岐. 犬猫的弓形虫病[J]. 农家参谋,2004,(11) • [5] 吕元聪. 我国弓形虫病实验诊断研究进展[M].广西预防 医学，2002，（01） • [6] 周永安. 弓形虫病诊断技术的研究进展及其应用[J]. 中 国人兽共患病杂志,2003(05) • [7] 都建，沈继龙. 弓形虫感染的免疫与基因诊断技术研究 进展[J]. 疾病控制杂志,2004,(02)