沙门氏菌快速检测方法
1试剂与仪器
1.1所用器具
三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针
1.2仪器：分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅
1.3所用试剂和培养基
1.3.1缓冲蛋白胨水（BPW）培养基
称取BPW培养基20.1g，加入蒸馏水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，以90mL/瓶分装到各锥形瓶，并于121℃灭菌15min，冷至常温。

1.3.2四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液
取TTB增菌液基础93.6g，加入蒸馏水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装于锥形瓶中，每瓶100mL。

将锥形瓶放入灭菌锅中，121℃灭菌20min；冷至30℃，每100mL基础培养基中加入TTB配套试剂碘液和煌绿各一支（开启前用75%酒精棉消毒西林瓶表面），混合均匀。

2、操作步骤
2.1配制BPW培养基（第一天）
2.2培养基冷却至室温后，对培养基和整个房间进行紫外灭菌15分钟,关灯60min 后使用。

（第一天）
2.3预增菌（第一天）
称量样品10g至含BPW培养基的锥形瓶，并及时盖上盖子，150rpm下振荡10min，于36℃±1℃培养18h左右。

2.4配制TTB增菌液（第一天）
2.5增菌（第二天）
2.5.1接种和培养
轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于9mLTTB增菌液内，于42℃±1℃培养18h～24h。

2.5.2培养现象
菌名菌号生长状况 TTB培养特征
静置后浑浊CMCC(B)50071 伤寒沙门氏菌良好
静置后浑浊良好鼠伤寒沙门氏菌 CMCC(B)50115
静置后清亮不生长大肠埃希氏菌 ATCC25922
2.6配制沙门氏菌显色培养基平板（第二天）
2.6.1取瓶内干粉4.75g，用100mL蒸馏水溶解，可按比例扩大或者缩小。

2.6.2混合加热至100℃，搅拌加热至完全溶解，冷却至50℃倒平板。

小时。

24℃培养37样品用画线或者涂布法接种，2.6.3．。