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人教版高中生物选修三专题复习课件

DNA连接酶可把平未端或黏性末端之间的缝隙 “缝合”起来,即相当于把梯子两边的扶手的断 口连接起来,这样一个重组DNA分子就形成了。
3.分子运载车——运载体 (1) 作用: 将目的基因送入受体细胞
(2) 具备的条件:
a.能自我复制. b.具有一个或多个酶切位点. c.有标记基因. d.对受体细胞无害. (3)种类: 质粒、噬菌体、动植物病毒
状.
基因工程的应用
(一)植物基因工程硕果累累:
1.抗虫转基因植物 2. 抗病转基因生物 3.抗逆转基因作物 4.利用转基因改良植物的品质
方法:
(二)动物基因工程前景广阔:
利用转基因动物生产药物--动物乳腺生物反应器
获取目的基因 (药用蛋白基因)
构建基因表达载体
(在药用蛋白基因前 加乳腺蛋白基因的启
质粒——细菌拟核DNA之外结构简单、
能自主复制的很小的环状DNA分子。
小结
基因工程 的工具
主要存在于原核生物中
限制酶
具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键
DNA连 接酶
连接磷酸二酯键
种类
E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶
结构简单,大小适中
能在宿主细胞中自
运载 工具
具备的 条件
基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
生物体外
操作对象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本过程 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达
实质
基因重组
结果
新生物类型、生物产品
重难点剖析: 基因工程的“专用工具”
1.限制性核酸内切酶 黏性末端
来Ec源oR:I 主要从原核细黏胞性分末离端 作用:一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某
动子)
显微注射导入 哺乳动物受精
卵中
形成早期 胚胎
将胚胎送入母体动 物
发育成转基因动物(只有在产下的雌性动物个体 中,转入的基因才能表达)
用转基因动物作器官移植的供体
供体动物:猪
存在的难题:免疫排斥
解决方法:将供体基因组导入某种基因调节因子,以抑
制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决 定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫 排斥反应的转基因克隆猪器官。
种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部 位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(切割 DNA分子) 作用结果: 形成平未端(SmaI)及黏性未端(EcoRI)
2.DNA连接酶——“分子缝合针” 1)、种类: E·coli DNA连接酶(黏性末端)
T4 DNA连接酶 (黏性末端和平末端)
2)、作用部位:磷酸二酯键
鉴别受体细胞中是否含有 目的基因 ,从普通细胞 中筛选出含目的基因的受 体细胞
重组质粒形成过程:
(1)用一定的_限__制__酶____ 切割质粒,使其出现一个 切口,露出__黏__性__末__端____。 (2)用_同__一__种__限__制__酶____ 切断目的基因,使其产生
相同__的__黏__性__末__端__。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ• 生物选修三专题复习
基因工程概念
基因工程是指按照人们的意愿,进行 严格的设计,并通过体外DNA重组和 转基因等技术,赋予生物以新的遗传特 性,从而创造出更符合人们需要的新的 生物类型和生物产品。
由于基因工程是在DNA分子水平上进 行设计和施工的,因此又叫做DNA重 组技术
定向改造生物啦!
基因工程相关要点
Ca2+处理法
将目的基因导入微生物细胞
原核生物繁殖快、多为单细胞、遗 传物质相对较少,故早期常作为受体 细胞。
大肠杆菌细胞 用Ca2+处理 感受态细胞
重组表达载体DNA 溶于缓冲液
导入 混合
(四)目的基因的检测与鉴定
目的基因是否插入转基方法: DNA分子杂交 因生物染色体的DNA上 检测 目的基因是否转录:方法: 分 子 杂 交
1、基因工程又叫做_基__因_ 拼接技__术_或D__N_A__重__组__技_ 术。
2、基本工具:
“分子手术刀”:限制性核酸内切酶
“分子缝合针”:DNA连接酶
基因进入受体细胞的载体: 运载体 3、基本操作步骤:
1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建(核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定
目的基因是否表达:方法: 抗原抗体杂交
鉴定—— 抗虫性鉴定、抗病性鉴定、生 物活性鉴定等(生理、性状水 平的检测)
转基因生物
转基因生物是指利用 基因工程 技术导 入 外源基因 培育出的能够将新性状稳定地 遗传 给后代的 基因工程 生物。
优 点:
打破了常规育种难以突破的 物种之间的界限(生殖隔离), 定向 的改变了生物的遗传性
(三)、基因工程药品异军突起: 工程菌:用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表
达的菌类细胞株系。 我国已生产的产品:白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等
(四)基因诊断与基因治疗:
基因诊断:用放射性同位素
等标记的“DNA探针”检测 肝炎病毒等病毒感染及遗传缺 陷,不但准确而且迅速。
我复制并稳定存在 具一个或多个限制酶切位点 具标记基因
质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒
基本操作步骤
(一)目的基因的提取
目的基因:主要是指_编__码__蛋__白__质__的__结__构__基__因。 获取方法: 1、_从__基__因__文__库___中获取目的基因 2、人工合成法:化学方法合成DNA片段(反转录
(3)将切下的目的基因片段插入质粒的__切__口__处, 再加入适量______D_N_A_连__接,酶形成了一个重组DNA分 子(重组质粒)
(三)将目的基因导入受体细胞
受体细胞 导入方法 农杆菌转化法
导入植物 细胞: 体细胞 受精卵 基因枪法 花粉管通道法
导入动物 细胞: 受精卵 显微注射法
导入微生物细胞:
法、直接合成法) 3、 PCR反应扩增DNA
原理:DNA复制
过程:加热DNA解链 冷却引物结合到互补DNA 链 互补链合成
条件 :耐高温DNA聚合酶基因的构建:提取某种生物的全部DNA 用适当的限制酶切
一定大小的DNA片段
将DNA片段与载体连接 导入受体菌中储存
某种生物的mRNA
逆转录
单链互补DNA
双链cDNA片段 与载体连达载体构建
1、基因表达载体由__启__动_子___、_目_的__基__因__ __终__止__子__、标__记_基__因 四部分组成。
2、启动子作用:RNA聚合酶识别和结合的位点,
启动转录的“开关”。
3、标记基因的作用:
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