一、选择题（每题1分，共计12分）1、体外培养in vitro包括那三个层次（ABD）。

A细胞培养B组织培养C大规模培养D器官培养2、现在一般皆公认（B）为“组织培养之父”动物细胞培养的奠基人，因为他的实验表明，为细菌学家早已应用的凹玻片悬滴制备细胞培养技术，不仅可以维持组织上体外生长数周，而且是一种能对生物学知识做出十分重要贡献的研究方法。

A Wilhelm RouxB Ross Granville HarrisonC M.T.BurrowsD Alexis CarrelE W.H.Lewis3、培养的哺乳动物细胞一定要防止污染，特别是生物学污染，常见的生物学污染主要是（ABC）。

A真菌B细菌C支原体D炭疽菌E放线菌F病毒4、在每一次传代培养过程中，培养物将首先被蛋白酶消化而被制备成细胞悬液，再用于种植。

种植后的细胞都要经历相似的恢复和生长过程。

根据每一次传代培养的细胞生长变化的过程，习惯上把每一代细胞的生长过程分为（ABC）三个阶段。

A潜伏期B指数生长期C停滞期D衰退期E贴壁黏附期F铺展期5、“生物导弹”是指（D）。

A单克隆抗体B杂交瘤细胞C产生特定抗体的B淋巴细胞D在单抗上连接抗癌药物6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（D）。

A容易产生各种变异B具有更强的全能性C取材十分方便D分裂增殖的能力强7、对细胞全能性的表述正确的是（D）。

A非离体植物细胞能够表现全能性B动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现C单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性D花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现E受精卵发育到囊胚阶段的内细胞团具有完全的细胞全能性8、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（A）。

A经过免疫的B淋巴细胞B没经过免疫的T淋巴细胞C经过免疫的T淋巴细胞D没经过免疫的Ｂ淋巴细胞9、引起大规模细胞培养过程中的细胞凋亡的主要直接因素有哪些？（ABC）A有毒物质或抑制因子产生B营养成分耗尽C其他物理因素D细胞遗传物质突变10、大规模细胞培养方法比较多，大致可分为（ABC）。

A悬浮培养B固定化培养C载体培养法D培养瓶培养E96孔板培养、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，而要利用培养哺乳动物细胞获得这是因为（CDE）。

A哺乳动物细胞增殖快B哺乳动物细胞培养成本低C大肠杆菌缺乏相应的糖基化酶D哺乳动物细胞具有翻译后蛋白修饰功能E大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化12、组织工程有哪三要素？（ABD）A种子细胞B支架材料C工程方案设计D细胞生长与分化的因子二、名词解释（每题2分，共20分）1、愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。

2、传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。

3、细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。

4、染色体工程：按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的的技术。

5、外殖体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体（explant）。

6、胚胎生殖干细胞：来源于生殖细胞的胚胎干细胞。

7、细胞融合：又称体细胞杂交，是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。

8、微细胞：又称微核体，是指含有一条或几条染色体（即只含一部分基因组），外有一薄层细胞质和一个完整质膜的核质体。

9、试管动物：将供体的精子和卵子在体外受精、体外培养胚胎，然后将发育到一定程度的胚胎植入受体得到的动物。

10、嵌合动物：将两枚或两枚以上的胚胎（同种或异种动物）的部分细胞或全部细胞融合在一起使之发育成一个胚胎，然后移植到受体母畜内继续发育，形成动物。

0.5分，共28分）1、动物细胞培养需要防治污染问题，显著污染的标志是显著改变，____细胞外型_____模糊，甚至出现漂浮的集落。

2、目前，体外受精成功的标志至少是看受精卵是否可以发育至____囊胚期___阶段。

3、超数排卵是指在母畜发情周期的适当时间用人工的方法促使其有更多的___卵泡_______发育、成熟、排卵的一项技术，目的是最大限度地利用母畜的生殖能力。

经常采用的方法主要是向动物体内注射某些促性腺激素，对卵巢产生作用促进排卵。

4、胚胎分割——移植技术是胚胎融合、嵌合、无性繁殖和转基因技术等生物工程的一项重要的基本技术，是生产克隆胚胎______的又一种有效方法。

5、细胞重组技术将___细胞融合技术____与____细胞核质分离____等技术相接合，为重新构成不同类型的杂种细胞____提供了可能。

6、1978年7月25日世界上第1例试管婴儿____Louis Brown____在英国诞生，其奠基人为英国妇产科专家Stephone及胚胎学家___Edwards____。

7、胚胎工程的技术方法主要包括：__体外受精___、__胚胎移植__、胚胎分割与融合、胚胎性别鉴定、胚胎冷冻技术和基因导入等。

8、第三代“试管婴儿”主要技术步骤（同试管动物）：（1）__超排卵_____、（2）卵泡监测与取卵、（3）精子的优选与处理、（4）__体外受精__、（5）胚胎的体外培养及挑选、（6）__胚胎移植__、（7）胚胎着床前遗传学诊断。

9、细胞核移植克隆动物技术环节主要包括核供体细胞的准备、__受体细胞的去核__、细胞核移植、____激活___、重组胚的培养与移植、核移植后代的鉴定。

10、胚胎嵌合与细胞融合的主要区别在于细胞融合是每一个子代含有两套遗传信息，结果产生___一套新的___表型。

而胚胎嵌合的特点是分别具有两套表型。

11、细胞融合试验最常用的生物促融剂是___仙台病毒（HVJ）。

12、动物脾脏有上百万个B淋巴细胞，一个细胞就是一个克隆，它针对抗原上的一个____抗原决定族_____产生的抗体是单克隆抗体。

13、生物工程的研究领域主要包括___基因工程_____、___细胞工程____________、_____酶工程___________、____发酵工程（微生物工程）______四部分。

14、生物工程的目的主要有两个，一是__生产生物制品__，二是__创造新物种____。

经历了以_________工业微生物过程生产发酵______产品为代表的第一代生物工程，以__抗生素工业__、___氨基酸发酵工业____和___酶制剂工业_______产品为代表的第二代生物工程和以转基因产品等为代表的第三代生物工程技术。

第一个实现微生物发酵大规模工业化生产的生物工程产品是___青霉素_____。

15、细胞工程是指__应用细胞生物学和分子生物学______的方法，通过类似于工程学的步骤，在___细胞整体____水平或____细胞器____水平，按照人们的意愿来改变细胞内的__遗传物质____以获得新型生物或特种细胞产品的一门综合性科学技术。

细胞工程的一些主要研究领域包括：__动植物细胞与组织培养__、___细胞融合____、__染色体工程_____、____胚胎工程______及细胞遗传工程等。

16、植物再生的途径包括___器官发生____途径和___胚状体发生______途径。

17、植物组织培养的核心环节是在诱导___脱____分化、再分化过程中不同__激素___搭配的培养基的选择与应用。

18、细胞分裂素与生长素的比例在脱分化和再分化中起者关键作用，当比值高时产生___芽__，当比值低时，容易产生__根___。

19、植物单细胞制备的常用方法有__机械法__、___酶法__、___愈伤组织诱导法___。

20、植物组织、细胞培养常见培养基有___MS培养基____和____B5____培养基。

21、多倍体是指每个体细胞中含有__三个或更多染色体组____的个体。

多倍体产生的方法主要有___生物学方法___、___物理学方法____和___化学方法___；目前最普遍采用的方法是__化学试剂诱导____法，其中___秋水仙素___则是至今发现的最有效、使用最为广泛的诱导剂。

四、简答题（每题5分，共计30分）1、采用植物细胞培养进行药物生产有什么优点？2、简述组织培养和细胞培养的区别与联系。

3、什么是干细胞？请举例说明干细胞培养有什么意义。

4、请阐述无性繁殖克隆羊——多莉的过程。

（可以画图表示）5、简要列出建立一个细胞培养实验室的基本设施和条件。

6、为什么多倍体往往高度不育？1、采用植物细胞培养进行药物生产有什么优点？答题要点：（1）不受地区、季节、土壤及有害生物的影响；（2）代谢产物的生产完全在人工控制条件下进行，可以通过改变培养条件和选择优良培养体系得到超整株植物产量的代谢产物；（3）保护生态环境，提高生产效率；（4）节约大量耕地（5）有利于研究植物的代谢途径，还可以利用基因工程手段探索或创造新的合成路线，得到新的有价值的物质。

、简述组织培养和细胞培养的区别与联系。

答题要点：组织培养指从机体内取出组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外进行培养，使之生存或生长成组织。

细胞培养是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织。

3、什么是干细胞？请举例说明干细胞培养有什么意义。

答题要点：干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。

其意义有：（1）组织或器官修复，如用造血干细胞重建造血机能、用胰岛细胞治疗糖尿病、用心肌细胞修复坏死的心机、用神经细胞治疗神经变性疾病等。

（2）基因治疗，如通过胚胎干细胞进行修复，将治疗基因通过其带入人体，持久地发挥治疗作用，如矫正胎儿缺陷基因等。

5、简要列出建立一个细胞培养实验室的基本设施和条件。

答题要点：液氮、离心机、超净台、发酵罐、移液器、显微镜等。

6、为什么多倍体往往高度不育？答题要点：由于三倍体的同源染色体组有3个，在减数分裂后期配子染色体组合成分的不平衡，使染色体不能正常联合，导致同源三倍体的高度不育，即在果实内没有种子。