流样动品相:阿:米6替5/林35 甲醇/20mM磷酸盐溶液pH7.0
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内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台简介
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台简介
— BEH, XBridge, XTerra
离子交换作用
O-Si
O-Si
O- (CH ) H+N OO-S- i 3 2
O-Si
O-Si
O-Si OO--Si
O-Si
当p带离H流负)﹥动电5时相性,为(硅大醇部基解
Base 对物严碱的重性保拖化留尾合及
两实验使用相同的传统C8硅胶柱
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如何解决碱性化合物和螯合物的峰形问题?
极性化合物色谱柱平台简介
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新！CSH技术介绍
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高纯硅胶柱可用于解决您 所有的应用难题吗?
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是否遇到这样的问题？
分磷离酸三钠环缓类冲抗液忧(pH郁7剂, 时50色°谱C)峰为形流随动时相间的变化
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新！CSH技术介绍
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2
Waters 现代色谱柱一览
超纯硅胶色谱柱
ACQUITY UPLC HSS C18/C18 SB HPLC HSS SunFire™ Symmetry® SymmetryShield
测试化合物:
1. Uracil
对羟基苯甲酸丁酯 2. Propranolol
3. Butylparaben(
)
2 35
1 46 7
邻苯二甲酸二丙酯 4. Naphthalene
5. Dipropylthalate(
)Hale Waihona Puke 6. Acenaphthene
色流谱动柱相 7.
Amitriptyline
2
: 4.6 x 100 mm, 3.5 µm
1
AU 0.00
第5天 4
2
3
1.00
2.00
3.00
4.00 M5i.n0u0tes 6.00
7.00
8.00
9.00 10.00
-
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硅胶基体颗粒
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Silica pH 2 - 8 Polymer pH 2 -14
1
: 65/35 (v/v) MeOH/ 20 mM K3PO4, pH 7.0
3 4
5
柱温: 23.4 ºC
柱流速: 1 mL/min
6
25 13
4
XBridge™ C8
7 XBridge™ Phenyl
XBridge™ Shield RP18 76
2 1
3
5
4
XBridge™ C18
6
7
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Shield RP18/RP8的可能作用机理
水 “屏蔽”层
H3C H
N +
CH3
了硅“水带羟层负基”屏电蔽的
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改善了反相硅胶表面与水的浸润性－100%水相流动相兼容 降低了碱性化合物的保留 降低了拖尾现象
23
XBridgeTM 固定相系列:分离选择性各不相同 (流动相pH为7下的测试结果)
(Hybrid Particle Technology, HPT)
— 新美颗，粒明的显传改质善特了性柱可效与和最对新碱一性代化的合超物纯的硅色胶谱柱峰媲形
— 大大强化了色谱柱在高pH流动相中的寿命
— 提HI供LI六C种，固A定m相id(eC)1，8可, 覆C8盖, 绝RP大1多8数, 苯的基应,用领域
82
pH
81
pH
12
3
内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新！CSH技术介绍
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反复摸索、优化流动相组成以达到可接受的色 谱峰形(例如使用竞争性碱TEA或离子对色谱)
年代策略 — 1970-1980 — 方法开发过程复杂、漫长
从改善反相填料着手降低硅醇基活性
— 自1994至今 — 无需花费大量时间去优化峰形
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9
超纯硅胶填料(B型填料)合成过程（1994）
离子交换 能保留任何离子型化合物
缺点
洗洗脱脱-不需可要用高于浓M度S盐分缓析冲液或采用pH进行梯度 对于不可离子化的极性化合物无效
低金属杂质
Hinokitiol
O Si
O M n+ O Si O
高金属杂质含量
2
4
6
8 Minutes
0
流动相:20 mM Phosphate Buffer pH 3.6 含( 0.05% EDTA): Acetonitrile (50:50)
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对超Sy碱纯m性硅m药胶e物基tr阿体yâ米C替18林柱峰：形良好
*
碱传性统药硅物胶阿基米体替C1林8峰柱形：严重拖尾
*
10
20
30
40 分钟
传碱统性型化合C1物8峰硅形胶的柱影上响金属杂质对
6
硅胶颗粒的表面处理
1) C18-bonding 2) TMS-endcap
硅并羟不基是发所生有反的应
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7
碱性分析物在硅胶柱上的拖尾机理
4
传统硅胶填料（A型填料）的生产过程
Na2SiO3 (矿物) + 2H+
Si(OH)4 (原硅酸)+ 2Na+
硅胶颗粒 (含金属杂质!)
C18/C8 键合 + 封尾
C18/C8 反相填料
(最终仍带金属杂质!)
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传统硅胶柱的弊端
传统硅胶柱的生产原料为矿物硅酸盐(如泡花碱),具有以下弊端:
Waters 现代色谱柱技术
Waters Chemistry Operation
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1
内容提要
Waters色谱柱分类简介 超纯硅胶色谱柱平台
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台
0
5
10
15
20
25
Minutes
Alden, Iraneta
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高XpBHr寿id命g更e长™十稳倍以定上性！ 数据
第二代杂化颗粒
第一代杂化颗粒
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内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台简介
— HSS, SunFire, Symmetry
0.10
AU -0.005 0.26
1
Peak Number UPS Tailing Factor
4
1. Doxepin
1.2
2. Nortriptyline 1.1
3. Amitriptyline 1.1
第1天
4. Trimipramine 1.0
2
3
1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 Minutes
与键合相的疏水性作用
当时性流,(未硅动解醇相离基p)H趋﹤于3中
O-Si O-Si OH O-Si
O-Si OH
O-Si OH O-Si O-Si O-Si
OH O-Si O-Si
Base
双21))重与与保残键留余合机硅相理醇的:基的间疏的水离性子作交用换; 作用
H+N(CH3)2
O-Si
O-Si O-
杂化颗粒色谱柱平台简介
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台简介
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新！CSH技术介绍
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Alden, Iraneta
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反相色谱技术保留极性化合物: 对所有色谱柱生产商的挑战！
非极性固定相
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去替甲林基阿米
4 5 6 7 8 9 10 11 12 pH
在高pH下硅胶颗粒溶解
0
1
2
3
Minutes
Nortriptyline
Amitriptyline
pH 10
0
1
2
3
Minutes
17
第二代杂化颗粒柱技术(2004): Ethylene Bridged Hybrid (BEH) Particles