2020届一轮复习人教版基因工程作业1.(2019·长沙长郡中学模拟)下列关于基因工程的叙述中,正确的是()A.DNA连接酶和RNA聚合酶催化生成的化学键相同B.DNA连接酶对“缝合”序列不进行特异性识别,无专一性催化特点C.受体细菌若能表达质粒载体上抗性基因,即表明重组质粒成功导入D.培育转基因油菜,需对受体细胞进行氯化钙处理2.在DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液(3)过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD.含较纯DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液3.金茶花是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病。
科学家在某植物中找到了抗枯萎病的基因,下图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。
相关叙述正确的是()A.图中①②在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因B.形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶C.由④培育至⑤的过程中,依次经历了脱分化、再分化过程D.在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育出新品种4.在基因工程中利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。
限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、Eco RⅠ和Sau3AⅠ。
下列分析错误的是()A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体B.构建重组DNA时,可用Eco RⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用Eco RⅠ切割后,含有2个游离的磷酸基团D.用Eco RⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA5.(2019·天津一中调研)chIL基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。
为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建缺失chIL基因的变异株,构建过程如图所示。
下列叙述不正确的是()A.chIL基因的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸B.①②过程应使用不同的限制性核酸内切酶C.构建的基因表达载体中应含有起始密码子和终止密码子D.若操作成功,可用含红霉素的培养基筛选出所需变异株6.(2018·温州中学月考)通常禽流感病毒只能侵染鸟类,人流感病毒只能侵染哺乳类。
现用高致病性禽流感病毒和低致病性人流感病毒(哺乳类感染病毒后基本无症状)的核酸完成如下实验,该实验不能说明()A.步骤①说明流感病毒的遗传物质是DNA片段B.步骤②需要同种限制酶和DNA连接酶处理cDNA和质粒C.通过③和④产生的活病毒可能是不同病毒间核酸重组的结果D.步骤⑤说明猪的呼吸道上皮细胞可作为活病毒的宿主细胞7.(2018·烟台高考适应性练习)干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白,具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤的作用。
利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物流程如图所示。
请回答下列问题:(1)首先获取的动物干扰素基因称为______________。
利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_____________________________________________________。
(2)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是________和________。
酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列__________(填“相同”或“不相同”)。
(3)过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时,常用________处理根瘤农杆菌,其目的是______________________________________________________________________ __________________________________________________________________________。
(4)在培育愈伤组织的固体培养基中,除了无机盐、有机营养物质、琼脂、植物激素外,还需添加卡那霉素。
卡那霉素的作用是__________________________________________。
在分子水平上通常采用________________技术检测干扰素基因是否导入受体细胞。
8.胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。
图1 是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。
请回答下列问题:(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。
(2)图1中启动子是________酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是___________________________________________________。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有_____________________________________________________________________________________________________________ __。
(4)β半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于_______________________________________________________。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为_______________________________________________________________________________________________ __。
(6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。
你的推测结果是____________,理由是___________________________________________________。
9.(2018·福州一中模拟)请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。
图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。
某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第1组:____________________________________________________________;②第2组:____________________________________________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA 聚合酶的功能,这是因为___________________________________________________________________________________________________________________________________。
(4)用限制酶Eco RⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对),请画出质粒上Eco RⅤ、MboⅠ的切割位点。
10.下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。
请回答下列问题:(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用______________________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过____________酶作用后获得重组质粒。
为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌中。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中____________。
(3)若Bam HⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为______________________,对于该部位,这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ酶切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
11.(2019·长春模拟)抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白,临床上主要用于血液性疾病的治疗。
凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。
下列是生产这两种酶的相关思路,请回答下列问题:(1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。
①图中过程a指的是利用____________法将目的基因导入受精卵,受体细胞不选用体细胞的理由是______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ __。
②在胚胎移植前,需进行____________,目的是确定要培育的个体能产奶。
③可采用__________________法来鉴定牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。
(2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①从牛胃细胞中提取mRNA,再通过__________形成cDNA。
以此cDNA为模板通过PCR扩增目的基因,有时需要在引物的5′端设计__________(填“限制酶”“DNA连接酶”或“RNA聚合酶”)识别序列,以便构建基因表达载体。
②为提高基因表达载体的比例,在构建基因表达载体DNA分子(如图2所示)时最好选用________________作为限制酶。
③经研究发现,如果将该凝乳酶的第20位和第24位氨基酸变为半胱氨酸,则其催化能力将提高2倍。