实验五 离体蛙心灌流实验
一 实验目的
1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。
2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。
二 实验原理
心脏离体后,如用人工灌流的方法,保持其新陈代谢的顺利进行,则心脏仍
能有节律的自动收缩和舒张,并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应与动
物内环境的理化性质基本相近,因此改变灌流液的理化因素,则可引起心脏活动
的变化。
1、任氏液:正常对照
含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4
和蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流:
3、2%CaCl2灌流
4、 1%KCl灌流
5、
1:10000 E 灌流
6、1:10000 Ach灌流
7、心得安
β1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作用。
8.、阿托品
M受体阻断剂,抑制Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力。
三 实验器材
微机生物信号处理系统, physiology系统,学校服务器系统,蟾蜍离体蛙
心,任氏液,1%KCl,3%CaCl2,65%NaCl,1/10000 E,心得安+1/10000,1/10000
Ach,阿托品+1/10000 Ach。
四 实验步骤
1、标本制备(观看视频)
2、仪器及标本的连接
3、具体软件操作:
1)离子试剂:任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任
氏液清洗→2%CaCl2溶液→任氏液清洗
2)药物试剂:肾上腺素(E)→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach,
任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。
五 实验结果
图1 离体蛙心灌流
表1 离体蛙心灌流数据记录
实验项目
收缩强度 心率
处理前 处理后 处理前 处理后
任氏液 2.45 2.45 34
0.65% NaCl 2.45 1,65 34 34
2% CaCl2 1.27 3.43 34 38
1% KCL 2.43 2.43 35 21
1:10000E 0.9 3.46 33 35
E+心得安 1.13 2.49 33 34
1:10000Ach 1.05 1.11 33 0
Ach+阿托品 1.13 2.46 34 34
六 结果分析
此实验说明心脏具有自律性,兴奋性,传导性,收缩性,离体心脏静脉窦还
能产生兴奋并传导到心房和心室,引起心脏有节律的兴奋和收缩。体内细胞所直
接生存的环境较为稳定,内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要
条件,所以改变灌流的溶液,会引起心脏收缩的改变。