粗调节器 细调节器
（二）光学系统 ➢ 接目镜（目镜） ➢ 接物镜（物镜）
低倍镜（10×） 高倍镜（40×） 油镜（100×） ➢ 聚光镜 ➢ 虹彩光圈 ➢ 反光镜
增加显微镜的分辨率 ➢ 显微镜的放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数
显微镜的分辨率：显微镜能辨 别两点之间的最小距离的能力。
➢ D=λ/2NA=λ/2n·sin(α/2 )
吕氏碱性美蓝染色液作用时间不同，对酵母菌死细胞数量 有何影响？试分析其原因。
实验二、放线菌、霉菌的形态观察
目的要求 ➢ 学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法； ➢ 初步了解放线菌的形态特征； ➢ 了解四类常见霉菌的基本形态特征。 实验器材 ➢ 菌种
细黄链霉菌，曲霉、青霉、根霉、毛霉
➢ 培养基 高氏Ⅰ号琼脂培养基 察氏琼脂培养基
根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
毛霉：菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
青霉：菌丝、分生孢子梗、帚状分支小梗及分生孢子
曲霉：菌丝、足细胞、分生孢子梗、初生小梗、次生小梗、顶囊、分 生孢子
实验结果 ➢ 绘图说明你所观察到的放线菌和霉菌的形态特征。 思考题 ➢ 镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？ ➢ 你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌？
增加显微镜的分辨率： D=λ/2NA=λ/2n·sin(α/2 )
D：分辨率 NA：物镜的数值孔径值
：可见光的波长（平均 0.55m) n: 物镜和被检标本间介 质的折射率 ：镜口角（即入射角）
显微观察 ➢ 低倍镜观察 ➢ 高倍镜观察 ➢ 油镜观察
在待观察的样品区域滴加香柏油，从侧面注视，用 粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中。
活细胞：无色；死细胞：蓝色
（二）曝气池中微生物的形态观察
在载玻片中央加一滴活性污泥曝气池混合液→打散混匀→ 盖上盖玻片→低倍镜观察→高倍镜观察→绘出所观察到的 微生物形态
实验结果
绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。
分别绘出你在低倍镜、高倍镜观察到的菌胶团、原生动物、 藻类等的基本形态。
思考题
实验三
油镜的使用、细菌的单染色及革兰氏染色
（一)、油镜的工作原理
增加照明强度 ➢ 当光线由反光镜通过玻片
与镜头之间的空气时，由 于空气与玻片的密度不同， 有些光线会因折射或全反 射，不能进入镜头，降低 了视野的照明度；若中间 的介质是一层油（其折射 率与玻片的相近），则几 乎不发生折射，增加了视 野的进光量，从而使物象 更加清晰。
显微镜用毕后的处理 ➢ 上升镜筒，取下载玻片； ➢ 用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸沾取少量
➢ 溶液或试剂 0.1%美蓝染色液，乳酸石碳酸棉蓝染色液,50% 乙醇
➢ 仪器或其他用具 显微镜，盖玻片，载玻片，接种环，解剖针等。
（一）放线菌的形态观察
扦片法 ➢ 倒平板→取孢子划线接种→无菌操作将灭菌的盖玻片
以大约45℃扦在接种线上→28℃倒置培养3-5d →取培 养后的盖玻片直接镜检或用0.1%美蓝对盖玻片染色 后观察 ➢ 观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝的卷曲状况，以及 分生孢子的形状，并绘图说明。
实验报告格式
1、实验目的 2、实验原理 3、实验仪器、溶液试剂 4、实验步骤 5、实验结果（如绘图、列表等） 6、思考题
一、目的要求
了解普通光学显微镜的构造、基本原理、维护和保养的方 法 学习并握普通光学显微镜的正确使用方法
二、显微镜的基本结构
（一）机械装置 ➢ 镜座 ➢ 镜臂 ➢ 镜筒：单筒和双筒两种 ➢ 物镜转换器 ➢ 载物台 ➢ 载物台转移器 ➢ 调焦装置
实验要求
上课准时、不得无故缺席，实验报告要及时上交。 实验期间不得大声喧哗、服从老师的安排、注意安全。 实验器材专人专用，对仪器要爱护，损坏实行赔偿制度。 维护好实验室的环境卫生，实行值日生制度。
实验报告要求
统一用A4纸手写实验报告 封面格式
1、实验课程名称 2、实验项目名称 3、学生所在的专业、班级、姓名、学号 4、实验日期 5、同组者姓名
五、思考题
使用显微镜时哪些地方须特别？
二、酵母菌、曝气池中微生物等形态观察
目的要求 ➢ 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式； ➢ 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法； ➢ 观察曝气池中的微生物形态
基本原理
美蓝是一种无毒性染料.氧化型呈现蓝色,还原型 呈现无色.用美蓝对酵母的活细胞进行染色,代谢活力 强的细胞具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧 化型变为无色的还原型.因此,具有还原能力的酵母活 细胞为无色,死细胞或代谢能力弱的衰老细胞为蓝色.
D：分辨率 NA：物镜的数值孔径值
：可见光的波长（平均 0.55m) n: 物镜和被检标本间介 质的折射率 ：镜口角（即入射角）
四、显微镜的使用方法
观察前的准备
➢ 显微镜的安置
➢ 光源调节
➢ 根据个人情况，调节双筒显微镜的目镜
右眼看清
调节左目镜的视度调节圈
扳动镜管，调节至瞳孔间距
显微观察 ➢ 低倍镜观察 ➢ 高倍镜观察（同焦现象） ➢ 油镜观察
实验器材 ➢ 菌种
红酵母 啤酒酵母 曝气池活性污泥混合液
➢ 溶液或试剂 0.1%吕氏碱性美蓝染色液
➢ 仪器或其他用具 显微镜，盖玻片，载玻片，滤纸，擦镜纸。
（一）酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别
制片 ➢ 在载玻片中央加一滴0.1%美蓝→取菌少许→混匀→盖
上盖玻片→静置3min或0.5h 观察 ➢ 用高倍镜观察酵母的形态和出芽生殖 ➢ 根据颜色鉴别死活细胞
在待观察的样品区域滴加香柏油，从侧面注视，用 粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中。
显微镜用毕后的处理 ➢ 上升镜筒，取下载玻片； ➢ 用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸沾取少量
二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后用干净的擦镜纸 擦去残留的二甲苯； ➢ 用擦镜纸清洁物镜及目镜，用绸布清洁显微镜的金属 部件； ➢ 将镜体各部分复原。
（二）霉菌的形态观察
直接制片观察法 ➢ 在载玻片中央加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液； ➢ 用解剖针挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先用50％乙
醇洗去脱落的孢子，再放在载玻片的染液中(青霉、曲 霉取菌丝时需连同培养基一起挑取)； ➢ 用解剖针小心分散菌丝，盖上盖玻片； ➢ 置低倍镜或高倍镜下观察。 绘图说明四种霉菌的形态特征(有无横隔)。