分枝杆菌属分枝杆菌属 (Mycobacterium)：是一类细长略弯曲的杆菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名，又称抗酸杆菌。

包括结核分枝杆菌，麻风分枝杆菌等。

结核分枝杆菌结核分枝杆菌(M.tuberculosis)，俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。

本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸。

这和其染色性、生长特性、致病性、抵抗力等密切相关。

一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)。

可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。

结核病至今仍为重要的传染病。

一、生物学性状1.形态与染色(1) 菌体细长略弯曲，成堆排列，排列上有分枝倾向。

(2) 无鞭毛、无芽孢、有荚膜。

(3) 抗酸染色阳性——菌体染成红色。

细胞壁有大量脂质，不易着色和脱色。

(4) 人工培养后呈多形态，抗生素作用后可呈串珠状。

(5) 抗生素诱导后，可变为L型细菌，抗酸性消失；临床标本中可见G+非抗酸性颗粒，称为Much颗粒，体内可转为结核杆菌。

2.培养特性“馋、懒、丑”(1) 营养要求高，常用罗氏培养基(蛋黄、甘油、马铃薯等)。

(2) 生长缓慢，18-24小时繁殖一代、2～3周可见菌落。

(3) 菌落米黄色，表面干燥，呈颗粒或菜花状。

(4) 专性需氧菌，液体培养基中是表面生长。

3.生化反应不发酵糖，结核分枝杆菌热触酶试验阴性，非结核分枝杆菌阳性。

4. 抵抗力强(1) 耐干燥：灰尘中存活8～10天；干酪样痰中存活6～8个月。

(2) 耐稀酸碱：3%HCl;6%H2SO4;4%NaOH不被杀死。

可用此处理干酪样痰标本。

(3) 耐药性强，常用于治疗的有链霉素、异烟肼、利福平等。

(4) 对湿热敏感：60℃30m in死亡－－巴氏消毒法可杀牛奶中结核杆菌。

(5) 对紫外线、日光敏感－－结核病人衣物可在日光下暴晒。

5.变异性(1) 细菌形态、菌落特征、抗原性的变异在异烟肼、溶菌酶等作用下形成L型（多形性），菌落变异(R-S型变异)，性状典型→不典型，毒力减弱(2) 耐药性变异结核杆菌容易产生耐药性。

(3) 毒力变异－－卡介苗(BCG)：将有毒的牛型结核杆菌接种在含有甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经过13年230代的培养，变为毒力明显减弱的活菌株。

常用于预防接种。

二、致病性与免疫性结核分支杆菌无侵袭性酶，不含内毒素，也不产生外毒素等。

其致病性主要由于：细菌繁殖引起炎症；菌体成分(荚膜、粘附、侵入、保护细菌)；代谢产物毒性作用；抗体对菌体成分产生免疫病理损伤。

1.致病物质(1) 脂质(lipid) 占细胞干重的60%。

其高含量与细胞毒力密切相关。

主要包括磷脂、脂肪酸和蜡质D，与抗酸性有关。

与毒力有关的重要成分有：1) 磷脂(phosphatide) 能刺激单核细胞增生，并能抑制蛋白酶对组织的分解作用，从而使病灶组织不完全液化．形成干酪样坏死。

2) 脂肪酸，又称索状因子(cord factor) 为分枝菌酸和海藻糖结合的糖脂。

可破坏线粒体膜，抑制白细胞游走，与慢性肉芽肿形成有关。

3) 蜡质D(wax-D) 是分枝菌酸与肽糖脂的复合物，有佐剂作用，刺激机体产生迟发型超敏反应。

4) 硫酸脑苷脂(sulfatide) 可抑制吞噬溶酶体的形成。

使结核分枝杆菌在吞噬细胞内能长期存活。

(2) 蛋白质(Protein) 可刺激机体产生无保护性的抗体。

与蜡质D结合使机体产生迟发型超敏反应，引起病变部位的病理改变。

(3) 多糖(polysaccharide) 常与类脂如腊质D结合存在于细胞壁中，引起局部病灶细胞浸润。

(4) 荚膜：荚膜的主要成分为多糖，部分脂质和蛋白质。

1) 荚膜能与吞噬细胞表面的补体受体3（CR3）结合，有助于结核分枝杆菌在宿主细胞上的粘附与入侵；2) 荚膜中有多种酶可降解宿主组织中的大分子物质，供入侵的结核分枝杆菌繁殖所需的营养3) 荚膜能防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌，甚至如小分子NaOH也不易进入。

故结核标本用4% NaOH消化时，一般细菌很快杀死，但结核分枝杆菌可耐受数十分钟。

结核分枝杆菌入侵后荚膜还可抑制吞噬体与溶酶体的融合2. 迟发型超敏反应(1) 细胞免疫与迟发型超敏反应同时存在(2) 迟发型超敏反应由结核菌素蛋白与蜡质D共同刺激产生3.所致疾病结核(1) 传染源：开放性肺结核病人痰(2) 传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜(3) 肺结核1) 原发感染:结核分枝杆菌侵入肺部后在肺内形成原发病灶，称为原发性肺结核，常见于儿童。

病菌→沿淋巴管扩散到肺门淋巴结→肺门淋巴结肿大、淋巴管炎(原发综合征)→原发感染形成纤维化或钙化而自愈。

病灶内潜伏的细菌也可成为结核病复发或内源性感染的来源。

2) 继发感染:多见于成年人。

原发灶内结核分枝杆菌或外源结核分枝杆菌再次引起的感染。

菌体(内源、外源)→再次感染→发炎→干酪样坏死和空洞→形成开放性肺结核(4) 肺外结核1) 经血液、淋巴液扩散→脑、肾、骨、关节、生殖器官结核2) 消化道→肠结核，结核性腹膜炎3) 破损皮肤→皮肤结核4. 免疫性(1) 细胞免疫为主，抗体无保护性。

因细菌为细胞内寄生。

(2) 有菌免疫－－体内有菌则有免疫力，无菌则免疫力消退。

(3) 免疫保护与变态反应并存，菌体不同成分产生不同的效应。

1) 蜡质D单独免疫动物，引起Ⅳ型变态反应。

2) 细菌DNA单独免疫动物，引起细胞免疫。

三、病原学检查1．采集标本根据感染部位采取不同的标本如痰、尿、脑脊液、腹水等2．直接涂片抗酸染色镜检，菌数少时需浓缩集菌、分离培养3．结核菌素试验测定机体对结核杆菌有无变态反应以确定有无免疫力。

(1) Ag材料：旧结核菌素(O.T)或纯化的蛋白衍生物(PPD-C和BCG-PPD)。

(2) 方法：分别取两种PPD皮下注射5个单位，48-72小时后观察红斑大小。

(3) 结果判定及其意义：1) 阳性：红斑直径大于5mm。

曾经感染或接种过卡介苗。

2) 强阳性：红斑直径大于15mm。

活动性感染，正发病。

3) 阴性：红斑直径小于5mm。

可能无感染，需排除几种情况。

① 感染初期－－细胞免疫在1~2周后出现。

② 老年人－－免疫力↓。

③ 严重结核病－－细胞免疫↓，如结核性脑膜炎。

④ 其它疾病，如肿瘤，麻疹，艾滋病等。

(4) 应用：1) 筛选需要接种卡介苗的人，阴性者接种；判断接种效果，OT试验阴性转为阳性。

2) 作为婴幼儿结核病的诊断，年龄越小，强阳性的诊断意义越大。

3) 流行病学的调查。

4) 测定肿瘤病人的细胞免疫水平－－OT试验是检测体内细胞免疫的试验。

4．动物实验5．核酸及抗体检测四、防治原则1．应用卡介苗预防接种。

2．治疗原则：早期、联合、规则、全程用药。

麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌(prae)，俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病。

流行广泛。

目前全世界约有病例1200万，主要分布在亚、非和拉丁美洲。

我国建国前流行较严重，估计约有50万例病人。

一、生物学特性：1. 形态、染色与结核分枝杆菌相似。

细长、略带弯曲，常呈束状排列。

革兰和抗酸染色均为阳性。

经治疗后可呈短杆状、颗粒状或念珠状多形性，可能是L型变异。

2. 病人渗出物标本涂片中可见大量麻风分枝杆菌存在于细胞内。

这种细胞的胞浆呈泡沫状，称麻风细胞。

这与结核分枝杆菌区别有重要意义。

3. 麻风分枝杆菌在体外人工培养至今仍未成功。

二、致病性与免疫性：1. 传播途径：(1) 通过破损的皮肤、粘膜进入人体(2) 呼吸道是一个重要的途径。

(3) 性接触传播。

2. 免疫性：细胞免疫为主。

3. 临床表现：(1) 瘤型：主要侵犯皮肤、粘膜。

传染性强，为开放性麻风。

自身抗体和受损组织释放的抗原结合，形成免疫复合物。

沉淀在皮肤或粘膜下，形成红斑和结节，称为麻风结节，是麻风的典型病灶。

面部结节融合可呈狮面状。

(2) 结核样型：该型患者的细胞免疫正常。

细胞内很少见有麻风分枝杆菌。

传染性小，属闭锁性麻风。

病变都发生于皮肤和外周神经，不侵犯内脏。

早期皮肤出现斑疹，周围神经由于细胞浸润变粗变硬，感觉功能障碍。

有些病变可能与迟发型超敏反应有关。

该型稳定，极少演变为瘤型，故亦称良性麻风。

(3) 界线类：兼有瘤型和结核型的特点，但程度可以不同，能向两型分化。

大多数患者麻风菌素试验阴性。

但也有阳性。

病变部位可找到含菌的麻风细胞。

(4) 未定类：属麻风病的前期病变，病灶中很少能找到麻风分枝杆菌。

麻风菌微生物学检查法三、微生物检查：1. 涂片镜检：显微镜检查可从患者鼻粘膜或皮损处取材，用抗酸性染色后检查。

一般瘤型和界线类患者标本中可找到细菌在细胞内存在，有诊断意义。

结核样型患者中很少找到细菌。

欲提高检查的阳性率，也可以用金胺染色后以荧光显微镜检查。

2. 麻风菌素试验四、防治原则1. 麻风病目前尚无特异性预防方法。

对密切接触者作定期检查。

2. 早发现，早治疗。

治疗药物主要有砜类、利福平、氯苯吩嗪及丙硫异烟胺。

目前多采用二三种药联合治疗，以防止耐药性产生。

非结核分枝杆菌1. 非结核分枝杆菌原称为非典型分枝杆菌(atypical mycobacteria)，其特性有别于结核分枝杆菌，如对酸、碱比较敏感；对常用的抗结核菌药物较耐受；生长温度不如结核分枝杆菌严格；多存在于环境中；为条件致病菌。

可因引起结核样病变而受到关注。

抗原与结核分枝杆菌有交叉。

2. 根据菌落色素与生长速度将非结核分枝杆菌分为4组。

(1) 第Ⅰ组：光产色菌(photochromogen)。

本组细菌在暗处为奶油色，曝光1小时后再培养即成橘黄色。

生长缓慢，菌落光滑。

对人致病的有堪萨斯分枝杆菌，引起人类肺结核样病变，常有空洞形成; 海分枝杆菌，在水中可通过皮肤擦伤处侵入，引起皮肤丘疹、结节与溃疡，病理检查见有抗酸菌，易被误认为麻风分枝杆菌。

(2) 第Ⅱ组：暗产色菌(scotochromogen)。

这类细菌在暗处培养时菌落呈橘红色。

在37℃生长缓慢，菌落光滑。

对人致病的有瘰疠分枝杆菌，引起儿童淋巴结炎。

(3) 第Ⅲ组：不产色菌(nonphotochromogen)。

通常不产生色素。

40～42℃下生长慢。

菌落光滑。

鸟-胞内分枝杆菌(M.avium-intracellulare)可引起结核样病变，多见于肺与肾。

(4) 第Ⅳ组：迅速生长菌(rapid grower)。

在25～45℃生长。

生长快，培养5～7d即可见到菌落，菌落粗糙，有的并能产色。

对人致病的有偶发分枝杆菌(M.fortuitum)、龟分枝杆菌(M.chelonei)和溃疡分枝杆菌(M.ulcerans)，引起皮肤病。

3. 非致病株煮沸1min即失去抗酸性，而致病株能耐10min，甚至高压灭菌亦不失去抗酸性。

4. 由于许多非结核分枝杆菌菌株对常用的异烟肼、链霉素等耐药，但对利福平有一定敏感性;现多主张用利福平、乙胺丁醇和异烟肼联合使用。