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水产微生物学:第二章 原核微生物

③将细菌接入一定的高渗溶液中,原生质收缩,但细胞 仍可保持原来的形态;若接入低渗溶液中,细胞则膨大,但 不破裂。
⑵细胞壁的化学组成
肽聚糖—NAG,NAMA,
G+
短肽。 G+多、G-少
垣酸-- G+
脂多糖-- G-
G-
脂类-- G+少、G-多
蛋白质-- G+少、G-多
肽聚糖:粘肽、胞壁质
⑶细胞壁与革兰氏染色
7干燥:空气中自然干燥。 8 镜检:在油镜下观察各种 细菌形态并绘图。
实验程序
(革兰氏染色的方法和步骤)
• 革兰氏(Gram)染色法 1. 涂片 2. 初染:在做好的涂面上滴加 草酸铵结晶紫染液,染1分钟, 倾去染液,流水冲洗至无紫色。 3. 媒染:先用新配的路哥氏碘 液冲去残水,而后用其覆盖涂 面1分钟,后水洗。 4. 脱色:除去残水后,滴加 95%酒精进行脱色约30秒,后 立即用流水冲洗。 5. 复染:滴加番红染色液,染1 分钟,水洗后用吸水纸吸干。 6. 镜检:观察染色结果并绘图。
⑴细胞壁的功能
具有保护细胞和维持细胞形态的作用。
①如果将杆菌接入浓度为0.2mol/L的蔗糖等渗溶液和盛 有玻璃珠的三角烧瓶中,加以摇动,可使细胞壁破裂,细胞 内含物流出,这样就可得到细胞壁的空壳。空壳呈杆状透明, 细胞内含物却是圆的。这个实验告诉我们,细菌细胞壁的功 能是使细菌具有一定的形状。
②将细菌用溶菌酶处理,除去细胞壁,并接入低渗溶液, 这时没有细胞壁的细胞膜很快破裂。
⑷细胞壁缺陷细菌
用溶菌酶处理细胞或在培养基中加 入青霉素等因子,便可破坏或抑制细 胞壁的形成,成为细胞壁缺陷细菌。
①原生质体 ②球形体 ③细菌L-型
①原生质体protoplast
在革兰氏阳性细菌培养物中加溶菌酶,或在含青霉素等 的培养基里培养阳性细菌,便可破坏或抑制细胞壁的合成, 细菌除去细胞壁后剩下的部分叫做原生质体。
二、细菌的结构
基本结构:细胞壁, 细胞膜,细胞质, 核物质,核糖体; 特殊结构:鞭毛, 繖毛,荚膜,芽胞 等。
1.细胞壁 cell wall
是包在细胞表面较为坚韧略具弹性 的结构,可占细菌干重的10-40%;用 质壁分离和适当的染色方法,可在光 镜下看到。G+厚约20-80nm, G-厚约 10nm
第二章 原核微生物
第1节 细菌 第2节 放线菌 第3节 其他原核微生物
第1节 细菌
一、细菌的形态 二、细菌的结构 三、细菌的菌落 四、细菌的繁殖方式
一、细菌的形态
1. 细菌的外形和排列 2. 细菌的大小
1. 细菌的外形和排列
细菌的外形比较简单,仅 球状、杆状和螺旋状,分别称 为球菌、杆菌和螺旋菌。
革兰氏阴性菌由于细胞壁聚糖含量少, 虽被溶菌酶除去,但外壁层中脂多糖、脂 蛋白仍然全部保留,外壁的结构尚存,所 以,球形体较之原生质体对外界环境具一 定抗性,并能在普通培养基上生长。
③细菌L-型 L-form of bacteria
细菌L-型是细菌在某些环境条件下所形 成的变异型。没有完整而坚韧的细胞壁,细 胞呈多形态,有的能通过细菌滤器,故又称 “滤过型菌”。在低渗条件下生长缓慢,在 固体培养基上形成一种直径约0.1mm的微小菌 落,这种变异有的可恢复,有的不能恢复, 最先由英国霍乱弧菌的正常形态;2. 霍乱弧菌的衰老型
2. 细菌的大小
细菌的个体要在显微镜下才能看见,其度量单位一般用 微米( µ),各种细菌的大小,有一定的区别。 球菌:用直径表示,常在0.5-2 µ 杆菌:用长× 宽表示,其中
大杆菌:3-8 × 1-1.25 µ 中杆菌:2-3 × 0.5-1 µ 小杆菌:0.7-1.5 × 0.2-0.4 µ 螺旋菌:常以两端的直线距离为长度,一般2-20 × 0.4-2µ
①革兰氏染色方法:着色:草酸铵结晶 紫+碘→脱色:95%乙醇→复染:复红或蕃 红
②革兰氏染色结果:细胞紫色—G+,细 胞红色—G-
实验程序
(简单染色的方法和步骤)
• 简单染色法(一般染色法) 1.菌种: 2.涂片 3.干燥:自然气干或酒精灯 高处微微加热。 4 固定 5.染色:在整个涂面上滴加 齐氏石炭酸复红,染色1分 钟。 6.水洗:倾去染液,用自来 水细流冲洗至流下的水中无 染料颜色为止。
球杆菌:菌体短小,两端钝圆,形态近似球形。
分枝杆菌:菌体有分支或有侧枝。
棒杆菌:菌体一端较另一端大。
柄杆菌:菌体一端有柄。
弧菌:菌 体只有1个 弯曲,呈 逗点状。
螺旋菌
螺菌:菌 体有2个以 上弯曲, 呈螺旋形。
螺旋菌
衰老型和多形性
在正常情况下,细菌的个体形状和 排列都是比较一致的,在老培养物中, 会出现各种和正常形状不一样的个体, 这就是衰老型或退化型,当这些衰老型 的培养物重新处于正常的培养环境中, 可恢复正常形状。但也有些细菌,即使 在最适宜的环境中生长,其形状也很不 一致,这种现象称多形性。
③革兰氏染色原理
染色时,细胞内形成了深蓝色的结晶紫-碘的复合物。这 种复合物可被酒精从革兰氏阴性细菌细胞内浸出,而阳性菌则 较困难。这是由于阳性细菌细胞壁较厚,尤其是肽聚糖含量较 高,网格结构紧密,含脂量又低,当它被酒精脱色时,引起了 细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以至关闭,从而阻止了不 溶性结晶紫—碘复合物的逸出,故菌体呈深紫色;可是,革兰 氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄,含量较少,而脂类的含量 高,当酒精脱色时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,结晶紫 -碘复合物也随之被抽提出来,故革兰氏阴性细菌菌体呈复染 液的红色。
四联球 菌
葡萄球 菌
球菌
链球 菌
八叠球 菌
链球菌
葡萄球菌
球菌
注意: 在以上各种类型排列的球菌
培养物中,都能经常看到游离 的单个菌体存在。
大肠杆菌(O157:H7菌株)
杆菌 双杆菌
链杆菌
八字形
栅栏样
杆菌
一般来说,杆菌呈圆柱形,也有近似卵圆 形的;菌体多数平直,也有些稍微弯曲的;菌 体两端多数钝圆,少数平截或尖锐状。杆菌除 了多数呈各种杆状外,还有些比较特殊的形态:
原生质体由于没有坚韧的细胞壁,故任何形态的菌体均 呈球形。对环境条件很敏感,而且特别脆弱,渗透压、振荡、 离心以至通气等因素都易引起原生质体破裂,有的原生质体 还保留着鞭毛,但不能运动,也不能被相应的噬菌体感染。 可是其他生物活性基本不变。
②球形体sphaeroplast
指还残留着部分细胞壁的革兰氏阴性 细菌的原生质体。
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