健康人（左）和强直性脊柱炎患者（右）的HLA-B27的检测结果 （上：同型对照，下：测试样本）
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流式细胞术的基本原理
2 流式的临床应用
目 录
3 迈瑞流式介绍
4
专家对迈瑞流式的评价
迈瑞流式细胞仪及配套试剂
BriCyte E6流式细胞仪及配套试剂
人性化设计—降低临床操作难度
临床常规项目全自动软件 双向LIS连接 全中文操作界面
诊断与鉴别诊断 疾病临床分期 治疗效果评估 指导临床用药 。。。
TBNK淋巴细胞检测在临床科室中的应用
流式在肿瘤的应用 流式在感染科的应用 流式在风湿免疫科的应用 流式在健康体检的应用 流式在血液科的应用 流式在移植中心的应用 流式在心血管内科的应用 流式在其他科室的应用
胃癌及其不同临床分期淋巴细胞亚群的变化
四川省人民医院 中心实验室主任
张剑波
THANKS！
谢谢
HLA-B27检测与AS辅助诊断
1984年修订的纽约标准 ；
1991年欧洲脊柱关节病 研究组（ESSG）标准；
2009年国际脊柱关节病 评估工作组（ASAS） SpA诊断标准标准—增 加HLA-B27作为重要的 诊断指标
Rudwaleit M. Curr Opin Rheumatol. 2010,22:375-380）
食品工业
临床诊断、 研究
血液，肿瘤， 药理，免 疫…
农业畜牧业
选种，育种…
环境研究
湖泊、海洋生态 研究…
制药工业
药物筛选，疫苗 研究…
总结
flow cytometry flow cytometry + Autoimmune diseases
flow cytometry+leukemia
flow cytometry + Transplant
flow cytometry +tumor
可以预计未来流式细胞仪在临床上的应用一定会有更大的发展！
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流式细胞术的基本原理
2 流式的临床应用
目 录
3 迈瑞流式介绍
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专家对迈瑞流式的评价
流式细胞术在临床检验中的应用
∞ 淋巴细胞亚群分析
∞ HLA-B27检测
∞ 白血病免疫分型和MRD
急性白血病、 慢性淋巴增生性疾病（CLD)
HLA-B27检测在AS中的诊断价值
HLA-B27+ HLA-B27+ 的AS
HLA-B27- 的AS
• 临床意义：
1.辅助疾病早期确诊,早期治疗; 2.鉴别诊断症状相似的疾病; 3.对高危人群进行预测;
约5-10%的AS患者为HLA-B27AS患者中HLA-B27+达90~95%
HLA-B27阳性率在我国为2~7%，AS的患病率为0.1%， 因此大部分HLA-B27+并不患AS
临床需要监测免疫功能的常见疾病
（Kuby Immunology, 7th,2013）
TBNK淋巴细胞亚群检测
CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC
HLA-B27检测与脊柱关节病
脊柱关节病（Spondyloarthritis, SpA）
淋巴瘤
∞ 造血干细胞分析
造血干细胞绝对计数；
∞ 阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）
CD55/CD59/FLAER检测
∞ 血小板相关分析
血小板计数、血小板免疫表型分析
∞ 细胞周期与DNA倍体分析
2010年全国三级医院检验科流式项目分布
。。。
流式细胞术分析淋巴细胞亚群的原理
TBNK淋巴细胞的检测及临床指导意义
肺部疾病的鉴别诊断
（中华检验医学杂志. 2000, 23: 214-216）
利妥昔单抗治疗效果监测
外周血B细胞百分比显著下降 而骨髓B细胞略下降 利妥昔单抗(美罗华)： 针对B细胞特异性抗原CD20的人-鼠嵌合单克隆抗体 用于复发或耐药的CD20 阳性滤泡性淋巴瘤 是首个以B细胞为靶标治疗类风湿性关节炎的药物
1. 手工输入病人信息 2. 人工转移数据实现单向连接
灵活进样系统，负压吸样兼容多种上样管，珍 贵标本直接上机检测
单一进样模式，正压吸样只支持标准流式管
内置高精度流量传感器，无需内标微球直接计 算绝对计数
必需额外内标微球间接换算绝对计数
1.将清洗液和纯水放入指定位置，仪器自动完 成关机过程 2.无
1. 将清洗液和纯水放入指定位置，仪器进行清洗 2. 再进行真空管路清洗后关机
强直性脊柱炎
• 强直性脊柱炎（AS）定义：
一种慢性、进行性和炎性疾病，也是血清阴性脊柱关节病（SpA）中最具代表性的 疾病。主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组织及四肢关节，表现为椎间盘纤维环和纤维环 结缔组织的骨化，椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生，严重者可失去劳动能力。
• 实验室检查：
CRP升高 血沉加快 HLA-B27阳性 类风湿因子阴性
不同HLA-B27检测方法比较
HLA-B27检测的敏感性和特异性
与其他指标相比，HLA-B27在SpA鉴别和诊断上具更高的敏感性、特异性
（ Rudwaleit M, Sieper J. Nat Rev Rheumatol. 2012,8:262-268 ）
HLA-B27检测配套试剂
FITC-HLA-B27/PE-HLA-B7双色
488/10
SS
tv
FSC
t
488/10
FS
530/30
740LP
785/60
FL6
488/10
645LP 660/20
(APC-cy7)
550LP
FL4
v
FL4
(APC)
v
491/LP
t
t
流式细胞仪与常用检验仪器的比较
生命科学领域的应用
生物学研究
遗传，生殖，微 生物，细胞生物，
毒理，分子生 物…
(Arthritis Research & Therapy 2009,11；R131)
移植病人免疫抑制剂治疗指导
A移植前1-2天；B移植后1-2天；C移植后4-5天；D移植后6-8天；E移植后12-16天 69例（50例没有排斥，19例发生排斥） CD4在移植后有一个缓慢的下降过程 CD4如果升高，预示发生排斥反应，需要调整免疫抑制药的治疗方案
BD FACSCanto II 检测305A八峰粒子
PE<50 MESF
淋巴细胞亚群分析临床评估
北京协和医院
临床评估病人； 42例 对照仪器： BCI FC500
北医三院
临床评估病人； 30例 对照仪器： BD FACSCanto II
四川省人民医院
临床评估病人； 34例 对照仪器： BCI FC500
采用陶瓷泵负压吸样形成有效“双闭环”，稳定 控制样本流；
简洁稳定-光学系统
智能温度控制 15℃到32℃无需调整光路
全封闭防尘设计
方便快捷-多种进样方式
12×75 mm试管 1.5mL、2mL微量离心管
12×75 mm试riCyte E6 检测305A八峰粒子 PE<50 MESF
肿瘤术后淋巴细胞亚群的变化
乙型肝炎患者体内淋巴细胞亚群变化
传染病信息. 2011. 24. 206-210
乙型肝炎患者体内淋巴细胞亚群变化
（World J Gastroenterol. 2008,14:3710-8.）
HIV/AIDS病人的诊断与分期
（WS 293-2008 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准）
HLA-B27检测临床评估
北医三院
临床评估病人： 30例 对照仪器： BD FACSCanto II
四川省人民医院
临床评估病人； 33例 对照仪器： BCI FC500
项目
软件界面 仪器开关机 仪器质控
LIS连接 进样系统 绝对计数 仪器关机 常规检测
BriCyte E6
传统流式细胞仪
全中文操作软件，模块化设计，可见即所得， 英文界面，菜单式设计，需要长时间熟悉菜单功能
- 中华医学会检验分会委员兼副秘书长 上海医学会检验医学分会副主委-
沈立松
-易学医用 -自动化程度高 -适用临床检验科使用
-性能参数可媲美国外品牌 -价格优势明显 -临床服务好
专家精彩点评
王小林
-半天熟悉流式软件 -体积小，噪音小 -绝对计数精度高
北医三院检验科副主任
-激光器温控范围宽 -体积小，运行安静 -临床软件非常实用
传统流式检测流程图
Nat Rev Immunol. ; 12(3): 191–200.
流式细胞仪工作原理模拟图
SSC FL2 FL5
FL6
v v
v
t
FL3
FL5
FL1
v t
v t
FL1 (FITC)
t
FL2 (PE)
FL3 (PerCP)
(PE-cy7)
585/40
785/60
670LP
反光镜 反光镜
老年人身体状况评估
（ Neuroimmunomodulation. 2014, 214:206-12.）
慢性疲劳综合征与淋巴亚群分析
（ Clinical and Applied Immunology Reviews. 2002, 2:129–139. ）
体育锻炼对淋巴亚群的影响
（ Mechanisms of Ageing and De6elopment. 1998, 100: 121–132.）
两小时掌握仪器操作
位置
1.开机（10分钟以内）； 2.关机（7分钟以内）