四、学习临床检验的目的和要求
1、理论联系实践 2、操作要求 3、检验结果必须和临床表现结合 4、检验人员的医德
第一章 血液标本采集和血涂片制备
血液学检查 ： 反应造血系统本身、机体全身或局部病变
有助于疾病的诊断及疗效、预后的观察
只能反应疾病某一方面的情况，不能认为 是病程的全部反应；不同个体，对同一影 响有不同的反应，或也可对不同影响产生 相同的反应
二、常用血液标本抗凝剂 及其使用选择
化学名：3-羟基-3-羧基戊二酸（三钠盐）
a. 抗凝原理：螯合钙离子
b. 使用方法 c.
配成109 mmol/L的浓度和血液1：9 106 mmol/L的浓度和血液1：4
c. 适用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）
2. 草酸钠（乙二酸的钠盐）
a. 抗凝原理：草酸钙沉淀
三、临床检验的一般方法 1、目视检查 直接观察标本：颜色、透明度、性状，有无 凝块或寄生虫 液体的相对密度、血液比粘度、红细胞沉降 率、红细胞比积等病理变化 定性和定量检测标本化学成分的病理变化 观察有型成分的数量和形态
2、理学检查
3、化学检查 4、显微镜检查
5、自动化仪器检查
电子技术、程序控制的发展
物理方法抗凝：
脱纤维蛋白： 将血液注入有玻璃珠的器皿中，转动，纤维 蛋白缠绕凝固于玻璃球，从而防止血成凝块。适 用于免疫学检验和红斑性狼疮细胞检查。
三、血涂片的制备技术
1. 血涂片的用途： 血细胞形态学检验、网织红、异常
2.
寄生虫检验。ຫໍສະໝຸດ 2. 血涂片制备步骤：（手工推片法）
将推玻片向1的方向稍抽回，当血液充满推玻片
临床血液学检验 -排泄物、分泌 物及体液检验
绪
一、临床检验（clinical
论
laboratory technology or
science） 又称实验诊断学，就是通过实验室的各种检 查方法，包括感官检查、理学检查、化学检 查、显微镜检查以及自动化仪器检查等，对 病人的血液、体液、分泌物和排泄物等标本 进行检查、分析，以获得病原、病理变化及 脏器功能状态等资料。
c. 优点：抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易 d. 溶血、能耐高温。
d. 适用范围： 红细胞检验（红细胞计数、血红蛋白 e. 测定、红细胞比积）和多种生化分析
5. 乙二胺四乙酸（EDTA）盐
a. 抗凝原理： 螯合钙离子
b. 使用方法： 15g/L浓度EDTA 和血液 1：10
c. 适用范围： 对血细胞形态影响小---血小板计数； d. 影响血小板聚集和白细胞吞噬功 能 e. ---不易做止血学检验及血小板功 能 f. 检验。
b. 蛋白质的化学性质：蛋白质中的氨基酸含有不同 数量的氨基（-NH2）和羧基（-COOH），同时还有其 他活性基团。在游离状态时， -NH2获得一个H+变成带 正电的-NH3+，而-COOH失去一个H+变成带负电的-COO-。 分别与不同染料结合。
（二）、细胞染色原理： 一般以它们的物理现象和/或化学 现象为依据
1. 物理作用：毛细管现象、渗透、吸收、吸附作用等 2. 3. 4. 5. 6. 化学作用： a. 染料的化学成分：助色基团的存在，碱性染料 在溶媒中为阳离子型，易与组织和细胞内带负电荷的 酸性物质结合；而酸性染料在溶媒中为阴离子型，与 带正电荷的碱性物质结合。
的宽度后，以一定均匀的速度向2的方向滑动。
3. 血涂片质量评价： 均匀、厚薄、头体尾、边缘、两侧
注意：血滴大，速度快、角度大----血膜厚
四、 细胞染色技术
染料---生物学染色剂：将生物组织细胞和病原体染色，在显微镜 下观察结构。
（一）、染料 （天然染料和人工染料） 发色基团和助色基团使生物学染色剂产生颜色和被染 组织亲合。
二、临床检验在医学中的作用 1、为准确诊断、及时治疗提供依据 临床检验的结果是支持诊断、鉴别诊断、甚至确定诊断的 主要依据。
例：anemia
leukemia
依据：血中红细胞和血红蛋白量减少 依据：血象和骨髓象 尿液中出现蛋白、细胞 管型
肾脏有实质性损伤的依据 问：tumor？
2、为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据 在疾病过程中，血液、体液、分泌物和排泄物也 会随之发生相应的变化 3、为预防疾病提供资料 如血象和肿瘤细胞学的普查等
两种采血方法的优缺点比较
毛细血管 限制了重复实验和追 加实验，标本量少， 局部炎症可得假结果 ，组织液可混入 价廉、快速、操作简 便，标本可直接测定 静脉血 不同抗凝剂的使用， 改变血液性质，影响 有形成分的形态
缺点
优点
标本代表性大，无组 织液影响，适于临床 研究，可重复实验和 追加其他实验
1、柠檬酸钠（枸橼酸钠）
b. 使用方法
草酸钠0.1mol/L 和血液1：9
c. 适用范围： 止血学检验
3. 双草酸盐抗凝剂
a. 抗凝原理： 草酸钙沉淀
b. 使用方法： 草酸钾0.8g , 草酸铵1.2g（100ml） c. 与血液 1：10 （80°C以下烘干）
c. 适用范围： 红细胞检验（红细胞比积、计数） d. 不适于血小板计数和白细胞分类计 数
一、血液标本的采集
1、毛细血管采血法 a. 部位：中指或无名指尖内侧，半岁以下拇指或 b. 足部，特殊人员视情况而定。 b. 所用器材：采血针、吸管 c. 采血步骤及注意事项
2、静脉采血法 a. 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背部手腕部等 b. 幼儿可采用颈外静脉采血。 b. 采血器材：一次性注射器，检验用真空定量采血装 c. 置 c. 采血步骤及注意事项
1. 碱性染料：为阳离子染料，能接受质子，染细胞核 2. 的染料。如亚甲蓝、天青。 2. 酸性染料：为阴离子染料，能释放质子。主要有荧 3. 烷-氧杂蒽染料和偶氮染料两类，能结合 4. 细胞的碱性成分并染色，如血红蛋白、 5. 嗜酸性颗粒成分等。
3. 复合染料：同时具有阴、阳离子型的染料如瑞氏染料
4. 肝素
（含硫酸基团的粘多糖）
a. 抗凝原理：低浓度时抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之 b. 间的作用，加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝 c. 氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成， d. 还能抑制凝血酶的自我催化及抑制 e. 因子Ⅹ的作用；高浓度时阻断凝血 f. 酶和纤维蛋白的反应。 g. b. 适用方法： 1g/L浓度的肝素钠与血液 1：10