测荧光底物的水解、底物被利用后的pH变化、特 殊代谢产物的生成和某些代谢产物的生成率来进 行菌种鉴定。
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原
理
1、WalkAwav96 在20min到3h内(山测试板的型号决定)系统要对测
结果的对照。通过比色法测定的测试板经适当的 Walk -Away系统会自动添加并延长孵育的时间，一般 为5-30min。通过荧光法测定的测试板不需添加试
数据自动保存起来。
原
理
• WalkAway的荧光测定系统可直接对荧光测试板各孔中产
理系统将这些电信号转换成数码。与原已储存的对照值相 比较，推断出菌种的类型及药敏结果。常规测试板则直接 检测电信号，从干涉滤光片过滤的光通过光导纤维导入测 试板上的96个测试孔，光感受二极管测定通过每个测试孔 的光量。产生相应的电信号，从而推断出菌种的类型及药 敏结果。 在特殊情况下，药敏测试板会出现读板失败的 现象，此时可以用肉眼来校读。直接观察各孔中细菌的生 长情况。若长菌，则记为阳性；若不长菌，则记为阴性， 将结果输入微机中数据管理系统会得出药敏结果。
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理
• 2. 测试板采用96孔塑料板作为测试板，孔内包被 有用于菌种鉴定的生化反应的底物，或是用于测 定MIC的不同稀释浓度的各种抗生素，每孔可容 纳120μl的液体。每个板中均设有对照孔和生长孔 。若读板时检测到生长孔中的细菌生长量不够， 就会给出“生长不充分”的提示。系统自动延长 孵育时间。MicroScan测试板的类型各测试板上 都附有条形码，上机前经条形码扫描器扫描后可 被系统识别，系统会自动给测试板编号，以防标 本混淆。
保 养 及 维 护
• 7、检查试剂分配管路，并清洁分配吸头。 • 8、清洁试剂废料漏斗。 • 9、检查废料储存器液位，并在需要时更换废料袋。 • 10、检查输油管.并在需要时冲洗输油管路。 • 11、检查油位,并在需要时更换或加注油瓶。
• 12、清洁参照盘和荧光计保护片。
• 13、检查光电二极管保护片和毛玻璃片，并在必要时进行清洁。2015-1-28来自3基 本 结 构
• • • • • • MicroScan测试板的类型 1、革兰阳性板 2、革兰阴性板 3、厌氧菌板 4、酵母菌板 5、苛养菌板
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2、原理：
理
MicroScan的WalkAway系列则采用8进制计算法 分别将28个生化反应转换成8位生物数码。计算 机系统自动将这些生物数码与编码数据库进行对 ( 阴)
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理
3 系统配有真空接种器，可 一次完成96孔菌液的接种。需指出的是， 有许多细菌自动鉴定系统都配有自动接种 器。大致可分为两类：真空接种器和活塞 接种器，以真空接种器应用较多。并且接 种器上一般都配有标准麦氏浓度比浊仪， 操作时只需将稀释好的菌液放入比浊仪中 确定浓度即可。
原
理
4 理，并具有强大的统计功能，可进行菌种 发生率、菌种分离率、抗生素耐药率等流 行病学统计。
保 养 及 维 护
• 定期维护 • 1、至少每周清洁一次光电二极管保护片。 • 2、至少每周清洁一次毛玻璃片。 • 3、至少每月检查并清洁一次进气过滤器。
保 养 及 维 护
• 注意事项 • 1、对于小于取菌针针尖的菌落，不可用Prompt快速接种 法接种。
• 2、打开维护仓门时保证仪器上方无放置物，否则使用时 可能造成仪器的损坏。
操 作 流 程
• 查看样本和保存结果
操 作 流 程
• 报告传输步骤
操 作 流 程
• 修改结果步骤
操 作 流 程
• 实验室质量控制:
1、实验室间质控；
按常规样本操作程序进行
2、实验室室内质控；
每日打印当天仪器自身诊断报告
操 作 流 程
仪器自身诊断报告步骤
操 作 流 程
• 输入和编辑质控订单步骤
• 适用： • 最适用于快速生长的细菌；菌落的大小要足够大于取菌针的针尖 ，并且有散在的菌落。
• 优点： • 快速不需进行比浊。
• 注意事项： • 小的菌落（小于取菌针的针尖），不建议用此方法接种。
• 方法： 用棉签或接种环挑取足够的菌落到3ml的灭 菌蒸馏水中，比浊至浓度与0.5麦氏浊度标 准相当（0.5McFarland Std.）(用标准比浊 管目测或比浊计测定)；然后取100ul此菌悬 液加入到25ml的Pluronic—D水中，混匀， 用RENOK和接种槽接种到测定板上。
打印条码步骤：
接种 常用接种方法有二种： 1、Prompt快速接种法： 2、Direct turbidity直接比浊法：
• 方法：
• 使用一校准过的专用取菌针去沾取相同的 菌落3次，然后用环状的盖帽将针边缘上多 余的细菌刮掉，将取菌针插入专用的30ml Prompt接种水瓶中，彻底混匀接种，用 RENOK和接种槽接种到检测板上。
• 3、做好防护，穿戴保护性实验服、手套、防护眼镜。 • 4、试剂瓶旋得过紧会导致瓶内密封部分压力过大而损坏 试剂管。
恳请各位老师批评指正！
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操 作 流 程
打印已存储的质控结果步骤
操 作 流 程
查看已存储的质控结果步骤
操 作 流 程
• 搜索方式：
保 养 及 维 护
• 维护保养:
• 1、 日常维护保养 • 2、 定期维护
保 养 及 维 护
• 日常维护保养 • 1、打印Walkaway质控诊断报告.至少每天打印一次Walkaway 质控诊 断报告。 • 2、备份数据库。 • 3、查看仪器温度，温度必须为 35 °C ±1 °C.内部和外部温度读数 相 差应<0.5 °C。 • 4、检查储水器并在必要时加注(内盛无菌去离子水或无菌蒸馏水)。 • 5、检查试剂液位，并在需要时更换或加注试剂瓶。 • 6、检查试剂分配压力，并在需要时冲洗分配管路。
操 作 流 程
• 适用： • 快速生长的细菌、葡萄球菌（有助于更准确的检测出苯唑西林耐 药株—Oxacillin Resistance）。
• 优点： • 快速，可得到标准浓度的悬液。
• 注意事项： • 生长缓慢的细菌和呈明显粘液状的细菌，效果可能不好。
操 作 流 程
• 放板步骤
操 作 流 程
• 查看样本和保存结果
西门子WalkAway40全自动细 菌鉴定及药敏仪培训
吴 李 培 南通大学附属东台医院 2015年1月8日
邵 柏
2012.7
WalkAway40全自动细菌鉴定及药敏仪
• 一、结构与原理 • 二、操作流程 • 三、保养及维护
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基 本 结 构
1、基本结构
由WalkAway40仪器、测试板、快速接种系统和 数据管理系统四部分组成。