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c) 典型温度分布图(HTM2010给出的)
plateau period equilibration time holding time
overheat sterilization temperature band sterilization temperature 1 = free space 2 = active discharge 3 = fastest 4 = slowest
6 校准项目和方法 校准项目：示值误差 校准方法： 参考温度计放置位置 校准过程 数据处理 7.校准结果的表达 8.复校时间间隔
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灭菌设备验证程序与校准过程
1. 灭菌过程 2. 名词术语 3. 灭菌程序设计 4. 验证项目与要求 5. 验证方法
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4. 灭菌设备验证的要求与项目
4、1 基本要求: 表面洁净无污染 排列不应过密 4、2 验证项目及指标要求
序号 1 2 3 验证项目 温度指示,传感器,温度记录仪 时间记录仪 压力表 技术指标 ≤0.5℃ ≤1% ≤10%
4
5
灭菌暴热温度波动
3. 英国标准HTM2010 Health technical memorandum -sterilization
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1. 世界卫生组织GMP、中国《药品生产验证指南》的 要求： 《药品生产验证指南》关于湿热灭菌设备验证中温度 检测要求： 仪表校准：温度±0.5 oC, 时间±1% 校准过程: 至少十个测点，三次空载舱室内温度分布 测量各点间的温度差在±1 oC(温度均匀性的要求) 三次热穿透实验：a) 最大负载 b) 最小负载 C) 空载(热分布试验) 再验证: 定期再验证、改变性再验证
3.灭菌程序设计
1）微生物污染检测和灭菌程序验证
严格控制最终灭菌前的污染微生物，促使被灭菌 物最终达到无菌状态 严格执行GMP要求，灭菌前，按无菌操作生产的 药品，一般不会含有耐热孢子。
如果不能执行非无菌操作，需要检测微生物类型 和数量，对于耐热孢子，需要对其鉴别确定灭菌温度 下的D值，需要使用耐热性更强的生物指示剂，或使 用从产品中分离出的耐热污染菌，对灭菌程序验证。
1 2 3
4
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d) 测试合格的参数要求：
灭菌保持时间内：
温度测量值在灭菌温度带内（灭菌温度+3 oC）
温度测量值波动度不超过1 oC 任何两个点温度测量值之差不超过 2 oC 对于舱室容积小于800 升的，平衡时间不超过15 s； 舱室容积大于800 升的，平衡时间不超过30 s。 定期再验证要求
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1.定义 (1).初始菌----生物负荷.灭菌前原材料,部件或包装等物品 上所带有存活微生物的总数. (2).生物指示剂----接种已知数量微生物用于测试湿热灭菌 工艺实际效果的产品。 (3).腔室冷点----灭菌过程中，装载区温度最低的位置. (4).热穿透----用以评估热量已经转移到被灭菌品的测温试 验.为了测试热量的穿透,应将测温探头放在需评估的装载 上(或装载物品中间) (5).灭菌----用以去除产品中活的微生物并使其达到规定存 活概率的处理过程。 (6)灭菌程序----使某一物品达到无菌所需条件及规定运行 参数(温度，时间，压力等)的程序。
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《中国药典》2005年版在通则附录中收载了灭菌法. 对灭菌方法及生物指示剂做了描述 灭菌法----用热力或其他适宜方法将物质中的微生物杀 死或除去的方法. 在执行GMP的原则下: 灭菌效果------灭菌设备的性能 污染菌的特性 被灭菌品的性质 受污染的程度等因素有关.
灭菌舱室空间温度分布
±1℃
2℃
6
灭菌暴热温度的持续时间
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具体灭菌程序
5.验证方法:
5.1 空载试验 5.1.1 温度,压力准确度
5.1.2 温度均匀度及波动度
5.2 负载试验 热穿透试验: (1) 最大负载状态,热穿透试验的结果达到最冷点灭菌 物品的暴露时间为121℃≥15min. F0≥15 (1) 最大负载状态,热穿透试验的结果达到最冷点灭菌 物品的暴露时间为121℃≥15min. F0≥15
医用热力灭菌设备温度计校准规范及 温度检测在热力灭菌设备验证的作用
中国计量科学研究院 金志军
2012.6
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• 国内外关于灭菌设备验证标准介绍 • 医用热力灭菌设备温度计校准规范 • 灭菌设备验证程序与校准过程 • 湿热灭菌与验证 • 灭菌法原理与选择
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3. 英国标准HTM2010 与EN554比较： HTM2010内容更全，要求更细致,内容也更多, 适用于多孔装载高温蒸汽灭菌设备， 处理密闭容器中液体的高温蒸汽灭菌设备， 处理无包装器械的高温蒸发灭菌设备， 干热灭菌设备， ethylene oxide （环氧乙烷）灭菌设备 有更明确的操作方法规定 有明确的灭菌设备日常、周期检查内容 对采样率有明确规定，保持时间内有180个读数
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热力灭菌: 在非饱和或饱和湿度下进行的热力学灭菌. 在灭菌过程中，通过强制方式将空气对流.一般来说， 细菌孢子具有耐热性,他的破坏程度取决于在水分条 件下孢子的水合作用以及核酸和蛋白质的变性.所以， 灭菌过程中使用饱和蒸汽是至关重要的. 饱和蒸汽的穿透性比于热空气及过热蒸汽的穿透性 要强.蒸汽冷凝时放出的潜热传递给灭菌器，使之升 温并使被灭菌物品所携带的微生物尤其是表面微生 物发生水合作用，从而加速杀菌效果。 温度低于100℃时,灭菌率L非常低,温度逐渐升高，L 变大。当高于121 ℃,灭菌率L随温度上升急剧增加. 不同温度获得同样灭菌率所需的时间是不同的. 温度越高，灭菌时间越短.
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1.灭菌过程: 热力灭菌是使用最广,、研究最多的灭菌方式. 当温度超过细胞最佳生理活动的温度范围时,随着 温度的升高，细胞代谢减缓,细胞的生长及繁殖将 逐渐停止。每种细胞的生理活动均有一个温度上 限，一旦超过，起生命作用的蛋白质、酶、核酸 等会被永久性破坏，从而导致细胞发生不可逆转 的死亡.
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性能合格测试技术要求和方法：
a) 测试应该对新的、改进的产品、包装、装载类型、 维护后的设备、调整的过程参数进行，除非有等 效或已有参考装载的验证证明。 b) 测量空舱室热分布，温度传感器数量足够给出分 布图，建议12支/米3 每个装载类型的包装或参考测试包都做热穿透测 试，温度传感器放置在测试包中心，测试包要放 置在舱室中最冷的地方，温度传感器的数量不少 于空舱热分布测试的，其中至少有一个传感器放 置在设备控制、指示、记录温度计附近。至少三 次测试以检查重复性。
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2 . 欧盟标准EN554（关于高温蒸汽灭菌设备）
验证的内容：试运行合格测试、性能合格测试
对传感器检定的要求：用于验证和日常控制、指 示、记录的仪器都要被检定。 验证用的仪器可以用来校准、检定设备上用于控制、 指示、记录的仪器，用于校准的仪器的准确度应该是 被校准的仪器的1/3。
2. 干热灭菌法:物质在干燥空气中加热达到杀灭细菌的方法. 3. 除菌过滤法: 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对 热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌. 4. 辐射灭菌法: 将灭菌产品暴露在由放射源辐射的γ射线或适宜的 电子加速器发出的射线中，达到杀灭细菌的目的. 5. 环氧乙烷灭菌法: 将产品暴露在充有环氧乙烷的环境中，达到 灭菌的目的.
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4.计量特性 被校温度计使用范围 被校温度计示值误差 医用灭菌设备技术要求
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5. 校准条件 环境条件 负载条件 测量标准
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2）微生物控制
有观点认为，在设计灭菌工艺或灭菌程序验证时， 必须将耐热性最强的芽孢接入产品中，浓度达到106， 灭菌程序使孢子数下降6D至12D，灭菌工艺才能被 认可。
在生产工艺过程中，对灭菌前的微生物污染能有 效控制并掌握污染菌的耐热性.
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提高灭菌效率的途径： • 前期消毒处理
• 对实际过程的测量，确定合适的暴热时间，不过
长，也不太短。
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湿热灭菌与验证
湿热灭菌程序的设计，与蒸汽灭菌器的性能 及被灭菌产品的性能相关. 湿热灭菌介质: 饱和蒸汽,空气蒸汽混合气体,过热水. 灭菌效果是通过灭菌介质与被灭菌物品的热 传递来实现的.
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2.名词术语:
D值------微生物耐热参数 一定温度下将微生物杀灭90%或使微生物下降一个 对数单位所需的时间. Z值------灭菌温度系数 微生物的D值变化一个对数单位，灭菌温度应升高 或下降的度数. FT值------灭菌时间 灭菌程序在温度T下的等效灭菌时间 F0值------标准灭菌时间 被灭菌产品在灭菌过程中获得参照标准条件下相同 灭菌效果的曝晒时间. L ------灭菌率 在某一温度下灭菌1min所获得的标准灭菌时间(无 National Institute of Metrology 单位)