实用标准文案核酸分子杂交试题一. 名词解释:1. 核酸分子杂交2. DNA复性3. Southern杂交4. Northern杂交5. 斑点印迹6. 原位杂交二. 单项选择题:1. 在加热或紫外线照射下，可导致两条DNA链中间的氢链断裂，而核酸分子中所有的共价键则不受影响的称为（）。

A. DNA变性B. DNA复性C. DNA重组D. DNA杂交2.DNA变性的本质是（）的断裂。

A. 盐键B. 氢键C. 离子键D. 共价键3. 一般影响核酸变性的温度可选在（）。

A. 60—70℃B. 70—80℃C. 80—90℃D. 90—100℃4. 在核酸分子杂交时，一般对应温度作图得到的DNA复性曲线所用的紫外吸收值是（）。

A. A260吸收值B. A280吸收值C. A320吸收值D. A360吸收值5. 进行核酸分子杂交时，一般适宜的探针浓度是（ B ）。

A. 0.1μgB.0.1—0.5μgC.0.5--1μgD.1.0—1.5μg6.杂交时如果使用单链核酸探针，随着溶液中探针浓度的增加，杂交效率也会增加，所以探针长度控制在（）。

A. 50—300bpB. 20—200bpC.300—400bpD.200—5007.进行核酸杂交时，一般适宜的复性温度较Tm值低（）。

A.10℃B.15℃C.20℃D.25℃8.寡核酸探针杂交反应一般在低于Tm值（）下进行。

A.5℃B.10℃C.15℃D. 25℃9. 下列哪种试剂能降低核酸杂交的Tm值（ B ）。

A．尿素 B. 甲酰胺 C.甲醛 D. 乙醇10. 在凝胶中核酸变性时，为了使DNA片段在合理的时间内从凝胶中移动出来，必须将最长的DNA片段控制在大约（）。

A. 1KbB. 2 KbC. 3 KbD. 4 Kb11. 将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为（）。

文档大全．实用标准文案A. 原位杂交B. 核酸酶保护实验C. 斑点印迹D. 狭缝印迹12. 核酸保持在细胞或组织切片中经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为（）。

A. 原位杂交B. 核酸酶保护实验C. 斑点印迹D. 狭缝印迹13. 在将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，称为（ B ）。

A. 杂交B. 预杂交C. 杂交前处理D. Nouthern印迹杂交14. 进行间期细胞内染色体DNA的原位杂交时，关键是（）。

A. 细胞的培养B. 加固定液C. 载波片上的固定D. 细胞染色体的制备15. 组织细胞杂交前的预处理的关键是（ C ）。

A. 降解细胞外蛋白B. 降解细胞内蛋白C. 降解核酸表面蛋白D. 降解核酸内DNA16. 组织细胞杂交前预处理时，降解核酸表面的蛋白质常用的蛋白酶是（）。

A. 蛋白酶CB. 蛋白酶KC. 蛋白酶AD. 蛋白酶I17. 在进行原位杂交时，RNA探针杂交的时间最好是（）。

A. 2—4hB. 4—6hC. 6—8hD. 过夜18. 在核酸杂交中，目前应用最为广泛的一种探针是（ A ）。

A. 基因组DNA探针B. 寡核苷酸探针C. cDNA探针D. RNA探针19. 在Southern印迹杂交中用来标记核酸探针最常用的核素是（）。

A. 32PB. 3HC. 35SD. 125I20．在下列非核素标记物中，既属于半抗原，同时也属于配体的是（）。

A. 地高辛B. 生物素C. 亲合素D. 罗丹明21.一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以象核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。

这些标记物称为（）。

A.半抗原B.配体C.荧光素D.化学发光探针22. Sephadex G—50 柱析法中，随着流动相流出的是（）。

A.小分子物质B. dATPC.大分子探针D. dGTP23. 下列DNA分子的组成中，哪种是核酸变性的最主要的因素（ C ）。

A. ATB. AGC. GCD. TC24. 在探针的纯化时，无水乙醇可以沉淀（）。

A．DNA片段 B. 蛋白质分子C．RNA片段 D. 小分子物质25. 待测DNA样品的电泳分离中，作为分子量标准的λDNA是用（）酶消化的。

A. HindⅢB. BglIC. ApaID. BamHI三. 多项选择题:1. 导致DNA变性的常用方法有（）。

文档大全．实用标准文案A. 热变性B. 碱变性C. 酸变性D. 化学试剂变性2. 影响核酸杂交的因素有（）。

A. 核酸分子的浓度和长度B. 温度C. 离子浓度D. 核酸分子的复杂性3. 核酸分子处于何种情况下，核酸的双链可以完全打开成为单链（）。

A. PH＜3B. 3＜PH＜5C. 5＜PH＜10D. PH＞104. 在杂交液中加入甲酰胺，其目的是（）。

A. 在低温下探针更稳定B. 使杂交液为中性C. 能更好的保留非共价结合的核酸D. 减少核酸杂交的副反应5. 为减少非特异性杂交反应，在杂交前将非特异性杂交位点进行封闭，常用的封闭物有（。

）RNA 复性的非特异性B.DNA C. 变性的非特异性 D. 高分子化合物 E. 低分子化合物 Southern印迹杂交（）。

6. 下列哪些步骤属于 A. 待测核酸样品的制备 B. 待测DNA样品的电泳分离 C. 凝胶中核酸的变性 D. Southern转膜。

）7. Southern转膜时常用的膜是（滤纸硝酸纤维素膜 D. A. 化学活化膜 B. 尼龙膜 C.）。

8. 常用的Southern转膜方法有哪几种（B. 毛细管虹吸印迹法A. 硝酸纤维素膜法 D. 真空转移法C. 电转印法。

9. 用于Southern印迹杂交的探针可以是（） RNADNA片段 B. 纯化的片段A. 纯化的 C. 多核苷酸D. 寡核苷酸片段原位杂交可以用来检测（）。

10.DNA A. DNA B. RNA C. cDNA D. RNA和。

）11. 原位杂交所用的探针可以是（A. mRNA B. DNA C. RNA D. cDNA）。

12. Northern印迹杂交中转膜时可采用的方法有（电转印法 B. A. 毛细管虹吸印迹法凝胶分离法C. 真空转移法 D.13. 核酸原位杂交包括（）。

D. 杂交冲洗 B. A. 组织细胞的固定预杂交 C.。

下列哪些属于核酸原位杂交的常用固定液（14. ） A. 10%甲醛 B. 4%多聚甲醛 13C. 乙醇：冰醋酸（：）戊二醛 D.文档大全．实用标准文案15. RNA酶保护分析法可用于（）。

A. mRNA定量B. mRNA定性C. mRNA末端定位D. 确定内含子在相应基因中16. 核酸酶S1能降解（）。

A. DNA 单链B. DNA双链C. RNA单链D. DNA/RNA杂交双链17. 根据检测方法的不同，非核素标记物可分为以下几类（）。

A. 半抗原B. 配体C. 荧光素D. 化学发光探针18. 下列物质属于半抗原的是（）。

A. 亲和素B. 罗丹明C. 生物素D. 地高幸19. 核酸分子杂交所用探针采用体外标记法的优点是（）。

A.安全系数高B.需要活体生物或细胞培养系统C.探针，核酸分离和纯化及储存很方便D.体外标记一般比体内标记的比放射活性高20. 化学法体外标记核酸探针最常用的是（）。

A. 125IB. 光敏生物素C. 3HD. 32P21. DNA探针的酶促标记法包括（）。

A. 缺口平移法B. 随机引物法C. PCR标记法D. 末端标记法22. 探针的纯化包括（）。

A．乙醇沉淀法 B. SephadexG-50C. 甲醇沉淀法D. 丝柱离心法23 DNA变性后的理化性质的变化有（）。

A. 粘度降低B. 密度增加C. 紫外吸收值增加D. 熔点减小24. Southern杂交结果检测包括（）。

A．放射自显影 B. 比色或化学发光检测C. 酶切图谱分析D. 凝胶电泳分离25. Southern杂交在医学中的应用包括（）。

A. 酶切图谱分析B. 特定基因定性和定量C. 基因突变分析D. 限制性片段长度多态性的分析四. 填空题:1. 核酸分子杂交中，杂交的双方分别称为与。

2. 核酸分子杂交中已知的核酸序列称为。

3. 适当的电泳缓冲液中，DNA在电场作用下，由负极向正极泳动，分子越大，泳动速度。

4. 当促使变性的因素解除后，两条DNA又通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构，称为。

5. 在DNA的碱基组成中，AT之间是氢键，GC之间是氢键。

6. 鉴别DNA靶分子的杂交称为，鉴别RNA靶分子的杂交称为。

7. 根据检测对象的不同，可将原位杂交分为和。

8. 常用的液相杂交有和。

9．RNA酶保护分析法（RPA）的基本程序包括：、、、、。

文档大全．实用标准文案10. 液相杂交的核酸酶S1保护分析法可用于、、和。

11. 核酸探针包括：、、和。

12. 在用核酸标记的探针，大多数标记方法需要的是α-32P，末端标记必须使用。

13.核酸的体外标记法分为和。

14.核酸的体外标记法中的酶法最常用的是和标记。

五、简答题1、DNA变性的常用方法有哪几种？2、简述DNA的复性过程。

3、一个良好固相支持物应具备哪些特性？4、试比较硝酸纤维素膜、尼龙膜和化学活化膜的优缺点。

5、核酸原位杂交的理想固定液应具备哪些特点？6、一种理想标记物应具备哪些特性？7、随机引物法标记DNA探针有哪些优点？六、论述题1、试述核酸分子杂交的原理。

2、试述影响核酸分子杂交的因素。

3、试述Southern印迹杂交的基本步骤。

4、试述Southern印迹的常用方法及原理。

文档大全．实用标准文案5、试述核酸原位杂交的基本过程。

6、试述探针的种类及其制备。

7、试述切口平移法标记DNA探针的原理。

名词解释：SiRNA:利用双链小片段RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA，从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。

Blue/white screen:蓝白斑筛选。

即β-半乳糖苷酶基因失活筛选。

其原理是：某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ'基因，该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α－肽的DNA片断，IPTG可诱导此片断合成，此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α－互补，形成完整的β－半乳糖苷酶。

该酶能催化指使剂底物X－gal形成蓝色菌落。

当外源基因插入lacZ'基因中MCS(多克隆位点)，lacα－肽基因阅读框架被破坏，细菌内将无β－半乳糖苷酶活性，结果重组克隆呈白色菌落。

Knock down:（基因）敲除。

是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。