实验目的
练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾 腺染色体标本的方法。
根据带纹形态识别不同染色体的末端。
实验原理
发现
1881年，意大利Balbiani在双翅目昆虫 摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了巨 大的“永久性染色质纽”。
1930年前后，研究发现，“染色质纽” 实质上是特殊的染色体。
个方向揉片。
实验作业
绘制你所观察到的果蝇唾腺染色体末端
果蝇唾腺染色体
果蝇各染色体臂的形态
各臂的末端模式图
开口小，附近有胀泡 开口小，附近没有胀泡
开口部位粗细较一致 口实底虚 口虚底实
胀泡与基因表达
在个体发育的某个阶段或某些化学物质 的诱发下，多线染色体的某些带纹变得 疏松膨大而形成胀泡。
唾液腺
位置：在幼虫体前约1/3处。 形状：形如一对香蕉，上小下
大。一边常附着带状的不透明 的脂肪。
颜色：半透明如玻璃，略带白 色，比周围的组织都透明。
注意事项
一定要加生理盐水，否则唾腺易干； 水不可过多，否则幼虫易漂起来并且活
跃，影响剥离；
剥离时尽量去干净脂肪； 染色时间不可过长，否则背景着色； 压片前先轻敲，使之分散，压片时朝一
解离和染色：取解剖好的唾腺于载片上→→加一滴 1mol/L HCl解离2min →→吸去HCl →→蒸馏水洗1 次5min→→轻轻吸去蒸馏水，用卡宝品红染色10min；
压片（揉片）及观察：
幼虫培养的注意事项
培养基要较稀且富含营养 追加酵母 幼虫密度要小 低温培养
果蝇唾腺剥离示意图
同种动物的不同组织以及不同动物的相 同组织的多线化程度各不相同。
例如摇蚊马氏管细胞的染色体最多能复 制 9次，从而使每对同源染色体含有 1024条染色单体；而唾腺细胞染色体能 复制13次。
双翅目类昆虫的幼虫期的唾腺染色体很 大，宽约5u，长约400u，相当于普通染 色体的100-150倍。唾腺染色体经过多次 复制而不分开，大约有1000-4000根染色 体丝的拷贝，又称多线染色体，经染色 后出现深浅不同、疏密各别的横纹。
后来，其他学者又在果蝇和其它双翅 目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了 巨大染色体。
巨大染色体
双翅类昆虫唾腺细胞的间期核中常看到的巨型 染色体。E Heitz和H Bauer（1933）以及T S Parnter（1933）指出了其细胞学意义。
许多双翅类以及种脉翅类昆虫的食道、肠、马 氏管和神经细胞中，以及在植物界的胡麻科的 胚盘细胞、虞美人草的反足细胞等都能看到具 有这样特征的染色体，因此，把这种染色体总 称为巨大染色体或多线染色体。
如棒眼基因在X染色体的16A区。
实验材料与药品
果蝇三龄幼虫 生理盐水 1mol/LHCl 蒸馏水 卡宝品红
实验方法
三龄幼虫的饲养
剥取唾液腺：在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄 幼虫放在其上。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后 端1/3处，右手的解剖针按住头部黑色口器斜向外拉， 将头部从身体拉开，唾腺随之而出。
果蝇4对唾腺染色体上已确定了6000多条 染色带。
巨大原因
染色体螺旋化程度不高。
核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育 过程中，细胞核内的DNA多次复制，但 细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单 体DNA也不分开（核内复制），形成了 多线染色体。
体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈 现一种联会状态，使其比一般的体细胞 染色体粗大。
胀泡是基因转寻和翻译的形态学标志, 此处DNA解旋呈开放环，RNA的合成 活跃，甚至还可观察到从贝尔比尼环上 新合成的蛋白质分泌颗粒。
3R 3L
X
3R X
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X
3R
3L
3R
3L X
X
唾腺染色体的特点
巨大； 体联会现象决定了染色体看起来只有半数； 各个染色体中异染色质多的着丝粒部分相互靠
拢形成染色中心； 横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自对应排
列，具有种的特异性。 若有缺失、易位、倒位、重复等现象，很容易
在唾腺染色体上识别出来。
基因定位
果蝇染色体有102个区，每个区又有A— F六个亚区，每个亚区又有1,2,3……等亚 亚区。