• 当免疫法与化学法结果同为阳性时，判定 结果为阳性结果，化学法显色结果可作为 出血程度的参考； • 当免疫法结果为阳性而化学法结果为阴性 时，判定结果为阳性，但可能其标本隐血 的含量极微少； • 当免疫法结果为阴性而化学法结果为阳性 时，建议复查； • 当两者均为阴性时，判定为阴性结果。
7.临床意义 • 1）上消化道有出血：OB（大便隐血实验）呈阳性 • 2）消化性溃疡：阳性率40%~70%,呈间断性阳性，治疗 粪便外观正常时，OB仍可持续5~7天阳性，此后若出血停 止OB可转阴；只要消化道出血大于5ml，即可出现阳性， 但不作为诊断的直接依据；若OB呈强阳性提示消化性溃 疡合并出血 • 3）消化道癌症：阳性率95%，呈持续阳性，可OB可作为 消化道癌筛选指标 • 4）流行性出血热：阳性率84%，OB为重要佐证 • 5）药物导致胃粘膜损伤（Eg阿司匹林、消炎痛、糖皮质 激素等）肠结核、溃疡性结膜炎、结肠息肉、钩虫病等， OB显示阳性。
3.实验原理 • 胶体金法：大便或其他体液隐血的免疫一步检验 法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该 法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体 ，特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。 • 邻甲苯胺法：血红蛋白中的亚铁血红素有类似过 氧化物酶的活性，能催化过氧化氢生成新生态氧 ，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。
两种方法在方法学上互补，故本次实验 选择胶体金法与化学法（采用邻甲苯胺法 ）同时进行粪便隐血试验。
1.病人准备 • 检验前两天内建议应禁食动物血、脏器及含叶绿 素类食物、铁剂、中药、维生素C 等药品。 2.标本采集处理保存要求 • 患者自行留取1-5g新鲜粪便标本于干燥、清洁、 无吸水性的有盖且有明显标记的容器内。 • 粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分，若无 ，应多部位取材。 • 粪便标本收集后应尽快（2小时内）进行检测，以 免因长时间放置导致隐血试验的敏感性降低。
4.试剂和器材 • 蒸馏水，一次性吸管数支，取样棒，稀释 样杯，粪便隐血试纸条；邻甲苯胺溶液， 3%H2O2溶液，普通玻片,消毒桶，普通、 医疗垃圾桶。
5.试验方法 邻甲苯胺法： • 1）以采样棒挑取少量大便涂于已滴加两滴生理盐 水的玻片上； • 2）显微镜下镜检查看有无红细胞； • 3）有红细胞者慎出隐血试验隐血报告； • 4）无红细胞者，滴加邻甲苯胺溶液2滴于此玻片 上与样本混匀； • 5）滴加上述新鲜过氧化氢溶液混匀； • 6）Байду номын сангаас分钟内显棕蓝色为阳性； • 7）此法阴性宜用金标法复查。
8.质控 • 邻甲苯胺法：采用血标本作为阳性对照。 • 胶体金法：质控区所显示的紫红色带（质 控区被事先固定上相应抗体）是判定层析 反应过程是否正常，即作为试纸条的质控 标准。
9.注意事项
• 1）粪便标本不能混入肛门、直肠的出血，粪便应新鲜，为提高检出 便中血液的几率，可多次采集大便样本。 • 2）在粪便标本的采集、运送过程中和使用试剂进行检测时，操作人 员应注意做好个人防护，避免人体接触以防止可能产生的污染和自身 感染。 • 3 ）试验前3天内不要食用动物血、肉、肝、铁剂（硫酸亚铁，枸缘 酸亚铁、红色补丸、富马酸铁）、富含叶绿素的食物（菠菜、青菜） ，避免假阳性反应；亦不可大量服用Vc或其他有还原作用的物质，避 免出现假阴性反应。 • 4）3%的双氧水必须有效，还应该做阳性对照试验（将双氧水涂在血 片上，有泡沫则可用）。 • 5）牙龈出血，鼻出血、经血亦可导致化学法阳性反应。故化学法阳 性者，应以胶体金法复查并参考问诊发出报告。 • 6）用具应杀菌处理的器材。 • 7）对无任何明显症状但却怀疑可能有少量出血的病人，建议应连续 取3 天粪便标本，每天从标本的不同部位取材做两次实验，3 天之内 共做6 次隐血检查。 • 8）冬天室温过低时反应可能较迟缓，应适当延长观察时间。
胶体金法： • 1)在稀释样杯中加入0.5ml的蒸馏水； • 2）用采样棒在标本的6个最有可能阳性的 部位取样； • 3）取好样品后，将样品与蒸馏水充分混匀 ； • 4）将金标纸条MAX线一端插入稀释样杯中 ，3-5分钟后观察结果。
6.结果判断 • 邻甲苯胺法：滴加双氧水溶液后随即出现 蓝色阳性反应，报告为++++；在10秒内出 现阳性反应，报告为+++；在一分钟内出现 阳性反应，报告为++；在1分钟后5分钟内 出现阳性反应，报告为+；没有任何颜色反 应则报告阴性。 • 胶体金法：检测区与质控区均出现红色线 的为阳性，如仅质控区出现红色线为阴性 ，如质控线不出现红色线则表示试验无效 应重做。
粪便隐血试验
第五小组
上消化道出血量＜5ml时，粪便中无可 见的血液，且红细胞被破坏，显微镜检查 也未见到红细胞。需要用化学法、免疫法 等才能证实的出血，称为隐血。 其检测方法包括化学法、免疫学方法、 转铁蛋白测定法以及其他方法。
传统化学方法的优点:结果显示快、清晰、成 本低、结果可以半定量，但特异性差，受饮食影 响等干扰因素大，假阳性率高，含亚铁离子的食 物和药物对结果有干扰，敏感度低，出血量 >90μg/ml才能检出。 胶体金法优点：特异性高，灵敏度高，不受 其他药物及铁剂、动物血等干扰，不受饮食限制 ，简便、快速，是目前早期诊断消化道出血性疾 病的一个首选的好方法。缺点:强阳性标本会产生 假阴性结果，且单独免疫法对于血基质无特异性 ，对上消化道检出率不如化学法高。