桑葚菌核病
——中国知网、百度文献
【发病时间】
桑枝枯菌核病在春季4-5月发病, 主要危害春季一年生枝条已萌发的桑芽, 常造成桑芽枯萎及病芽上方的枝条干枯死亡, 偶尔也为害春季萌发的新梢及叶片,造成新梢折断和叶片出现褐色枯斑。
【病原】
该病病原为子囊菌亚门核盘菌属真菌【cS le or int ias e l e or iot 川m (L i be rt ) d e Bayr ] 寄生所致。
病原菌于早春通过花芽侵入树体,4月底5月初为发病高峰, 至5月份在病芽基部能产生黑色菌核。
菌核随桑树采叶、伐条等桑园管理工作而掉入土中越冬越夏, 次年春季在菌核上产生子囊盘和子囊抱子,并通过风雨或昆虫传带引起初次侵染,从而造成病害的暴发。
虽然在发病的桑芽表面和桑花上也能产生菌丝体引起再次侵染, 但在整个病害侵染循环中的重要性不大。
该菌的寄主范围极广, 除桑树外, 还能有油菜蚕豆、大豆、蕃茄等64 科3% 种植物。
不合理的桑园间作和邻作是造成病害发生的重要因素, 特别是油菜、蚕豆等作物是菌核病的高发寄主, 往往造成交叉感染。
【预防措施】
因此, 对于该病的防治, 可采取选栽湖桑32 等抗病品种; 发病初期及时剪除病枝病芽集中处理; 减少间作,尽量避免间作或邻作油菜、蚕豆等易感病作物, 防止交互感染; 早春桑树开花期喷洒50%多菌灵100 倍液等综合防治措施。
【病原简介】
桑葚菌核病俗称白果病，病原物为核盘菌，菌核病的侵染源主要是混有菌核的土壤、染病残枝落叶和堆肥。
在温湿度适宜条件下，菌核萌发长出子囊盘，子囊盘散发出子囊孢子，随气流传播，侵染雌花、青果及早生桑的新梢和嫩芽。
孢子侵入雌花，寄生于桑果内，产生大量菌丝，果肉肿胀，呈乳白色。
【症状】
桑葚菌核病是肥大性菌核病、缩小性菌核病、小粒性菌核病的统称。
肥大性菌核病花被厚肿，灰白色，病葚膨大，中心有一黑色菌核，病葚弄破后散出臭气；缩小性菌核病椹显著缩小，灰白色，质地坚硬，表面有暗褐色细斑，病葚内形成黑色坚硬菌核；小粒性菌核病桑葚各小果染病后，膨大，内生小粒形菌核，病葚灰黑色，容易脱落而残留果轴。
【病原】
桑葚肥大性菌核病病菌CiboriashiraianaP.Henn.称白杯盘菌（桑实杯盘菌），属子囊菌亚门真菌。
子囊盘肉质，碗形或漏斗形，盘部褐色，直径5～10mm，分生孢子梗丛生，基部粗顶端细小，上生分生孢子。
分生孢子单胞，卵形，无色。
菌核萌发产生1～5个子囊盘，盘内生子囊，侧丝细长，内有8个子囊孢子，子囊孢子椭圆形，无色单胞，具隔膜1～2个。
桑葚缩小性菌核病病菌Mitrulashiraiana （P.Henn.）Itoetlmai.称白井地杖菌，属子囊菌亚门真菌。
分生孢子梗细丝状，具分枝，端生卵形至椭圆形分生孢子，单胞，无色。
从菌核上产生子实体，单生或丛生。
子实体有长柄，柄部扁平，有的稍扭曲，灰褐色，生有茸毛。
子实体头部长椭圆形或纺锤形，上端圆形，具数条纵向皱纹，浅褐色，子囊生在头部外侧子实层里，内生子囊孢子8个。
子囊孢子单胞无色，椭圆形。
桑葚小粒性菌核病病菌CiboriacarunculoidesSiegleretJankins称肉阜状杯盘菌，属于囊苗亚门
真菌。
1个菌核能生出1至数个子囊盘。
子囊盘碗形，直径4～12mm，有长柄，长15～2mm。
子囊圆内生8个子囊孢子，子囊孢子肾脏形，有半球形小体附着。
侧丝有分枝，有隔或无隔。
病原为子囊菌亚门核盘攻属菌核菌
[Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)de.Bary]。
菌核病表面黑色，内部白色，鼠粪状。
菌丝不耐干燥，相对湿度在85%以上才能生长。
对温度要求不严，在0～30℃之间都能生长，以20℃为最适宜，是一种适合低温高湿条件发生的病害。
【传播途径和发病条件】
病菌以菌核在土壤中越冬。
第二年春季条件适宜，菌核萌发产生子实体，子实体上子囊盘生子囊释放出子囊孢子，借气流传播到雌花上，菌丝侵入子房内纠结成一团形成菌核，菌核随桑葚落入土中越冬。
春季温暖、多雨、土壤潮湿利于菌核萌发，产生子囊盘多，病害发生重。
通风透光差，低洼多湿的桑园发病重。
不同的栽培品种与病害发生有一定的关系。
【化学防治】
重点是准确把握防治时机。
在果桑开花前后，主要用70%甲基托布津粉剂1000倍液或50%多菌灵可湿性粉剂800～1000倍液喷洒树体。
用药时一定要周到、细致，做到顶上枝条与下部枝条、叶片与桑花、叶片正面与反面、树上与地面都要均匀喷洒。
甲基托布津、多菌灵交替使用。
每隔7天1次，共喷2～3次。
甲基托布津、多菌灵务必购买正厂正品药物，保证药品质量。
菌核真菌分离纯化的问题
我做桑葚菌核病菌核真菌的纯化分离，可培养基（PDA）中一直长不出菌丝
我把菌核切成片，在升汞半分钟，75%酒精差不多半分钟灭菌，然后接在PDA培养基上，可
做了几次都是没有菌丝长出来
主要试剂及配方
真菌DNA提取试剂盒、胶回收试剂盒、DL2000DNA Maker、10*PCR buffer、MaCl2、dNTP、TaqDNA聚合酶、溴酚蓝、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、琼脂、Tris、冰乙酸、青链霉素、无水乙醇等
ＰＤＡ培养基：去皮土豆２００ｇ，加入去离子１０００ｍｌ，持续煮沸３０ｍｉｎ后加入葡萄糖２０ｇ，琼脂１８ｇ，并补足水分，１２１℃高压灭菌３０ｍｉｎ。
待培养基冷却到室温后，加入相应剂量的除菌后的青链霉素即可。
萨氏液体培养基：葡萄糖４０ｇ，蛋白胨１０ｇ，酵母粉１０ｇ，去离子水１０００ｍｌ，１２１℃高压灭菌３０ｍｉｎ。
５０×ＴＡＥ缓冲液：冰乙酸５.７ｍｌ，Ｎａ２－ＥＤＴＡ３.７２ｇ，Ｔｒｉｓ２４.２ｇ，去离子水１０００ｍｌ，溶解完全后放入棕色瓶中，４℃冰箱保存。
菌株ＸＸ菌的分离＼纯化＼培养
先用灭菌后的蒸馏水将白果表面冲洗干净，然后用７５％的乙醇对其表面消毒３０ｓ，最后用无菌水冲洗３次，取出后放于滤纸上自然风干３０ｍｉｎ。
然后用无菌镊子和刀片，在超净台中去除小核果表皮，从中间横切，将横切面朝下放于ＰＤＡ培养基中，将其转接入含有０.０３％青链霉素的ＰＤＡ培养基中进行菌种纯化。
将纯化后的菌种再转接于含有液体ＰＤＡ培养基的冷存管中，并放于－８０℃冰箱中备用。