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微生物标本接种详解演示文稿


综合病症
•尿道炎或急性尿路综合征 •膀胱炎-膀胱的炎症 •肾盂肾炎-肾脏的炎症
有症状的 无症状的
Age年龄 5
Studies from Baylor, Nashville, & France
பைடு நூலகம்
血培养
一旦提示阳性结果,涂片行革兰染色,根据镜检结 果决定转种羊血平皿及巧克力平皿上,并分别放置 普通培养箱及CO2烛缸内35 ℃ ~37℃孵育培养需 氧和兼性厌氧菌;转种布氏血琼脂,厌氧环境培养 厌氧菌;转种沙保罗培养基,培养真菌。
尿道感染
•每年850万例尿路感染, 90%为女 性
•1/2.5个妇女在一生中会得UTI
•下行性感染:血流肾脏膀胱(金 黄色葡萄球菌,酵母菌,结核分枝杆菌 )
•上行性感染:尿道膀胱肾 盂 血流
Anatomy of Urinary Tract 尿路的解剖图
侧面图
膀胱 耻骨
子宫颈 尿道
输卵管 卵巢
子宫 阴道 直肠 肛门
将革兰染色结果立即向临床电话初级报告。 待细菌鉴定及药敏结果出来后再向临床发出最终报
告。
血液培养
【特别提醒】 厌氧菌 从血液中培养出厌氧菌的比率相对比较少,不推
荐每个病人常规增加一个厌氧血培养,但如果必要,选用 其配套的厌氧培养基来培养厌氧菌。 营养苛刻的细菌(Fastidious Bacteria) 布鲁氏菌属可以在常规血液培养基中生长,并且尽管可以 在三天内分离到,但是推荐培养21天,且有必要进行末次 接种。 HACEK群细菌—嗜泡沫嗜血杆菌(Haemphilus aphrophilus)、放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycemcomitans)、人心杆菌(Cardiobacterium hominis)、侵袭埃肯菌(Eikenellus corrodens)和金氏杆菌 (Kingella kingae)与细菌性心内膜炎有关,常规血培养 基中可以分离,但培养14天和进行肉汤末次接种会更有效。
•如果皮肤定植的细菌没有被杀死,这
些细菌将通过针头被吸入血培养瓶并在 瓶中生长
•这些细菌(主要为凝固酶阴性葡萄球菌)
引起导管相关性败血症 (住院患者血培 养第一位)
•医生不能将真的凝固酶葡萄球菌感染
和皮肤定植菌“污染”相区分,因此他 们用万古霉素治疗患者
皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管
皮肤不是无菌的;
体积
% 阳性血培养结果 vs. 采集的套数
80%
100
%
90
80
真阳性 70
60
50
40
30
20
10
0
1st
Mayo Clinic Study
89% 2nd
99%
20 ml/套
3rd
用于培养的血液体积
体重
磅 千克
体积 总量/ 1% 全血体 % 总血
(ml)/ 2次穿

液体积
穿刺 刺
<19 <9 1 2 2 ml 1%
19- 9-14 3 6 6-10 ml 1-3% 30
31- 15- 5 10 10-20 1-2%
60 27
ml
61- 28- 10 20 20-30 1-2%
采集血培养时间的重要性
166 病人
9% +
105 病人
14% +
发热高峰前12-2.5小时
发热高峰前2.5-0.5小时
199 病人
9% +
258 病人
11% +
发热高峰期间
发热高峰后1-12小时
Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study
立即获得足够血液并且开始抗生素 治疗
• 从不同部位获得2-3套血培养(40-60ml血 液)
• 最好在5分钟内采集
#1
#2
阳性报警时间
确定检测阳性的培养时间
•保留导管
➢管腔刷 ➢定量培养 (CVC & 外周血) ➢达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
哪部分用于培养
Maki 滚动法
导管尖阳性培养结果
苛养菌
不要放置常规血培养>5天 •由如下微生物引起的可疑的败血症或心内膜炎:
霉菌(组织胞浆菌 , 镰刀菌, 等等
秕糠马拉癣菌 军团菌属 巴尔通体
3 分离管
新型隐球菌
Q-热 惠普尔病 支原体属 其他病原菌
血清Ag凝集 + 分离培养
咨询ID医生
干预措施可以减少导管相关性感染
• 手消毒
soap
• 用洗必泰进行皮肤消毒
• 在穿刺过程中完全无菌操作
• 锁骨下静脉穿刺
• 移去不必要的中央静脉插管
血管内导管相关性感染预防指南. MMWR Recom Rep 2002:51(RR10)1-29
导管相关感染的诊断
关键点: 患者必须有菌血症
•敏感性和特异性 •检测管腔内的 & 外周细菌 •不需要移走导管 •可靠性和可重复性 •易操作 •快速回报 •感染的微生物可以分离 •对患者安全
检测导管相关感染
•移走导管
➢ Maki Roll (半定量) ➢超声波降解和稀释 (定量) ➢通过管腔抽吸 (定量)
微生物标本接种详解演示文稿
优选微生物标本接种
血培养
增菌培养
商品血培养瓶 成人瓶、儿童瓶、中和抗生素瓶 无菌操作采集血标本接种到培养瓶后,轻轻混匀以
防血液凝固。立即送检,切勿冷藏。 采血量成人采血量是10~20ml,儿童1~5ml。血液
和肉汤之比为1:5~1:10。 35℃ 培养5-7天
血培养
常规血液培养基不能分离钩端螺旋体。 分枝杆菌(Mycobacteria) 使用常规血培养
基不能分离。 导管头 培养导管头是为了明确细菌来源。
最常用的方法是半定量的方法,方法是用 5cm长的导管末端部分在血液琼脂平板上滚 动4次。培养物出现15个以上的菌落,提示有 潜在的导管相关性感染。
定植细菌“污染”血培养
葡萄球菌在塑料CVC表面生长形成生物膜
污染细菌
血培养污染定义为在几次血培养中单个血培 养下列细菌阳性:
•凝固酶阴性葡萄球菌 •棒状杆菌 •微球菌 •丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
血培养污染 vs. 皮肤消毒
5 4.5
4
% 污染3.5
3 2.5
2 1.5
1 0.5
0
酒精
碘酊
聚维酮碘
随着时间推移败血症病原菌的变迁
%住 院患 者血 培养 阳性 结果
18
#1
16 14
pathogen
12
10
8
6
4
2
0
萄球菌 金黄色葡
厌氧菌
肠球菌 酵母性菌葡萄球菌 凝固酶阴
1970's Today
From UW, Madison and G.Washington Univ., St. Louis
血培养存在的主要问题
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