样品- Tb3+荧光光谱 （920 稳态荧光光谱仪，英国爱丁堡公司）
Tb3+：1.0×10-3 mol/L；pH：6.4
方法回收率的测定
加入量
测定量
（1×10-5mol/L） （1×10-5mol/L）
Added
Measured
（1×10-5mol/L） （1×10-5mol/L）
回收率 （%）
Recover （%）
镧系敏化发光过程中的光的吸收和发射可简单表 示如下：
L + hν → L*（配体吸收激发光能） L* +Ln3+ →L + Ln3+*（能量转移） Ln3+* → Ln3+ + hν（发射Ln3+特征荧光）
稀土敏化荧光法的优点
1 Stokes位移大 ，克服了因激发和发射光谱重叠带来的误差 2 发射光谱谱带窄，特异性强 3 荧光寿命长，比普通荧光物质高几个数量级 4 荧光强度大，可提高测定的灵敏度 5 荧光稳定，受外界影响少。
性疾病，很多己经成为畜禽专用的抗菌药 物。其
中本次实验检验
O
的环丙沙星
F
COOH
(CPFX)是其
中最常用的
N
N
药物之一。
N
环丙沙星的结构式
兽
对人体的毒性作用
药
残
导致人类病原菌
留
耐药性的产生
的
对环境的污染作用
危 害
FQs残留的主要检测方法
1
具有灵敏度高、 特异性强、定量 准确、稳定性和 重复性好等优点， 缺点是仪器昂贵， 样品的前处理较 繁琐耗时。
平均回收率 相对标准差
（%）
（%）
Average Recover（%）
RSD
2.00
1.734
86.7
4.00
3.130
78.2
80.2
2.44
6.00
4.938
82.3
8.00
5.880
73.5
Fluorescence Intensity
关于仪器的差异
80000
435nm
60000
40000
20000
CPFX：1.0×10-5 mol/L；Tb3+：1.0×10-3 mol/L；pH：6.0
荧光强度
pH值对于实验体系的影响
50
45
40
35
30
25
20
15
5
5.5
6
6.5
7
7.5
pH值
发射波长555nm下pH对CPFX－Tb3+配合物体系的影响 （970CRT型荧光仪，上海三科仪器有限公司）
CPFX：1.0×10-5 mol/L；Tb3+：1.0×10-3 mol/L
稀土敏化荧光法检测动物源食品中环 丙沙星药物残留的研究与应用
答辩内容
第一章 绪论 第二章 实验部分 第三章 结论 致谢
第一章 绪 论
氟喹诺酮类药物(Fluoroquinolones，FQs) 是
一类十分重要的广谱抗菌药物，是继磺胺类药物
之后人类在合成抗菌药方面最重要的突破。氟喹
诺酮类药物几乎适用于临床常见的多种细菌感染
第二章 实验部分
试验材料与仪器
鸡胗购自虹桥菜市场 七氧化四铽Tb4O7（优级纯 ） 环丙沙星标准品C17H18FN3O3（分析纯 ）
Cary 100 紫外-可见分光光度计 920 稳态荧光光谱仪 970 CRT 型荧光仪
实验部分
体系激发波长的选择 荧光光谱测定
pH值对于实验体系的影响 Tb3+离子浓度对 于实验体系的影响 绘制标准曲线 计算回归方程
545nm 490nm
CPLX CPLX-Tb3+
588nm
621nm
0
350
400
450
500
550
600
650
Wavelength (nm)
445nm 436nm
—CPFX —CPFX—Tb3+
555nm 482nm
920 稳态荧光光谱仪 英国爱丁堡公司
970CRT型荧光仪 上海三科仪器有限公司
荧光强度
标准曲线与回归方程
标准曲线
70
60
50
40
30
y = 0.5169x + 5.843
20
R2 = 0.9862
10
0Байду номын сангаас
0
20
40
60
80
100
120
环丙沙星浓度（1×10-7mol/L）
Tb3+：1.0×10-3 mol/L；pH：6.4 CPFX浓度在5.0×10-7 mol/L～1.0×10-5 mol/L
范围内线性关系良好。
样品的处理
样品 样品提取液
振荡离心
样品提取液 清洗仪器
振荡离心
上清液 正己烷
下清液待用
混匀静置
上清液
样品的测定
Fluorescence Intensity
30000
25000
20000
15000
10000
5000
0
350
400
450
500
550
600
650
Wavelength (nm)
样品的测定
方法回收率的测定
结论
体系激发波长的选择
Absorbance (a.u.)
0.35
0.30 0.25
271nm
0.20
0.15 0.10
320nm
0.05
0.00
200
250
300
350
400
450
500
Wavelength (nm)
1.0×10-5 mol/L 环丙沙星的紫外可见吸收光谱 （Cary 100 紫外-可见分光光度计，美国瓦里安公司）
谢谢！
CPFX（1.0×10-5 mol/L） CPFX（1.0×10-5 mol/L）—Tb3+（1.0×10-3 mol/L）
结论
本文利用Tb3+离子与氟喹诺酮药物形成配合物后 产生的敏化荧光来检测动物源食品中的环丙沙星 含量，建立了Tb3+增敏荧光光度法检测鸡肉组织 中的环丙沙星的方法。
本实验样品前处理简单、快速，实验过程操作方 便、快捷、经济，可以满足快速判断CPFX的残留 量超标与否的要求，为CPFX药物残留分析提供了 极为经济的快速筛选方法。
荧光光谱测定
Fluorescence Intensity
80000 60000
435nm
40000
20000
545nm 490nm
CPLX CPLX-Tb3+
588nm
621nm
0
350
400
450
500
550
600
650
Wavelength (nm)
环丙沙星和环丙沙星-铽离子配合物的荧光光谱 （920 稳态荧光光谱仪，英国爱丁堡公司）
高效液相 色谱法
2
普遍适用于抗菌药 物的残留测定，其 检测限常高于药物 的最高残留量，不 够灵敏，因此仅能 作为残留的一种筛 选方法。
微生物法
3
操作简便、快速 和样品容量大的 优点, 可使用正 相或反相板, 分 辨率较高。缺点 是样品的前处理 较繁琐耗时。
高效薄层 色谱法
稀土敏化荧光法
镧系敏化荧光：属f→f禁戒跃迁的三价镧系金属如Tb3+对 200-400nm紫外光的吸收相当弱，因而发光发光效率很 低。但当有机配体与Tb3+离子形成配合物后，在高能射线 激发下，配体吸收能量后有效的传递给Tb3+从而发射出镧 系离子的特征荧光。
荧光强度
Tb3+浓度对于 实验体系的影响
荧光强度
70 60 50 40 30 20 10
1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 Tb3+浓度(1×10-4mol/L)
Tb3+浓度的影响（970CRT型荧光仪，上海三科仪器有限公司）
CPFX：1.0×10-5 mol/L； pH：6.4
三、致谢
本论文是在孙春燕副教授的悉心指导下完成的。导师 扎实的理论基础，严谨的学风以及精益求精的科研精神都 是我学习的榜样。导师不仅在学习上给予我谆谆教诲，而 且在生活的各个方面都给与了我无微不至的关怀和帮助。 在此，谨向我的恩师孙春燕副教授致以最诚挚的感谢和祝 福。
我还要感谢在整个实验过程中给予我很多关心的卢静 老师，袁媛老师，叶海清老师，王海波老师，卜秀娟老师， 李凤芝老师等，感谢你们对我一直以来的的帮助和指导！