1.6 酶学性质研究
（1）pH 的影响：分别测定粗酶液在pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0下的酶活力，确定其最适反应pH 值；将粗酶液用上述pH 缓冲液稀释后，45℃水浴保温4小时后，测定其剩余酶活力。

（2）温度的影响：分别在40~95℃下测定酶活力，确定其最适反应温度；将酶液在40～90℃范围内的不同温度下保温60 min 后，测定其剩余酶活力。

（3）金属离子的影响：在酶液中分别添加各种金属离子，使其浓度为4 mmol ／L ，然后测定酶活力。

2.5 纤维素酶粗酶液酶学性质
2.5.1酶反应的最适pH 值和酶的pH 稳定性
粗酶液在不同pH 值下测得的酶活及在不同pH 值下处理4小时后测得的相对酶活示于图11。

结果表明，CMCase 在pH 3.5～4.5有较高的酶活力，最适反应pH 值为4.0；β-Gluase 在pH 4.5～5.5酶活力较高，最适反应pH 值为5.0，同样方法测得FPA 最适反应pH 为5.0。

可见，该菌株所产的各组分纤维素酶是酸性酶。

图11表明，该菌产CMCase 在pH3.0～6.0的范围内，β-Gluase 在pH3.5～5.5的范围内，酶活力均可保持在80％以上，说明该菌株所产酸性纤维素酶可在较宽的pH 值范围内保持其酶活力的稳定性。

2.5.2 酶反应的最适温度和酶的热稳定性
在不同温度下直接进行酶促反应测得的酶活及在不同温度下热处理60 min 后于最适反应温度和最适pH 下测得的相对酶活(以4℃保存的酶液活力为100%)示于图12。

结果表明，CMCase 、β-Gluase 及FPA 最适反应温度均为65℃。

c e l l u l a s e a c t i v i t y ( U .m l -1)
pH
r e l a t i v e y a c t i v i t y （%）
c e l l u l a s e a c t i v i t y ( U .m l -1)
temperature ( o C )
r e l a t i v e y a c t i v i t y （%）
图11 pH 值对酶活力及酶稳定性的影响
Fig.10 Effects of pH value on Cellulase activity and
stability 图12 温度对酶活力及酶稳定性的影响 Fig.11 Effects of temperature on activity and
stability of cellulase
图12表明，温度低于60℃时，CMCase和β-Gluase能保持90％以上的酶活性，酶液在80℃
下保温1小时，CMCase仍保持10%的活性，70℃热处理1小时，β-Gluase活性仅损失60%。

但两种酶在温度超过65℃后，酶对热的耐受性急剧下降。

2.5.3金属离子对酶活性的影响
考察了14种金属离子对酶活性的影响，以不添加金属离子的酶液酶活为100%计算相对
酶活，结果见表1。

结果表明，Fe2+、Mn2+对两种酶活有明显的激活作用，Mg2+对酶活有一
定的激活作用，Hg2+、Cu2+和Ag+三种重金属离子对酶活有强烈的抑制作用，而所考察的其
他金属离子在实验浓度范围内对酶活无明显影响。

表1 金属离子对酶活性的影响
Table 1 Effects of metal ion on cellulase activity
Metal
Hg2+Cu2+Ag+Pb2+Co2+Zn2+Fe3+Ni2+Al3+Ca2+Ba2+Mg2+Fe2+Mn2+ ion
CMCase
12.1 28.7 42.2 51 92.5 98.6 92.1 105 100 99.5 103 123 143 134
（%）
β-Gluase
15 20.5 57.4 60 102 104.6 101 99.7 94.9 109 103 114 145 125
（%）
3 小结。