中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2005,25(10):58~62皮肤组织工程支架材料术曹成波1,4”王一兵2沈翔3王勇4(1山东大学化学与化工学院济南2501002山东省立医院济南250021)(3山东大学材料科学与工程学院济南250061)(4山东大学控制科学与工程学院生物医学工程研究所济南250061)摘要皮肤组织工程支架材料为种子细胞提供生长和代谢的环境,是人工皮肤研究中的重要内容,可按来源分为合成支架材料和天然支架材料。
近几年的研究重点是:前者通过表面仿生技术增强其对细胞的黏附性;后者通过物理或化学方法提高其力学性能和渗透性等。
今后应重点研究以下内容:深入研究合成支架材料的表面改性,进一步提高其引导细胞行为的功能,促进材料对细胞的黏附;进一步提高天然支架材料的微观渗透性和生物活性,促进毛细血管的长入;制备结构仿生支架材料及高活性复合支架材料。
关键词皮肤组织工程合成支架材料天然支架材料仿生支架材料目前最成功的组织工程产品是人工皮肤,已经商品化的主要有美国的Inte目阻、AⅡode咖、Dem妒R、Apligraf等。
但现有人工皮肤并不具备完整的皮肤结构和功能,没有达到人工重建皮肤的目的,因此,近些年国内外众多研究者都在为实现真正意义上的人工皮肤而努力。
皮肤组织工程支架材料作为细胞外基质,为细胞提供了黏附、生长、迁移、增殖和分化的环境,在人工皮肤的构建中起着关键作用,是皮肤组织工程的重要研究内容,现简要综掘醚跨筏捌糖糍搦醚珏馨饔隧嘴黧罐壁同源j蓁雾舞夔简瑟霆鳇羹羹毳霭鞋堡塑召型娶学王莶撂短皓璎黑凿荐揩羹委鬣涩冶氇囊引耐羹需满;嘉鞍i秭影孙i鬟rotein,cHP)也被称为钠氢离子交换活性调节亚单位,是NHE的结合蛋白。
各种cHP亚型表达在不同的组织细胞,CHPl广泛表达在各种组织细胞旧 ̄9J,cHP2表达在部分肿瘤组织细胞和细胞系[3,10“川,CHPl3表达在分化阶段的心、脑、肾等组织细胞p,13J。
各种cHP亚型扮演着不同的角色,分别影响NHE活性,进而影响细胞内pH值变化,及肿瘤细胞生长和疾病进程[3“3|。
我们重点研究cHPl与NHEl结合部位、结合方式,以及CHP对NHEl活性调节作用。
观察cHP调节NHEl活性对细胞生长和死亡的影响。
收稿日期:2005JD4JD5修回日期:2005.06旬7{天津市科委应用基础基金资助项目(05YFJⅢc02100)十,通讯作者,电子信箱:tiaIIxi8Il印a119@yalloo.com.cn1材料与方法1.1材料和设备1.1.1材料人体多种组织cDNA、真核细胞表达质粒pEGFP—N1均购自clorltech公司,细胞培养液DMEM购自Invitrogen公司,同位素22Na+购自PerkinElmerLifescience公司。
NHEl的抑制剂EIPA由日本国大阪新药特药研究室提供。
NHE表达缺失的Psl20细胞系,包含野生型人NHEl的真核细胞表达质粒pEcE,抗人NHEl多克隆抗体、抗人cHPl多克隆抗体均由日本国家循环系统疾病中心研究所赠送。
抗人NHEl多克隆抗体的抗原决定簇是人NHEl细胞质区域氨基酸残基;抗cHPl多克隆抗体的抗原决定簇是人cHPl全部氨基酸残基。
1.1.2设备细胞内阳离子测定系统、共聚焦荧光显微镜(MRc-1024con‰almicrosc叩e)、放射线检测仪。
1.2分析方法应用共聚焦荧光显微镜检测cHPl.GFP融合蛋白在细胞内分布,研究细胞内cHPl定位。
用放射线检测仪计数细胞摄入放射性钠的数值。
应用显微镜计数分皮肤组织工程支架材料刊名:中国生物工程杂志英文刊名:CHINA BIOTECHNOLOGY年,卷(期):2005,25(10)被引用次数:4次1.Kast C E;Frick W;Losert U Chitosan-thioglycolic acid conjugate: a new scaffold material for tissue engineering[外文期刊] 2003(1-2)2.Griffith L G;Naughton G Tissue engineering-current challenges and expanding opportunities[外文期刊] 2002(5557)3.Lin F H;Chen T M;Chen K S An animal study of a novel trilayer wound dressing material - non-woven fabric grafted with Nisopropyl acrylamide and gelatin[外文期刊] 2000(03)4.Lu A;Sipehia R Antithrombotic and fibrinolytic system of human endothelial cells seeded on PTFE: the effects of surface modification of PTFE by ammonia plasma treatment and ECM protein coatings[外文期刊] 2001(11)5.朱堂友;伍津津;胡浪壳多糖-胶原-糖胺聚糖凝胶人工皮肤的制备[期刊论文]-重庆医学 2002(10)6.邓政兴;张志雄;周长忍聚乙烯吡咯烷酮接枝壳聚糖的生物相容性评价[期刊论文]-第一军医大学学报 2004(02)7.Kweon H Y;Park S H;Yeo J H Preparation of semiinterpenetrating polymer networks composed of silk fibroin and poly (ethylene glycol )[外文期刊] 2001(10)8.何清义;陈秉礼;王智彪人羊膜细胞外基质与成纤维细胞体外培养的实验研究[期刊论文]-中华整形外科杂志2002(04)9.吴克安新型胶原基皮肤组织工程支架材料的制备、结构与性能表征 200410.曹成波;宋国栋;刘宗林新型胶原基人工皮肤模型的建立[期刊论文]-现代化工 2005(01)11.Chen R N;Ho H O;Tsai Y T Process development of an acellular dermal matrix (ADM) for biomedical applications[外文期刊] 2004(13)12.李立华;丁珊;周长忍聚乳酸/壳聚糖多孔支架材料的生物学性能评价[期刊论文]-生物医学工程学杂志2003(03)13.杨健;贝建中;王身国改进高分子材料细胞亲和性的研究-聚(D,L-乳酸)的等离子体处理改性[期刊论文]-中国修复重建外科杂志 2001(05)14.Zhu Y B;Gao C Y;He T Endothelium regeneration on luminal surface of polyurethane vascularscaffold modified with diamine and covalently grafted with gelatin[外文期刊] 2004(3)15.Suh H;Hwang Y S;Lee J E Behavior of osteoblasts on a type Ⅰ atelocollagen graftedozone oxidized poly L-lactic acid membrane[外文期刊] 2001(3)16.HoM H;Kuo P Y;Hsieh H J Preparation of porous scaffolds by using freeze-extraction and freeze-gelation methods[外文期刊] 2004(01)17.夏照帆;田建广;唐洪泰异种无细胞真皮支架及其制备方法 200318.刘琰;章雄;许伟石猪无细胞真皮基质对人皮肤成纤维细胞就附及生长的影响[期刊论文]-中国修复重建外科杂志 2003(02)19.唐洪泰;肖仕初;夏照帆微孔异体(种)脱细胞真皮替代物 200220.Ng K W;Khor H L;Hutmacher D W In vitro characterization of natural and synthetic dermal matrices cultured with human dermal fibroblasts[外文期刊] 2004(14)21.刘德伍;李国辉;邹萍表皮细胞、成纤维细胞复合脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤[期刊论文]-中国临床康复2004(08)22.姜笃银;陈壁;徐明达异种脱细胞真皮基质的制作和临床应用观察[期刊论文]-中华烧伤杂志 2002(01)23.姜笃银;陈壁;贾赤宇异种脱细胞真皮基质抗原性的实验研究[期刊论文]-中华烧伤杂志 2003(03)24.Desagun E Z;Botts J L;Srivastava A Long-term outcome of xenogenic dermal matrix implantation in immunocompetent rats[外文期刊] 2001(01)25.Srivastava A;Desagun E Z;Jennihgs L J Use of porcine acellular dermal matrix as a dermal substitute in rats[外文期刊] 2001(03)26.肖仕初;夏照帆;杨珺含表皮细胞的无细胞真皮复合皮的构建及生长活性研究[期刊论文]-解放军医学杂志2002(07)27.Ma L;Gao C Y;Mao Z W Collagen/Chitosin porous scaffolds with improved biostability for skin tissue engineering[外文期刊] 2003(26)28.Ma L;Gao C Y;Mao Z W Enhanced biological stability of collagen porous scaffolds by using amino acids as novel crosslinking bridges[外文期刊] 2004(15)29.Lee S B;Jeon H W;Lee Young Woo Bio-artificial skin composed of gelatin and ( 1-3 ), ( 1-6)-b-glucan[外文期刊] 2003(14)30.王琴梅;潘仕荣;张静夏聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇嵌段共聚物的合成与表征[期刊论文]-功能高分子学报2001(01)31.陈文娜;杨建;王身国聚丙交酯/聚乙二醇多嵌段共聚物的合成及其性能[期刊论文]-高分子学报 2002(5)32.Freyman T M;Yannas I V;Gibson L J Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering progress in materials[外文期刊] 2001(3-4)1.金以超.刘玲.顾华.何黎.韩跃东.杨汝斌以牛Ⅰ型胶原作为人工皮肤支架的研究[期刊论文]-昆明医学院学报2008(4)2.Dong Li.马绍英.Zhao Ya-ping.李幼忱.Zhou Mo.康悦.Xu Yong-jie.李宝兴无细胞真皮支架与同种细胞相容性的动态观察[期刊论文]-中国组织工程研究与临床康复 2008(27)3.陈灿.王志军.刘伟.王斌.杨柠泽.张晨比较不同处理方法对脱细胞真皮渗透性的影响[期刊论文]-中国美容整形外科杂志 2008(4)4.赵琳.宋建星创面敷料的研究现状与进展[期刊论文]-中国组织工程研究与临床康复 2007(9)本文链接:/Periodical_swgcjz200510012.aspx。