栀子中改善睡眠成分的研究
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!)’)’((( 栀子甙的提取及检验 称取 ,"( . 栀子生药粉末& 用体积分数为 /01的
乙醇溶解& 料 液 比 分 别 为 ’2!"& ’3’"& ’40& 在 温 度 /"( 5 的 条 件 下 超 声 %"( 678& 超 声 波 频 率 !/)"9 :;<& 合并后抽滤& 滤液由真空旋转蒸发仪浓缩至无 乙醇& 用水饱和正丁醇等体积萃取 % 次& 合并萃取 液& 静止后重复萃取& 取上层正丁醇相& 减压回收溶 剂& 残渣即为栀子甙粗提物#
>)))实验材料
>,>,>))) 试材 炒栀子% 购于北京同仁堂药店&
-6F6’!#G!H% */F6% */HG% */!FH’% */GFH’% 三氯甲烷% 甲醇% 盐酸% 高锰酸钾% 盐酸羟胺% 乙 醇% 正丁醇% 石油醚% 乙酸乙酯和巴比妥纳等% 均为 分析纯- 戊巴比妥钠为生物纯&
IJKLFMNFOA""L’4 型 超 声 波 药 品 处 理 机 % 济 宁 金百特电子有限责任公司提供- OP? "! 型高速中药粉 碎 机 % 温 岭 市 大 海 药 材 机 械 厂 生 产 - PO? >">? >4 型 电热鼓风干燥箱% 天津市中环实验电炉有限公司提 供- 上皿 8->""A 型电子天平% 上海精科天平公司提 供 - N4#"" 型 电 子 天 平 % 上 海 精 科 天 平 公 司 提 供 GG!Q!>? # 型电热恒温水浴锅% 北京长安科学仪器厂 生产- R8? F 型三用紫外分析仪% 上海强运科技有限 公 司 提 供 - ST? U! 型 旋 转 蒸 发 器 % 上 海 亚 荣 生 化 仪 器厂生产- QGJ? V型循环水式多用真空泵% 郑州长 城科工贸有限公司提供&
’ !" 巴比妥钠阈下剂量催眠实验# 末次给予受试 成分 %"( 678 后& 按 阈 下 剂 量 ’0"( 6.NQ:.!RST腹 腔 注 射巴比妥钠& 注射量为 ")’( 6=NQ’"( .!RST& 观察受试 物对注射阈下巴比妥钠的小鼠入睡率的影响#
’ %" 巴比妥钠睡眠潜伏期实验# 末次给予受试成 分 %"(678 后& 按 %""(6.NQ:.!RST腹腔注射巴比妥钠& 注射量为 ")’( 6=NQ’".!RST& 观察受试 物 对 巴 比 妥 钠 对小鼠睡眠潜伏期的影响#
国标方法改善睡眠的功能检验包括$ 直接睡眠实 验% 巴比妥钠阈下剂量催眠实验% 巴比妥钠睡眠潜伏 期实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验# 以翻正反射 消失为观察指标& 具体表现为& 当小鼠置于背卧时& 能立即翻正身位& 如果超过 %"+#"(U 不能翻正者& 即 认为翻正反射消失& 进入睡眠( 翻正反射恢复即为觉 醒& 翻正反射消失至恢复这段时间为动物睡眠时间#
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荧光反应$ 用玻璃棒沾取样品的乙醇溶液在滤纸 上点样& 喷洒 ’19 LCBC% 乙醇& 紫外 灯 下 观 察 & 呈 明 显荧光黄色为阳性# !)’),999% 种成分的提取率
提取率 M 提取物净质量 N 原生药总质量O’""P# 栀子中 % 种主要功效成分的提取率见表 ’#
按照国标方法对以上 % 种粗提物进行改善睡眠实 验& 将 ’%! 只实验动物按体质量随机分为 ’’ 组& 分 别为$ 栀子黄酮低剂量% 中剂量和高剂量组( 栀子内
>’! 只雄性清洁级昆明小鼠% 体质量 + !"X!$ =% 由北京大学医学部试验动物中心提供% 许可证编号" QFYZ%京 C!""!? """& Q48 动 物 试 验 室 许 可 证 编 号 " QNYZ%京C!""U? """#& 实验动物饲喂常规饲料 + 购于 北京大学医学部试验动物研究中心% 符合 [J>A@!A!
’"+!"( .# 以此剂量的 ’ 倍% ’" 倍% %" 倍分别设低% 中% 高 % 个 剂 量 # 按 照 ")’( 6=NQ’"( .!RST灌 胃 小 鼠& 生 药 含 量 分 别 为 $ 低 剂 量 ")"%( .N6=& 中 剂 量 ")%(.N6=& 高剂量 ’(.N6=# !)!)!((( 改善睡眠功能检验*0-
[/501<3/,W Td:5/.:3<=W :c511W /.:3a1W .+2‘+<1<:;W +7W [/501<3/" =1<3‘+;301% 6/.:+<1W /<0W 76/a+<1% f1W .+960W 1d‘6+51W :c135W 3<7691<.1W +<W ;692b15,W e1W 710W :c1W :c511W .+2‘+<1<:;W :+W 23.1W /<0W :1;:10W c+fW :c1W .+2‘+<1<:;W /.:10W +<W :c1W /2+9<:W +7W :c1W 0351.:6^W ;611‘3<=W 23.1% :c1W ;611‘3<=W 5/:1W +7W 3<h1.:10W ;9b? :c51;c+60W 0+;1W b/5b3:/6W ;+0392W 23.1% :c1W ;611‘3<=W 0163:1;.1<.1W +7W 3<h1.:10W b/5b3:/6W ;+0392W 23.1W /<0W :c1W ;611‘3<=W :321W +7W 3<h1.:10W 4166:+b/5b3:/692W */:53.92W ;+0392W 23.1W 1d‘15321<:,W Kc1W 51;96:;W ;c+f10W :c/:W :c1W ;611‘3<=W +7W 23.1W .+960W b1W 32‘5+a10W b^W :c1W :c511W .+2‘+<1<:;W 75+2W [/501<3/ + !]","U$ ,W Kc1W =1<3‘+;301 + c3=cW 0+;1$ c/0W :c1W b1;:W 1771.:,
万方数据
酯低剂量% 中剂量和高剂量组( 栀子甙低剂量% 中剂 量和高剂量组( 蒸馏水对照组 ’ 栀子甙和栀子内酯的 溶剂" ( 吐温对照组 ’ 栀子黄酮的溶剂" #
表 ’(((栀子中 % 种主要功效成分的提取率 W
成分
提取率
栀子甙 栀子内酯 栀子黄酮
’")X0 "!)!" "!)#X
!)!)’((( 给药剂量及方法 根据 ) 中药大辞典* *’-& 栀子生药的临床用量为
薄层层析法$ 称取样品用甲醇溶液 ’"(6=& 点样 于硅胶 > 薄层板上& 按常规薄层层析法& 以氯仿 & 甲 醇 ’ %?’" 为 展 开 剂 & 展 距 ’09 @6 左 右 & 取 出 晾 干& 用质量分数为 ")’1的高锰酸钾中性水溶液染色& 在淡红色底色上呈现一亮黄色斑点为阳性# !)’)!999 栀子内酯的提取及检验
摘要" 论述了栀子中改善睡眠功效成分的提取及其功效研究& 提取栀子中的栀子甙) 栀子内酯以及栀子黄酮等 ’ 种
成分% 按照国标方法进行改善睡眠功能实验% 每种成分分别设高) 中) 低 ’ 个剂量组% 分别研究 ’ 种成分对实验动
物改善睡眠的作用效果& 实验结果表明% 栀子中 ’ 种主要功效成分对实验动物的改善睡眠效果显著高于正常对照组
溶液反应$ 取样品水提液 ’9 6=& 加体积分数为 /1的盐酸羟胺甲醇液 % 滴& 体积分数为 !"1的甲醇 液 % 滴& 在温度 ,"G的条件下水浴& 出现砖红色 为 反应阳性# !)’)%999 栀子黄酮的提取及检验
称取 0"9 . 栀子生药粉末& 用体积分数为 /01的 乙醇溶解& 料液比分别为 ’H’"& ’I$& ’J0& 在温 度 #"9 K 的 条 件 下 超 声 %"9 678& 超 声 波 频 率 !/)"9 :;<& 合并抽滤& 滤液真空旋转蒸发浓缩至无醇& 用 乙酸乙酯等体积萃取 % 次& 合并萃取液& 减压回收溶 剂& 残渣即为总黄酮#
!""# 年第 $ 期
第 $ 期%总第 &’ 期()))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))农产品加工!学刊
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