Note:1.用S/CO比值进行统计计算. 2.最好选择临界值,或弱阳性样本.
判断标准:批内CV小于15%,批间CV小于25%.
Method validation of the qualitative test
三.诊断敏感性:
1.验证方法:取10-20份已知真阳性的样本（样本来源困难时 可以酌情减少）。用常规检测方法检测，计算检测阳性的 样本占样本总数的比例。
2.样本来源: 临床上明确诊断的阳性病人血清； 厂家提供的明确为阳性的样本； PT中的阳性样本； 决定性参考方法检测阳性的样本； 以上阳性样本来源紧张时，可以进行稀释（如 validation of the qualitative test
四.特异性:
1.验证方法：选取20份正常健康人血清（一般取自健康体检 者），计算其检测阴性结果所占百分率。
Method validation of the qualitative test
验证方法1: 找临界浓度的标准品(可要求厂家提供), 连续检测20次,95%的结果落在临界范围 即可.
验证方法2: 连续统计一段时间的检测结果,处于临界 范围的结果比例小于5%即可.
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甲肝IgM定性项目方法学验证.doc 2008年3月优生仪器比对.doc
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参考资料:
1.《定性实验方法学验证管理程序》KM-MP0301.20 2. User Protocaln for Evaluation of Qualitative Test
↓
随机每8份分成一组
↓
两种方法(或两台仪器)每天平行检测一组样本
↓
将所有检测结果汇总
↓
Kappa检验,评价一致性
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补充说明:关于CUTOFF值验证 定量实验但是报告定性结果的才需要做 CUTOFF值验证.(比如PCR室的乙肝 DNA定性).
Performance Performance;Approved Guideline，NCCLS-EP12-A
2.样本来源:体检样本,体检者本人填写<健康调查表>确认符合 要求后即可. NOTE:部分项目在健康体检人群中阳性率也很高,此类项目特 异性验证很难执行,建议引用厂家说明书.
比如麻疹病毒IgG,CP-IgG,MP-IgG等一系列病毒抗体IgG.因为很难确认体检者既 往是否有过感染史,而IgG抗体在体内存留时间长.因此很难收集到真正意义上的阴 性样本.
时测定同样的样品，用KAPPA检验方法分析两种 方法检测结果一致性.(比如HBV酶免法和发光法 比对)
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二.精密度验证:
1.批内精密度:同一份样本在同一批次内平行重复检测 10次.然后计算均值,SD和CV.
2.批间精密度:同一份样本连续检测10天,每天平行检 测双孔.然后计算均值,SD和CV.
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一.准确度验证:
1 .检测已知值的参考物质 • 室间质评材料 (卫生部或者CAP) • 厂商提供的已赋值的参考材料 • 分析用参考方法或决定方法定值的材料。(如
dsDNA检测) 2. 方法比较试验：样本数为10-20个，两种方法同
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几个重要概念及计算公式的回顾: 1.诊断敏感性:将实际患病者正确诊断为阳性的百分率。
计算公式为：真阳性/（真阳性+假阴性）X 100% .
2.特异性 :
指将实际无病者检测为阴性的百分率。 计算公式为：真阴性/( 真阴性+假阳性） X 100% .
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3.Kappa检验:
用与两组定性结果一致性比较.用公式
计算得到一个 kappa值. kappa值位
于〔-1,1〕, Kappa≥075时两组结果一
致性较好；0.75>Kappa≥0.4两者一致
性一般；Kappa<0.4表示两者一致性 很差.
• 观察一致率P0=（A+D）/ N
阳性 方 法 阴性
• 机遇一致率Pc=(R1C1/N + R2C2/N) / N
A 合计
• 实际观察一致率= P0 — Pc
• 非机遇一致率= 1- Pc
• Kappa= （ P0 — Pc）/（1- Pc）
方法B 阳性 阴性 合计 A B R1 C D R2 C1 C2 N
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补充1:同一项目不同检测方法或仪器的比对
适用范围:一个项目有两种以上的方法或者两台以上 的仪器(包括同一型号的仪器)同时检测,需要进行一 致性比对. 定量检测中,报告单位不同的不需要比对
首次比对选取40份(20)样本,最好阴阳性各半
定性实验的方法学验证
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李慧源 临床免疫学实验室 Kingmed clinical immunology Lab
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验证目的: 1.评价和验证各定性检测项目的准确度、
同一项目不同检测方法或仪器的比对 CUTOFF值验证
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实施验证的时机: • 引进新检测项目及方法。 • 已确立的检测方法的更新。 • 原有的检测方法应用扩大到新的检测范
畴。 • 质控指标表明已确立的检测方法性能正
随时间而改变。
精密度、灵敏度、特异性、等各项参数， 满足临床检测和认可组织的要求. 2.验证厂家提供的试剂参数能在本实验室 得到重现.
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验证的内容: 准确度(Accuracy) 精密度(Precision) 诊断敏感性（sensitivity of diagnosis） 特异性（specificity）: