ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ １－ １ ９ ７ ８ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ３ ． ０ ０ ９ 文献标志码： Ａ 文章编号： １ ０ ０ １－ １ ９ ７ ８ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ３－ ０ ３ ３ ０－ ０ ６ 中国图书分类号： Ｒ ３ ２ ９ ． ２ ４ ； Ｒ ３ ２ ９ ． ２ ５ ； Ｒ ７ ３ ７ ． ９ ０ ２ ． ２ ； Ｒ ９ ７ ７ ３ 摘要： 目的 研究 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ对乳腺癌的增殖抑制作用及其抗 蛋白酶体荧 癌机制。方法 荧光底物法检测蛋白酶体活性； 光探针法研究 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ与蛋白酶体 β催化亚基结合； Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ 、 Ｊ Ｃ １探针检测 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ对细胞凋亡和线粒体膜电 ｉ ｎＶ Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ 位的影响； 用蛋白免疫印迹法检测细胞内的蛋白表达。 结果
Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ抑制细胞内外蛋白酶体的活性， 其中对 Ｃ Ｔ Ｌ的抑 制作用 最 强， 对 Ｔ Ｌ的 作 用 比 Ｐ Ｓ ３ ４ １强 ３ ４倍； Ｍ Ｃ Ｆ ７对 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ最敏感， 且比 Ｐ Ｓ ３ ４ １敏感性高； Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ以时间依赖 性诱导细 胞 凋 亡， 与 对 照 组 比 较， 差异均有显著性（ Ｐ＜ ） 。Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ增加 ｕ ｂ ｉ ｑ ｕ ｉ ｔ ｉ ｎ 、 Ｐ Ｉ Ｂ 、 ｗ ｔ ｐ ５ ３ 、 Ｂ ａ ｘ 、 ｅ ｎ ｄ ｏ ｎ ｕ ０ ０ ５ κ α Ｂ 、 Ｂ ｃ ｌ ｘ Ｌ 、 Ｘ Ｉ Ａ Ｐ水平， 不影响 ｃ ｌ ｅ ａ ｒ ｓ ｅＧ蛋白表达，减少 Ｉ κ α Ｎ Ｆ Ｂ表达。结论 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ是新蛋白酶体抑制剂， 具有较 κ 强的抑制 Ｍ Ｃ Ｆ ７细胞增殖的作用， 抗癌机制与诱导细胞凋 亡有关。
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·３ ３ ０ ·
中国药理学通报 Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｂ ｕ ｌ ｌ ｅ ｔ ｉ ｎ ２ ０ １ ４Ｍ ａ ｒ ； ３ ０ （ ３ ） ： ３ ３ ０～ ５
网络出版时间： ２ ０ １ ４－ ２－ ２ ４１ ３ ： ４ ３ 网络出版地址： ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｗ ｗ ｗ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｎ ｅ ｔ ／ ｋ ｃ ｍ ｓ ／ ｄ ｅ ｔ ａ ｉ ｌ ／ ３ ４ ． １ ０ ８ ６ ． Ｒ ． ２ ０ １ ４ ０ ２ ２ ４ ． １ ３ ４ ３ ． ０ ０ ９ ． ｈ ｔ ｍ ｌ
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４ ］ 时也引起神经疾病等不良反应和耐药性 ［ 。基于
· ·３ ３ １
法测定蛋白含量。 １ ． ４ ２ ６ Ｓ蛋白酶体的活性检测 蛋白酶体活性常 用 荧 光 底 物 法 检 测。 Ｓ ｕ ｃ Ｌ Ｌ Ｖ Ｙ Ａ Ｍ Ｃ 、Ｂ ｏ ｃ Ｌ Ｒ Ｒ Ａ Ｍ Ｃ、 Ｚ Ｌ Ｌ Ｅ Ａ Ｍ Ｃ分别为 Ｃ Ｔ Ｌ、 Ｔ Ｌ 、 Ｐ Ｇ Ｐ Ｈ的特异 性荧光底物。体外活性检测时， 从Ｍ Ｃ Ｆ ７细胞内提 取２ ６ Ｓ 蛋白酶体， 不同浓度的 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ （或 Ｐ Ｓ ３ ４ １ ） 、
－ １ ２ ６ Ｓ 蛋白酶体（ １ ２ ５μ ｇ ） 和５ ０μ ｍ ｏ ｌ ·Ｌ 的特异性 － １ 荧光底 物 在 缓 冲 液 （ ５ ０ｍ ｍ ｏ ｌ ·Ｌ Ｔ ｒ ｉ ｓ Ｈ Ｃ ｌ ，ｐ Ｈ － １ － １ ７ ５ ， ５ｍ ｍ ｏ ｌ ·Ｌ Ｍ ｇ Ｃ ｌ ， ０ ５ｍ ｍ ｏ ｌ ·Ｌ Ａ Ｔ Ｐ ， １ ２ － １ － １ ·Ｌ Ｄ Ｔ Ｔ ， ０ ． ５ｇ ·Ｌ Ｂ Ｓ Ａ ） 中３ ７ ℃ 孵育 １ｈ 。 ｍ ｍ ｏ ｌ
Ｐ Ｓ ３ ４ １结构的启发， 李润涛教授课题组合成了一系 列新的三肽硼酸类化合物， 经过体内外药效学筛选 发现 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ ［ Ｎ （ ２ Ｐ ｙ ｒ ａ ｚ ｉ ｎ ｅ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｎ ｙ ｌ ） Ｌ ｌ ｅ ｕ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｌ （ ２ ｎ ａ ｐ ｈ ｔ ｈ ｙ ｌ ） ａ ｌ ａ ｎ ｉ ｎ ｅ Ｌ ｌ ｅ ｕ ｃ ｉ ｎ ｅｂ ｏ ｒ ｏ ｎ ｉ ｃａ ｃ ｉ ｄ ］ （ Ｆ ｉ ｇ１ ） 具有很强的杀伤肿瘤细胞及抗乳腺癌的作用。本文 Ｓ Ｙ ０ １ Ａ对乳腺癌增殖的影响， 并以 Ｍ Ｃ Ｆ ７ 研究了 Ｙ 细胞株为研究对象， 探讨了 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ的抗癌机制和 蛋白酶体靶向作用。
蛋白酶体抑制剂 Ｙ Ｓ Ｙ ０ １ Ａ不依赖 Ｎ Ｆ Ｂ通路 κ 抑制乳腺癌细胞增殖及诱导凋亡研究
， ３ 张 梅１ ，袁 霞１，徐 波１， 冉福香１，吴 军１， 葛泽梅２， 李润涛２， 崔景荣１
（ 北京大学药学院 １ ．天然药物及仿生药物国家重点实验室、 ２ ．化学生物学系， 北京 １ ０ ０ １ ９ １ ； ３ ．新疆石河子大学药学院药理系， 新疆 石河子 ８ ３ ２ ０ ０ ０ ）
２ ］ ５ ｉ ） 、 Ｐ Ｇ Ｐ Ｈ（ １／ １ ｉ ） 和Ｔ Ｌ（ ２ ｉ ） 位点 ［ 引起细 β β β β ３ ］ 胞周期阻滞和细胞凋亡而产生抗肿瘤作用 ［ ， 但同
Ｏ ｎａｃ ｅ ｌ ｌ ｐ ｅ ｎ ｅ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｎ ｇｐ ｅ ｐ ｔ ｉ ｄ ｅｍｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｅ ｄ ｄ ｅ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｄ Ｎ Ａｉ ｎ ｔ ｏｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｎ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ
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