粪大肠菌群
游离余氯
不得检出
水质非常规指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 贾第鞭毛虫/（个/10L） 隐孢子虫/（个/10L）
修订后
限值 <1 <1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 菌落总数/（CFU/100mL）
修订后
限值 500
生活饮用水水质参考指标及限值
过滤器
滤芯
FiltaMax Xpress 快速系统-滤器及滤芯
Filta-Max : 滤芯结构（手动/自动法）

60 层环状海绵: 55mm x 10mm (18mm 中孔)

从60cm 压缩成 3cm
螺栓固定
Filta-Max xpress:快速法滤芯结构

40 层海绵: 55mm x 10mm (18mm 中孔) 39层海绵: 40mm x 10mm (18mm 中孔) 交互叠放 从79cm 压缩到 3cm 螺栓固定
五、贾第鞭毛虫子和隐孢子虫 贾第鞭毛虫和隐孢子虫是一类寄生于人和动物体 内的肠道原虫，可致人兽共患病。患此病的人和动物 从粪便中排出大量的卵(孢)囊污染环境，在地面水和 防护差的地下水及处理不良的自来水中都可检出卵(孢) 囊。随着社会发展，优质供水势在必行。对一些潜在 的危险因素加以限制很有必要。在此基础上，新标准 中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测方法。
—U.S.EPA
两虫的检测方法（免疫磁分离荧光抗体法）
检测程序： 水样过滤 洗涤 离心 免疫磁珠捕获卵囊 磁珠与 显微镜检
卵囊复合物的分离 查记述 结果报告
荧光标记和DAPI染色
检测问题：
方法操作复杂 检出率低 无法进行生物活性判定 不能进行属、种鉴定
价格高
IDEXX Filta-Max® 手动/自动系统 －滤器及滤芯
滤器＋滤芯
淘洗液收集
3.离心浓缩
1.将装有淘洗液样本的500mL离心管置2000g离心力下，离心15min。慢慢地减速 ，（不能使用制动装置！）以免搅起沉淀物。 2.用吸气装置将沉淀物上层8-10mL处的悬浮物小心吸出 （吸气装置的真空应小于3.3kPa）。
4.免疫磁珠捕获
捕获原理:
标记A抗体的磁珠
1.水样过滤
水样从两侧流经压缩的海绵膜汇集至中孔 “两虫”在滤芯表面被捕获
滤器连接套件
水样流向
滤器 滤芯（过滤模 块）
2.洗涤(淘洗)滤芯
洗涤管
滤芯置于洗涤管,并将 滤芯下部的压缩固定锣 栓解除 周律性地压缩/扩展海绵滤 芯
洗涤(淘洗)装置
过滤器
500ml锥 形离心瓶
Filta-Max®手动淘洗装置
水质常规指标及限值
修订前
微生物指标 细菌总数 限值 100 CFU/mL 微生物指标 菌落总数/（CFU/mL）
修订后
限值 100
总大肠菌群
总大肠菌/（MPN/100mL或 每100mL水样中不得检出 CFU/100mL） 不得检出 耐热大肠菌/（MPN/100mL 每100mL水样中不得检出 或CFU/100mL） 不得检出 在与水接触30min后应不 大肠埃希氏菌/ 低于0.3mg/L,管梢末水不 （MPN/100mL或 应低于0.5mg/L CFU/100mL）
Filta-Max®自动淘洗装置
FiltaMax Xpress 快速淘洗装置
Filta-Max xpress快速法淘洗流程
压缩 空气

滤器（带滤芯）放入淘洗装置 淘洗装置连接缓冲液及空气压缩机 加 4.0 巴(58 psi)压缩空气 按动F1钮


2分钟后收集400ml淘洗液
快速全自动
Cryptosporidium
隐孢子虫
特点:单一细胞原生动物，约3-7m 。有微小隐孢子虫、 鼠隐孢子虫和贝氏隐孢子虫三种，寄生于人、牛等体内的 主要为微小隐孢子虫（C．parvum）。 宿主：人类、鸟类、鼠类、爬行类、鱼类 感染源:隐孢子虫主要寄生在被感染的动物体肠道内，卵 囊通过粪便排出体外污染环境。 易感人群：免疫缺陷者（如爱滋患者）、儿童、老人、医 务人员等 传播方式:以粪-口，手-口途径为主，污染的水源和空气 均可传播。
结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， 结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， MPN值为0（主要针对出厂自来水或 MPN值<2.2 需每天检验一次的水样）
滤膜法
修订前 修订后
滤膜法原理：用孔径为0.45μm 的微孔滤膜过滤水样,细菌被截留 在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 经培养后,计数生长在滤膜上的典 型大肠菌群菌落数。 培养条件：37℃ 18-24h



易感人群：3岁以内婴儿；免疫功能受损害者；旅游者。
重要的动物宿主 贾第鞭毛虫在自然界广泛存在，包括两栖动物；鸟类； 哺乳动物在内的40多种动物均可成为贾第鞭毛虫的宿 主。 调查表明，人排出孢囊可使狗、海狸、麝鼠、沙土鼠 及大鼠等动物感染。 一些生活在水中的动物可被来源于人的贾第鞭毛虫孢 囊感染，因此这些动物即使不是主要宿主也可B5749-2006
生活饮用水标准检验方法GB5750-2006
微生物指标及微生物检验的介绍
广东省CDC微生物检验所
严纪文
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB574985，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用 水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机 物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠 菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。 修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总 大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和 隐孢子虫。 同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法 是指用孔径为0.45μm的微孔滤 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h， 能形成特征菌落的需氧和兼性厌 氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检 测水中总大肠菌群的方法。 培养条件：37℃ 24±2h
酶底物法
酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h
修订前
微生物指标 限值 微生物指标
修订后
限值
-
肠球菌/（CFU/100mL）
产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL）
0
0
一、菌落总数
修订前
修订后
细菌总数 菌落总数 原理：细菌总数是指水样在一定 定义：水样在营养琼脂上有氧条 条件下培养后（培养基成分、培 件下37℃培养48h后，所得1ml水 养温度和时间、pH、需氧性质等） 样所含菌落的总数。 所得1ml水样所含菌落的总数。按 本规范规定所得结果只包括一群 能在营养琼脂上发育的嗜中温的 需氧的细菌菌落总数 培养条件：36±1℃ 24h 36±1℃ 48h
培养条件：36±1℃ 培养4h 紫外灯：波长366nm，功率6W
酶底物法定义：在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分 解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，并能产 生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落 能够在紫外光下产生特征性荧光，以此技术来检测大肠埃 希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。 培养基：ONPG-MUG 结果判定：水样变黄色同时在366nm的紫外光下产生蓝色 荧光为阳性。水样未变黄色而有蓝色荧光产生不能判定为 阳性。
Giardia
贾第鞭毛虫
两虫感染的特点 贾第氏鞭毛虫(Giardia)/隐孢子虫(Cryptosporidium) / 感染后无特殊临床症状,无预防疫苗，绝大多数抗生素 无效，治疗依赖于自身抵抗力 大部份作为源水的江河及水库水等地表水是高危的,大 部分地下水都有被地表水污染的潜在危险 可以通过被污染的源水而进入供水系统,水源性感染已 成为最大的感染源，但孢/卵囊对传统的水处理法中氯化 消毒有抗性,氯不能渗透过卵囊，沙滤及膜过滤法也不能 完全去除 饮用水高温煮沸也并非有效 对氯消毒耐受、对热敏感、感染剂量低、感染率高
具有A抗原的C/G
DYNAL MIX 1混 合器
MPC-S磁极
MPC-1磁极
5.免疫磁珠与孢（卵）囊复合物的分离
60min
5min
10min
染色镜检
6.染色及镜检


单克隆免疫荧光染色（FA-异硫氰酸荧光素）
四、大肠埃希氏菌
检测方法：多管发酵法、滤膜法、酶底物法 大肠埃希氏菌多管发酵法定义：大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大 肠菌群阳性，在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄 糖酫酸酶，分解荧光底物释放出荧光产物，使培养基在紫外光下产生 特征性荧光的细菌，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：EC-MUG（4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷）。 培养条件：44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯：波长366nm，功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG，菌落在366nm紫外光下产 生蓝色荧光 滤膜法定义：用滤膜法检测水样后，将总大肠菌群阳性的滤膜 在含 有荧光底物的培养基上培养，能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释 放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此来检测 水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：NA-MUG
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： 可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h 无需确证试验 操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： 检测成本高