在100℃煮沸5-6min。
2、巴氏消毒法：
在70-75℃煮30min或在80℃煮15min。
3、化学药剂消毒法:
用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；用氯气消毒水源等。
4、紫外线消毒：紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒
石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强 消毒效果。
……
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌：
蛋白胨等） 无机氮源（氨水、铵盐和硝酸盐等）
1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
培养基组分
提供的主要营养
牛肉膏 5g
碳源、磷酸盐和维生素
蛋白胨 10g
氮源和维生素
NaCl 5g H2O 定容至1000mL
无机盐 氢元素、氧元素
在提供上述几种主要营养物质的基础上， 培养基还需要满足微生物生长对__pH__、 _特__殊__营_养__物_质__以及__氧_气__的__要_求__,例如:
（1）概念：无菌技术泛指在培养微生物的操 作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）获得纯净培养物的关键： 防止外来杂菌的入侵。
（3）避免杂菌污染的方法
1.对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清 洁和消毒。
2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 进行灭菌。
3.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近进行。
病毒 病毒界
五类 微生物
细菌 放线菌
原核生物界
真菌
真菌界
原生动物 原生生物界
原核类: 细菌、放线菌、蓝藻等
微
原生生物：显微藻类、原生动物
生 真核类
（如草履虫、变形虫等）
物 真菌：酵母菌、霉菌、食用菌等
非细胞类：病毒、朊病毒等
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
菌落：
❖ 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结 构的子细胞群体，叫做菌落。
❖ 菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落 特征因种而异
3.培养基的营养构成：
培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐(包括微 量元素)。
归纳
碳源 氮源
有机碳源（葡萄糖、果糖、蔗糖等） 无机碳源（二氧化碳，碳酸氢钠等 ） 有机氮源（花生饼粉、黄豆饼粉、酵母粉、
高二生物
选修一 生物技术实践 专题二 微生物的培养与应用
2019.12.6
导入新课
在缤彩纷呈的生物界，微生物似乎显得 过于微小与沉寂。然而，它们在自然界却作 用非凡。微生物有哪些种类呢？
大肠杆菌
葡萄球菌
放线菌
SARS病毒
禽流感病毒
朊病毒（蛋白质病毒）
蘑菇
黑曲霉 青霉菌
酵母菌
原生动物
草履虫
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周 围的物品相接触。
•无菌技术除了用来防止实验室的培养物被 其他外来微生物污染外，还有什么目的？
答：无菌技术还能有效避免操作者自身被 微生物感染。
2、消毒与灭菌
消毒是指使用较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微 生物（不包括芽孢和孢子）。
直接在酒精灯火焰的充分燃 烧层灼烧。
2、干热灭菌：
在160-170℃加热1-2h。
3、高压蒸汽灭菌：
100kPa、121℃下维持 15-30min。
（1）接种环、接种针、试管口等，使用
细菌、原生动物、真菌和 植物等产生的一种有繁殖或休 眠作用的生殖细胞。能直接发 育成新个体。
消毒与灭菌的比较
比较 理化因素的 项 作用强度 消毒 较为温和
灭菌 强烈
消灭微生物 的数量
部分生活状 态的微生物 全部微生物
芽孢和孢子 能否被消灭
不能
能
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:
3、获得纯净培养物的关键是什么？
4、避免杂菌污染的方法主要包括哪四个 方面？ 5、什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
一、培养基
1、培养基的概念：
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同 需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2、培养基分类：
（1）液体培养基：配制成的液体状态的基质。2来自培养基的分类：2.应用:
抗生素：链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素等。
微生物中发现了几千种抗生素， 其中2/3是由放线菌产生的。
细菌的营养类型
❖ 根据细菌所利用的能源和碳源的不同， 将细菌分为两大营养类型。
自养菌 异养菌
腐生菌 寄生菌
想一想
这些肉眼看不到的微生物是怎样获得的呢？
专题2 微生物的培养与应用
培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 __维__生_素___，培养霉菌时需将培养基的pH
调至_酸__性___，培养细菌时需将pH调至 _中__性_或__微_碱__性_，培养厌氧微生物时则需要
提供_无__氧___的条件。
4.培养基的用途
液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌
二、无菌技术
1、什么是无菌技术
（2）固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂 琼脂配制成的固体状态的基质。
你知道固体培养基的来历吗？
为了能直接观察培养物的形态及生长情况，科 学家希望能将微生物培养在固体表面上，就像微生 物生长在橘子皮或土豆上一样。最初，德国医生罗 伯特·科赫试着用明胶作培养基的凝固剂。 但是， 人们很快发现，明胶在20 ℃以上就变软了，很难进 行分离微生物的划线操作。而大多数细菌的培养温 度都不低于25 ℃。科赫的同事Walter Hesse发现琼 脂比明胶更适合做培养基的凝固剂。这个改进的方 法很快就被大家采纳。
课题1 微生物的实验室培养
教学目标
一、了解有关培养基的基础知识，进行无菌技 术的操作，进行微生物的培养。
二、 掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板 划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无 菌操作，成功地培养微生物。
一、基础知识 二、实验操作 三、结果分析与评价 四、课题延伸
1、培养基可以分为哪两类？ 2、培养基一般都含有哪些营养物质， 此外还要满足哪些要求？
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内 外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水 分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌