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水迷宫实验morris介绍

Morris水迷宫简介Morris水迷宫是英国心理学家Morris于20世纪80年(1981)代初设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段,其在AD研究中的应用非常普遍[3]。

较为经典的Morris水迷宫,测试程序主要包括定位航行试验和空间探索试验两个部分。

其中定位航行试验(place navigation)历时数天,每天将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中若干次,记录其寻找到隐藏在水面下平台的时间(逃避潜伏期,escape latency)。

空间探索试验(spatial probe)是在定位航行试验后去除平台,然后任选一个入水点将大鼠放入水池中,记录其在一定时间内的游泳轨迹,考察大鼠对原平台的记忆。

自从20多年前Morris水迷宫被发明以来,很多学者都采用此方法研究动物的空间学习记忆能力,并在经典的Morris水迷宫基础上进行了很多改进,如Markowska发现如果在空间探索试验阶段中能让平台间歇性的出现,这样较经典的方案能更加敏感的地测量动物的空间记忆能力。

Arteni采用双平台的水迷宫,轮流升起其中一个平台的方法来测量动物的工作记忆等等。

Morris水迷宫广泛用于啮齿类动物的视觉相关的空间记忆和工作记忆的测量中,但是否适用于测量动物的长时记忆还存在争议。

应用领域Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。

被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学等领域,在世界上已经得到广泛地认可,是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆研究的首选经典实验。

Morris水迷宫其最主要的附件之一就是水池,水池的质量及功能是实验不可却少的部分,在实验中水温的温度是实验的关键,淮北正华生物仪器设备有限公司生产的恒温水池是国内唯一有此功能的,其温度控温,及准确度已达到先进水平。

实验原理虽然老鼠是天生的游泳健将,但是它们却厌恶处于水中的状态,同时游泳对于老鼠来说是十分消耗体力的活动,他们会本能的寻找水中的休息场所。

寻找休息场所的行为涉及到一个复杂的记忆过程,包括收集与空间定位有关的视觉信息,再对这些信息进行处理、整理、记忆、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隐藏在水中的站台,最终从水中逃脱。

淮北正华生产的Morris分析软件[1]Morris水迷宫的组成部分1、恒温游泳池1台,大鼠:直径1.5米小鼠1.2米2、大鼠站台,规格:直径12cm,高度在20~35cm之间3、小鼠站台,规格:直径8cm,高度在20~35cm之间4、电脑及分析软件,提供了路程、时间、百分比、专项指标等40种分析数据,在分析过程中可选择性分析,数据导EXCEL表格方便生物学软件统计。

性能介绍Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置觉和方向觉(空间定位)的学习记忆能力。

编辑本段系统特点◆采用视频摄像跟踪技术,实现了实验过程的自动化,避免了人工计数引入的主观误差和对实验动物的干扰,增加了实验结果的真实性和可靠性;◆采用视频追踪技术,提取出Morris水迷宫实验中实验动物的运动轨迹,并据此计算出丰富的行为学定量指标,实现了Morris水迷宫实验的定量化、精确化和客观性,增加了实验结果的可信性;◆Morris水迷宫的尺寸规格按照Morris本人的设计,采用玻璃钢制作,可长期使用,视频摄像系统固定在特制的支架上,可拆卸,方便实验;◆视频文件格式支持A VI和MPEG-4压缩格式,MPEG-4文件的压缩比率高,可有效减少存储空间,有利于进行长时间实验;◆面向科研和计算机辅助教学(CAI),能够储存原始的视频图像,并提供完整的实验数据库功能,作为研究的真实记录和今后进行教学演示的素材;◆可在星光条件(0.01Lux)下进行视频分析(包括实时分析),对动物的干扰更小,星光条件符合啮齿类动物(例如大鼠、小鼠)的生活习性;◆采用开放式、模块化设计,系统可扩展性强,可外接其他的分析模块,轨迹点坐标序列数据和指标结果可导入到Excel,便于用户在Excel、SPSS、SAS等分析统计软件中作进一步分析处理;◆分析灵活,支持时段分析,支持定时终止和人工终止,并具有丰富的显示方式,能对动物的运动情况采用轨迹图、参数指标、曲线、直方图等多种显示方式,并可生成完整的报告,供打印输出;◆空间分辨率最高可达640x480像素,时间分辨率最高可达25帧/秒(常用15帧/秒),测量所得的指标结果精度高。

实验室里的Mirris水迷宫仪器编辑本段提供指标○观察时间○动物搜索策略○总路程○平均速度○上台时间(潜伏期)○初始角○上台前路程○上台前平均速度○穿越平台的次数○上台情况的总结○运动轨迹图(.BMP格式)○四个象限逗留的时间和路程○中央逗留的时间和路程○周边逗留的时间和路程○平台周边逗留的时间和路程等编辑本段应用领域学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学、行为生物学及时辰生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学(CAI)。

【讨论】水迷宫实验前一天应该怎么做水迷宫正式实验开始前一天,是否需要让大鼠在水中试游一下,具体应该怎么操作呢,看到有人说让大鼠自由游泳1min,在这个过程中需要引导大鼠上平台么,是在什么时候引导呢?各人体会这一个过程对后面的实验影响很大。

很多protocol里面都说需要让大鼠在迷宫中适应性游泳一次,让其熟悉环境,1至三分钟均可,上平台一般是在实验时间结束时还未找到时给予引导。

依我做的实验体会,这一过程对后面的影响并不大,老鼠是种非常聪明的动物,只要训练时严格按照程序进行,大部分都会很快的找到平台的。

具体的训练期程序很多文献及仪器说明书都有,等你做了实验就会有自己的体会了。

做的时候遇到了一些问题,一是动物之间的个体差异很大,标准差大概在28±10s左右,二是训练后潜伏期并没有随训练次数增加而缩短,而是基本没有什么变化,(我做了3天,每天的对照组潜伏期平均值基本差不多。

)不知道是不是和我在预适应的时候让他们游泳的时间不一样有关。

请问在实验中还需要注意些什么问题以保证少受外界因素的影响?我们在做的时候,并不做预适应的,在第一次训练时,5分钟结束后倘若大鼠还未找到平台,就拿棍子引导它一下,以后的学习及记忆的过程中均如此。

我们一般要做6天才基本结束,第6天撤台。

动物的个体差异一般都比较大啊,不过正常对照组要好一些的。

在试验过程中尽量保持条件一致,另外,一定要平行。

因为时间很长,尽量保持各组的时间一致。

对,还有人的站位,尽量离水迷宫远一些,防止大鼠将你当作参照物,造成视觉混淆。

请教一下,看来大家都是作关于记忆方面的,不知道大家所用的分子生物学指标都是什么了?除了检测神经递质还有别的吗?都是检测哪些具体的又是怎么做的了,大家讨论下。

谢谢了。

恰好有一份水迷宫的文献,讲的非常好。

共享给大家related forms of learning and memory.pdf.part1.rar (100.0k)文件较大,分卷压缩了related forms of learning and memory.pdf.part2.rar (96.72k)请教一下,看来大家都是作关于记忆方面的,不知道大家所用的分子生物学指标都是什么了?除了检测神经递质还有别的吗?都是检测哪些具体的又是怎么做的了,大家讨论下。

谢谢了。

检测海马及边缘系统的胆碱能神经元丢失状况老年斑和神经元纤维缠结经过学习几次之后,大部分鼠都能正确找到平台,而且潜伏期随着次数的增加而缩短,很明显的。

3天太少了,鼠们基本上还没学会呢。

protocol中的一般实验程序所被采用的7天程序,3天是少了,附件有水迷宫的中文程序,里面有具体的程序包括实验天数,可能对你有所帮助。

Morris水迷宫实验.doc (52.0k)Morris水迷宫实验(一)目的和原理为了研究在疾病条件下空间记忆(Spatial memory),工作记忆(Working memory)和空间辨别能力(Spatial diariminability)的变化,可采用Morris水迷宫。

Morris水迷宫是一种训练大鼠在水箱中游泳并找藏在水下逃避平台的实验方法。

由于没有任何可接近的线索以标志平台位置,所以动物的定位能力需应用水迷宫外的结构作为线索。

学会是指动物能够在短时间内找到平台。

尽管啮齿类动物可以通过非空间策略发现平台,但采用空间策略最有方式,只需少量的实验,就可培养年轻动物的空间策略。

(二)实验装置应用于Morris水迷宫的水池是一个圆柱体,大小有两种:一种是Morris最初设计的“经典”水池。

这种水池的直径为1.32m,高度为0.60m。

第二种为目前改进的水池,直径为2.14 m,高为0.40 m。

前一种水池水深为0.40 m,后一种为0.25 m,水池的内部为均匀的乳白色,不得有任何的标记。

采用适当的恒温设备使水温保持在26±1℃。

这两种水池均在各国实验室广泛使用,研究者可根据具体情况,选择其一。

水池应放在坚固的平台上,并且有良好的注水和排水设备。

一般将水池置于坚固的、可移动支架较好。

这样不仅仅便于水迷宫的安置,而且有利于摄像头位置的调整。

但是,一旦水迷宫的位置确定,就不要轻易变动,尤其在一轮水迷宫的测试中,位置绝对不能改变。

沿水箱边缘相等分布的四个点作为起始点,这样水箱就被分四个相同象限(四分之一园),一个小的平台位于某一个象限的中央。

在进行训练(参照记忆)时间(数天),平台必须放在绝对相同的位置。

根据实验的不同,平台可以是藏于水面下(水面下1 cm)而不可见(Hidden platfarm),也可以露出水面上(水面上1cm)而可见(Cueing produce),也有采用两个平台(Two platform task),其中一个平台可提供逃避,另外一个一触即下沉,这两个平台都是可见平台,而且外观和高度完全一样。

因此,Hidden platform通常采用乳白色,与水池、水(加有牛奶)颜色的一致,使平台藏于水面下而完全看不见。

与此相反的是,Cueing produce和Two platform task为黑色或黑白相间的条纹,使平台露于水面之上而醒目。

图10-14为示意图。

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