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生物测试法
❖ 方法：腹腔注射染毒，测其LD50 ❖ 优点：快速筛查、可以区分毒素的毒作
用特征 ❖ 缺点：灵敏度低、可比性差、不能定性
定量、一种毒素可能掩盖另一种毒素的 时相上较为延迟的严重毒性作用或致死 作用。
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磷酸酶分析法
原理：PP1和PP2A可强烈专一性促进糖原 磷酸化酶 a的水解，而MCYST又可与PP1 和PP2A共价结合，抑制其活性。据此，以 32p标记糖原磷酸化酶 a，三者相互作用， 根据32p的释放量来测定样品中MCYST的 含量。
– 生长期: 10 :1 ～ 5 :1 – 消解期: 3 :7
我国部分饮用水源水中MC-LR的污染情况 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
地区
采样时间
样本 数
源水（ng/L） 均数±标准差
最大值 样本 自来水(ng/L) 最大值 (ng/L) 数 均数±标准差 (ng/L)
淀山湖 94.7-8
5
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产毒藻种
Microcystis
Microcystis viridis M. wesenbergii
aeruginosa Kuetz. (A.Br.)Lemm
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产毒藻种
Anabaena
Oscillatoria
Nostoc
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优缺点：检测限低，反应灵敏，选择性
好，但是成本高，技术复杂
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环境暴露和人群接触水平
❖ 原水中毒素的浓度和变异度 (nd～10 µg/L)
❖ 自来水中毒素的浓度和变异度 (nd～1.0±µg/L)
❖ 其他：泳池中的藻类污染—非循环池 淋浴、加湿器
❖ 藻细胞内和细胞外：
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磷酸酶分析法
❖ 优点：检测限低（pg级），反应灵 敏，可检测样品中总MC的含量。
❖ 缺点：易受其它因素的影响 结果偏高：功能性测试 结果偏低：内源性蛋白磷酸酶活性
ELISA
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原理：利用毒素诱发免疫反应产生抗 体，利用抗体对抗原的特异性识别来 对各种毒素进行检测。
MC-LR
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环境暴露和人群暴露水平
❖ 分析方法 ❖ 暴露水平
检测方法
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❖ 生物测试法 ❖ 蛋白磷酸酶分析法 ❖ 酶联免疫吸附（ELISA） ❖ 高压液相色谱（HPLC） ❖ 液相色谱 – 质谱（HP－MS）
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概要
❖ 背景资料 ❖ 环境和人群暴露水平 ❖ 流行病学和毒理学研究结果 ❖ 研究方向
背景资料
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❖ 水体富营养化 ❖ 富营养化对水质的影响 ❖ 富营养水体中的主要产毒藻类 ❖ 与饮水水质相关的主要藻毒素
— 微囊藻毒素LR
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微囊藻毒素的免疫学特点
MC是一个分子量仅 1kDa左右的半抗原， 只能与载体连接后才 能产生免疫反应，而 且这些小分子量的化 合物免疫动物后大多 只能得到单一位点的 抗体，因而导致单抗 的筛选难度很大。
ELISA
资料仅供），一般 灵敏度较高，适合作为筛检实验 检测样品中总MC的含量。
5210±10120.61 3658.72±11511.69
360.7±536.44 141.08±244.37 56.81±31.41 86.79±66.69 321.72±450.34 375.22±390.99
1180 243.09±356.05 90±11(游离的)
620±590
23300 55400 2180 1083.43 130 245 1865 1789 2000
水体富营养化
湖泊、水库等水域的植物营养成 分（氮、磷等）不断补给，过量 积聚，致使水体营养过剩的现象 称为水体“富营养化”。
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滇池水华
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富营养化引起的水质变化
❖ 藻类迅速繁衍 ❖ 水质污浊发臭 ❖ 透明度下降 ❖ 感观性状恶化 ❖ 水中溶解氧不足 ❖ 鱼类及其他生物大量死亡 ❖ 加速水域的消亡过程
淀山湖 94.1－11 32
绍兴 95.4-98.3 90
海宁 97.7-9 69
深圳 98.9-99.12 11
宁波 98.8-99.6 35
淀山湖 98.4－99.1 26
淀山湖 99.7-00.4 77
巢湖
1999
16
鄱阳湖 00.7-00.10 40
淀山湖 02.6-02.10 30
上海 03.7-04.3 24
饮用水中的微囊藻毒素
❖ 淡水中常见的蓝藻能产生神经毒素和肝毒素， 与供水安全相关。
❖ 大部分肝毒素是微囊藻毒素(microcystins) ， 已知70多种亚型的微囊藻毒素，微囊藻毒素 －LR 是最早被鉴定出来也是最常见的亚型。
❖ 神经毒素在供水系统中不像肝毒素那样分布 广泛，造成的危害程度也不及微囊藻毒素。
❖缺点：商品化的试剂盒来源有限， 有交叉反应，特异度变化较大。
HPLC
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❖ 固定相：C18硅胶柱 ❖ 流动相：乙腈或甲醇等极性溶剂，
以TFA调节pH及离子对 ❖ 检测器
1. 紫外(UV)检测 2. 荧光(FL)检测 3. 化学发光(CL)检测
HPLC
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184 2380
1
151
9 70.89±112.27 355 22 4.85±2.80 11.34 15 16.93±19.42 49 12 11.33±17.36 46
❖ 定性：以标准品的保留时间为对照
❖ 定量：标准曲线法
❖ 优点：能准确定性定量，灵敏度好， 选择性好
❖ 缺点：必需标准品作对照，样品处 理复杂，仪器昂贵，技术复杂
LC-MS法
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原理：质谱分析是通过对样品离子质量 和强度来测定，来进行成分和结构分析 的一种分析方法。与色谱法联用，色谱 法是样品的预处理器，而质谱法则是检 测器。