掌握
⑶试验要点
①比较方法的选择： 最好选择参考方法作为对比方法。这样
在解释结果，就可把方法间的任何分析误 差都归于候选方法。
掌握
②测定步骤
实验标本收集要求：新鲜的正常和异常的临床标本， 应有足够宽的浓度范围，各浓度应有合适的比例。 对样品浓度选择的分配建议，美国NCCLS（美国 临床实验室标准化委员会）方案中有一附表，这 非常实用。
掌握
标准品的分级
1.一级标准 品
是一2种.二稳级标定准而品 均一的物质，它
的数值已由决定性方法确定，
或由高度准确的若干方法确， 所含杂质也已经定量3，.校准且物有证
书。用于校正决定性方法，价
标准品的分及标级校准正品参”考定方值法。以及为“二级
4.控制物
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1.一级标准 品
标准品的分级
2.二级标准品
六.方法决定图（MDC）
七、检测限的评价
1. 可检测的最低分析物浓度为检测系 统的分析灵敏度或称检测限。
分析灵敏度： 具有定性含义的： 检测低限（LLD） 具有定量含义的： 生物检测限（BLD）
功能灵敏度（FS）
2.检测限的不同概念
3.检测限实验
4.结果可接受性评价
与仪器或试剂厂家标示比较
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四、正确度的评价 • 评价方法正确度的常用试验：
1. 方法比较试验 2. 回收试验 3. 干扰试验
掌握
1. 方法比较试验
⑴.概念：方法比较实验或称对比试验，用于 检测候选方法的系统分析误差，包括比例 和恒定两种系统误差。
⑵.步骤：对一组病人的标本用候选方法和对 比方法同时进行分析测定，最后观察两者 之间的差异。
2.参考物的 分级
3.方法选择 原则
实验方法的选择
4.方法选择 步骤
1.实验方法的分级
• IFCC（国际临床化学学会）根据分析 方法的准确度与精密度的不同将实验方 法可以分为三级：
决定性方法 参考方法 常规方法
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决定性方法
决定性方法（definitive method definitive method） ►准确度最高，系统误差最小，经过详细的研 究，没有发现产生误差的原因，测定结果 与“真值”最接近。 ►用于发展及评价参考方法和一级标准品 。 ►美国、法、德、丹麦等少数国家有此类实验。
⑷干扰实验要点
被试验的物质： 可根据该方法的反应原理， 提示出可能的干扰物，一般应考虑的是用 扰物，一般应考虑的是用高胆红素、溶血、 （血红蛋白）、脂浊、防腐剂、抗凝剂等 进行试验。但干扰试验有一定的局限性， 因为人们只能试验某些物质的影响，还有 许多药物和食物成分可能有干扰。
可疑干扰物的浓度：应达到病理标本的最高 浓度值， 在确证有影响后，还应确定使分 析结果影响临床应用价值的最低干扰物质 浓度值。
（3）离群点检查，如每次双份测定的差值超过初步批内精 密度测定时±标准差的5.5倍(可信限99.99%），这对数据 为“离群点” ，应弃去或重做。
（4）统计处理…
3.允许误差可接受性判断
①短期实验不精密度评价：批内或日内的标 准差应小于或等于CLIA`88规定的TEa的1/4。
②长期实验不精密度评价：总的标准差应小 于或等于CLIA`88规定的TEa的1/3。
• 相关系数r可作为候选方法可否接受 的一种指标，但r值随病人标本测定 范围的增加而增大，因此在配对资 料分析中，不应片面地根据相关系 数r来判断两种方法分析结果的符合 程度。
2. 回收试验
⑴回收试验概念：
在常规分析样品中加入纯分析物，测定 值是否与理论值相同的试验。目的是测定 比例系统误差，以衡量候选方法的准确度。
• （一）适用性：
微量快速、方法简便、安全可靠 、成本低廉
• （二）可靠性：
精 密 度：一般应小于5% 正 确 度：一般应小于5% 特 异 性：最好只对待测物特异 检测范围 ：能适合正常和大多数病理标本。
了解
4.方法选择步骤
• 临床提出要求 • 广泛查阅文献 • 确定候选方法 • 进行评价实验......
2.NCCLS重复性实验操作步骤
NCCLS评价方法：用本方案评价可以计算出批内、 批间、 日间和总CV，其中总CV最重要，它代表整个分析体系的 可重复程度。
NCCLS重复性实验操作步骤 （1）初步的批内精密度测定，即一个标本 批内重复测定20
次，计算出均值，标准差和变异系数。
（ 2）用2个标本每天测定2次（2次测定间隔不得少于2小 时），每次测定均作双份，共测定20天。 每次测定至少 做一个质控。
一些标知名准公品司的提分供级的校
准液或称定标液，但必 须具有可溯源性。
3.校准物 4.控制物
掌握
标准品的分级
1.一级标准
控制品 物（质控品）用于2.常二级规标质准品量控制， 用来控制患者标本的测定误差。
质控物不能用于仪器的校准。3.校准物
标准品的分级
4.控制物
掌握
掌握
3.方法选择的原则
• 常规方法的要求 国际临床化学协会（IFCC）提出： 常规方法应具有适用性和可靠性两方面的要求。 实验室应根据条件（仪器设备、技术力量、实验 成本等因素），选择常规分析方法和简便的参考 方法。
这类标准品可由实验室自已配制 或为商品，它的值必须用一级标
准品和参考标方准法品并由的训分练级有素的，
能熟练掌握参考方法的操作者确 定。
主要用于常规方法的标化、为控 制物定值或常规测定的结果计算。
3.校准物 4.控制物
掌握
1.一级标准 品
标准品的分级
2.二级标准品
常规测定用校准品：可 以不是二级标准品，如
3.基本步骤
（1）常用的试验样本： ①混合患者血清； ②在混合患者血清中加入一定量的待测物，以得到高
浓度的线性试验样本，并有适当的样本基质； ③经过特殊处理的混合人血清，处理方法如：透析、
了解
第二节、量值溯源
一、量值溯源的概念： 通过一条具有规定不确定 度的不间断的比较链，使测量结果或标准的值 能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或 国际标准联系起来的特性。
二、量值溯源的目的意义，是让常规标本的检测 结果得到和参考系列相同的测量值。
掌握
三、参考物的量值溯源
熟悉
知道吗？
• IFCC • NCCLS • CLSI • CLIA`88
⑵回收试验方法步骤
将被分析的纯品标准 液加入样品中，成为分 析样品。原样品加入同 量的无分析物的溶液作 基础样品。然后用实验 方法分析，两者测定结 果的差值为回收量。
⑶回收率计算
掌握
⑷回收试验试验要点
1）要准确吸量。 2）分析样品浓度必须在测定方法的分析范围
内。一般需做高中低三个浓度的回收试验， 计算平均回收率。 3）分析样品浓度最好在医学决定水平上。 4）加入标准液的体积在整个样品中要少于等 于10% 。
⑶干扰实验方法
基本与回收试验一样，但是加入的 是疑有干扰或非特异性反应的物质 NCCLS干扰试验方法 ： ①选择混合血清1份，分成2份，1份加入 干扰物，另一份加水，按比例混合成5 个不同干扰物浓度的样品。 ②每份标本重复测定数次，计算分析干扰 加干扰物组均值 - 未加组均值 = 干扰值。 对照这一浓度±1.96 s，可得出某浓度 内有无干扰。 ③进行统计处理。
method）：某些常规方法经有关知名学术组织认可后可 作为推荐方法，应具有足够的实验证据。
掌握
2.标准品的分级
• 标准品：也称参考物或标准物质，是一类 具有一种或多种成分、含量均匀确定的物 质。
• 标准品用以校准仪器设备、评价测量方法 或给其它物质赋值。
• 标准品的含量一般表示为：
标准值±总不确定度
掌握
参考方法
（ 参考方法（reference method reference method） ）
■ 是指准确度与精密度已经充分证实的分析 方法，干扰因素少，系统误差与重复测定 的随机误差相比可以忽略不计，有适当的 灵敏度、特异性、线性及较宽的分析范围。
■ 用于评价常规方法和试剂盒， 为二级标准 品、质控物定值 。
八、可报告范围
可报告范围指可以报告的所有结果的范围
1. 分析测量范围（AMR）：没有进行任何预 处理 （稀释，浓缩等）的样本，由方法仪 器直接 测出的结果范围。
2. 临床可报告范围（CRR）：对临床诊断、 治疗有意义的待测物浓度范围，可以通过 稀释、 浓缩等方法扩大分析测量范围。与 标准曲线制作方法相同。
掌握
⑸回收实验结果可接受性判断
比例系统误差=100% - 平均回收率 将比例系统误差与CLIA规定的TEa（总 误差）进行比较，若小于TEa即可接受。
Hale Waihona Puke 掌握3. 干扰试验⑴.概念：加入一定浓度的干扰物，形成恒定 系统误差，并将其测定出来。
⑵.目的：是用来衡量候选方法的准确度。但 干扰物浓度不同，误差大小也不同。 干扰 作用可有物理作用、化学作用以及非特异 反应等。
检验方法选择与评价
教学要求（大纲）
1.掌握：实验方法与参考物的分级，量值 溯源概念与意义，误差的分类，实验方法 学评价的主要指标。 2.熟悉：实验方法学评价的步骤，各级实 验方法和参考物的特点与用途，参考物的 量值溯源、不确定度。 3.了解：实验方法的选择原则与步骤。
第一节、实验方法的选择
1.实验方法 分级
收集样本数量：至少为 40个标本，每个标本用2种 方法分别作双份测定，因此样本应有足够的量， 如临床标本的量太少可将 2份含量相近的标本混 合，2个小时内测定完。
测定时间间隔：每天测定8个标本，双份测定时第一 次按顺序 1， 2…… 7， 8， 第二次8， 7……2， 1，2个小时内测定完，共测试5天。
进行统计处理：
掌握
③统计处理