粮食脂肪酶活力、脂肪酸及其组成测定
试验方法
脂肪酶活力的测定
参考文献(Aizono et al.，1973)的方法。

准确称取6.00g糙米粉，加入Tris-HCl (pH7.5)定容至25mL，振荡均匀，置于4℃下浸提1 h，然后于4℃下10000 r/min 冷冻离心15min，过滤。

取滤液l.5mL于试管中，依次加入l mL 0.5 mol/L KCl，l mL 5 m mol/L CaCl2，0.5mL Tris-HCl (pH7.5)，然后置于37℃恒温水浴摇床中保温10 min，加入l mL三乙酸甘油酯在37℃恒温水浴摇床中震荡反应l h，沸水浴灭酶10min。

以酚酞-乙醇为指示剂，采用0.05 mol/L NaOH滴定至微红，记录滴定所消耗的体积V。

脂肪酶活力定义为：在上述反应条件下，每分钟消耗0.05 mol/L NaOH 0.01mL为1个酶活力单位U。

酶活力(U) = (V-V0)×l00 / t
其中：V为样品所消耗NaOH的体积(mL)，V0为空白消耗NaOH的体积(mL)，t为反应时间(min)，100为NaOH体积转化为酶活力单位的系数。

数据处理以每克绝干糙米中脂肪酶活力进行分析。

游离脂肪酸含量的测定
参考GB/T15684-1995的方法。

准确称取5.00 g糙米粉于250 mL锥形瓶中，加入40 mL无水乙醇在25 ℃恒温振荡10 min，过滤。

取25 mL滤液用标准KOH-乙醇溶液滴定。

以每100g绝干稻谷消耗的KOH毫克数表示游离脂肪酸的含量。

脂肪酸组成的测定
样品处理：准确称取糙米粉10.00g置于100mL锥形瓶中，加入20mL氯仿-甲醇溶液(体积比为2：l)，用均质机均质20s，然后用5mL氯仿-甲醇溶液洗涤均质
机，洗涤两次，洗涤液并入物料中。

静置l h后过滤到具塞量筒，用20 mL氯仿-甲醇溶液分两次清洗锥形瓶，去掉滤渣。

然后加入10 mL 0.88% NaCl溶液到具塞量筒中，静置过夜。

吸出上层液，读取下层液体积，然后吸取下层液5 mL加入到螺纹小管中，N2吹扫，至螺纹管底部出现黄色小油滴，停止吹扫。

加入2 mL H2SO4-甲醇(质量分数为12%)溶液，旋紧螺纹管管口，置于90℃下水浴2h，然后加入2 mL正己烷，振荡均匀。

制得样品密封冷藏与4℃条件下，准备测定。

测定条件：
气相色谱条件：色谱柱：30m×0.25mm×0.25μm VF-5柱；载气：氦气；柱温：程序升温，40 ℃~250 ℃，升温速率8 ℃/min，恒温5 min；进样口温度280 ℃；不分流进样。

质谱条件：电离方式EI，发射电流150 μA，检测器电压350 V，离子源温度250 ℃，传输线温度250 ℃，电子能量70 eV，扫描范围50~650 (相对原子质量单位) 仪器检测限为0.l mmol/L。

张习军. 微波处理对稻谷品质的影响[D].武汉:华中农业大学硕士学位论文，2008。