---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 胚胎干细胞研究进展-干细胞的研究进展胚胎干细胞研究进展-干细胞的研究进展干细胞的研究进展干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。

近年来干细胞的应用几乎涉及到所有生命科学和生物医学领域。

本文概述了干细胞的生物学特性，并综述了干细胞的可塑性、分离培养及其在基础研究及临床上的应用的研究进展。

最后，展望了今后研究的方向。

干细胞；生物学特性；可塑性；分离培养；应用 Advances in study of stem cells Stem cells are non-specialized cells which have the ability of self-renewal and multiple differentiation potential. The application of stem cells has nearly involved in all the research field on life sciences and biomedicine in recent years. This article summarizes the biological characteristic of stem cells, and reviews the latest progress in the study on stem cells plasticity, isolation, culture in vitro, and its extensive application in basic research and clinical application. The prospects of stem cells are also discussed. stem cells; biological characteristic; plasticity; isolation; culture in vitro; application 干细胞（stem cells）是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细1/ 10胞群体，即这些细胞可以通过细胞分裂维持自身细胞群的大小，同时又可以进一步分化成为各种不同的组织细胞，从而医学界称之为万用细胞。

1981 年英国的 Evans 和 Kaufman 用延缓着床的胚泡首次成功地分离了小鼠胚胎干细胞,从而在全球掀起了有关干细胞的研究热潮。

1997 年 2 月英国苏格兰罗斯林研究所威尔穆特博士等成功克隆出多利绵羊，1998 年 11 月,美国 Thomson［1］和 Gearhart［2］分别用不同的方法获得人胚胎干细胞及胚胎生殖细胞,此后,干细胞的研究便进入了一个全新的时代。

1999 年，有关干细胞的研究被 Science 评为 1999 年度十大科学进展之首。

2019 年 12 月干细胞研究再次被《科学》杂志评为该年度世界十大科学成就之一。

本文就近几年来干细胞的研究进展综述如下。

1 干细胞的生物学特性根据干细胞的发育阶段，可将其分为胚胎干细胞（Embryonic Stem Cell,ES）和成体干细胞（Adult Stem Cell，AS）。

胚胎干细胞即具有分化为机体任何一种组织器官潜能的细胞,包括胚胎干细胞、胚胎生殖细胞（Embryonic Germ Cell，EG）。

成体干细胞即具有自我更新能力,但通常只能分化为相应组织器官组成的专业细胞,它是存在于成熟个体各种组织器官中的干细胞,---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 包括神经干细胞（Neural Stem Ce11，NSC）、血液干细胞（Hematopoietic Stem Cell，HSC）、骨髓间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC）、表皮干细胞（EPidexmis Stem Cell）、肝干细胞（Hepatic Stem Cell）等。

1.1 胚胎干细胞的生物学特性胚胎干细胞最早是直接从小鼠早期胚胎分离建系的,它们具有其自身的生物学特性。

与其他细胞系相比较, 胚胎干细胞的特点在于:（1）具有不断增殖分化的能力，所以，在体外培养条件下可以建立稳定的干细胞系，并保持高度未分化状态和发育潜能性。

1999 年 Soiter 等［3］利用这个特性将 ES/EBs 及其分化细胞作为有关药物的针对筛选系统,进行药物毒性检测实验。

（2）具有高度的发育潜能和分化潜能。

体内外可分化出外、中、内三个胚层的分化细胞，可以诱导分化为成体细胞内各种类型的组织细胞。

胚胎干细胞含有正常二倍染色体，具有种系传递功能,能广泛参与宿主胚胎各组织器官的生长发育,并形成包括生殖系在内的合体后代生殖细胞。

1995 年 Pacacio 等［4］利用骨髓基质细胞或其培养液,将胚胎干细胞在体外诱导分化为造血干细胞。

1997 年 Baker 等［5］在缺乏新霉素(geneticin,g418)的条件下,将 Rosa-geo 基因转染胚胎干细胞后能在体外诱导分化为软骨细胞。

3/ 10同年 Deni 等报告将胚胎干细胞通过悬滴培养可分化出脂肪细胞。

（3）能进行体外培养扩增,还可以对其进行遗传操作选择, 如导入异源基因、报告基因或标志基因，诱导某个基因突变等。

扩增、遗传操作及冻存均不丧失其多能性。

冻存的细胞可在需要时随时解冻,继续培养不失其原有特性。

1.2 成体干细胞的生物学特征干细胞在分化为特化细胞之前常产生一种或几种祖细胞，然后由祖细胞分化产生特化细胞。

与胚胎干细胞相比较，成体干细胞有以下几个特点：(1)成体干细胞体积小，细胞器稀少，RNA 含量较低，在增殖过程中处于相对静止状态，在组织结构中位置相对固定。

(2)成体干细胞数量很少，其基本功能是参与组织更新，创伤修复及维持机体内环境稳定。

研究结果表明，即使在含量丰富的骨髓中，每 10，000～15，000 个骨髓细胞中只有一个造血干细胞［6］，人和动物皮肤中的干细胞含量仅为 7%～8％［7］。

Reynolds 等［8］实验证明成体哺乳动物脑内的神经干细胞数量极少，仅占室下带区中相对静止细胞数的 0.1%～1%。

(3)成体干细胞常处于一个有干细胞细胞基质，对干细胞的增殖和分化起调控作用的各种信号分子的特定微环境或称生物位（nich）中，干细胞是自我复制还是分化为功能细胞取决于所在的微环境和自身的功能状态。

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ (4)成体干细胞没有确定的来源。

有科学家推测，成体干细胞是胚胎发育过程中保存下来的未分化的细胞［6］，这揭示成体干细胞与胚胎干细胞可能会有更多的相似性与同源性。

2 干细胞的可塑性干细胞的可塑性主要是指成体干细胞的可塑性。

人们把成体干细胞具有分化为其他类型组织细胞的能力的这种现象称为干细胞的可塑性（plasticity）［9］，横向分化（transdifferentiation）［10］或转决定（transdetermination）［11］。

1995 年，Pereira 等［12］证明，小鼠骨髓细胞在体外培养后具有向骨、软骨和肺基质转化的能力。

1999 年,Bjornson 等［13］将胚胎和成年小鼠神经干细胞,以及在体外克隆的神经干细胞移植给亚致死剂量照射的小鼠,结果证明神经干细胞可转化为造血细胞。

同年 Jackson 等［14］用 Hoechst333422-lowSP 纯化的小鼠造血干细胞进一步证明它可迁移到肌肉损伤部位,在参与肌肉再生的同时也参与血管的再生。

2019 年 Vescovi 等［15］报道神经干细胞除有向神经元、星形细胞与少突胶质细胞分化能力以外,还可分化为造血细胞谱系。

肝干细胞也是干细胞可塑性的主要可靠证据之一。

5/ 102019 年 Alison 等［16］和 Lagasse 等［17］分别报道 HSC 可在体内分化成肝细胞。

2019 年 Shen 等［18］在骨髓移植的试验中发现,肝脏干细胞能表达供体造血细胞的遗传标志。

这一系列的证据表明干细胞存在可塑性。

然而，近几年来，部分研究学者对干细胞的可塑性提出了不同的看法:(1)细胞自发融合导致可塑性。

英国科学家 2019 年,Ying 等［19］的研究结果表明, 胚胎干细胞在体外与神经或HSC 共同培养时,能自发地发生神经或 HSC 与胚胎干细胞之间的融合,诱导 NSC或 HSC横向分化为胚胎样干细胞,然后展现出胚胎干细胞的表型特征与相应功能。

同年美国科学家 Terada 等［20］用充分的证据证明,骨髓细胞的多向分化是因为与胚胎干细胞融合所致,而不是骨髓细胞直接横向分化的结果。

这两者的研究结果都表明，是由于发生了细胞融合，使所谓的成年组织干细胞具有了可塑性潜能。

(2)成体干细胞的横向分化是成体组织中余存的胚胎原始干细胞所致。

2019 年 Jiang 等［21］的研究结果证实,在成体组织中余存着一种数量稀少的胚胎样原始干细胞,表达胚胎干细胞的标志如 Oct-4、Rex-1 及 SSEA-1,体外培养条件也类似于胚胎干细胞,所谓的成体组织干细胞的可塑性很可能是这些细胞所为。

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ (3)2019 年，在 Science 和 Nature 上连续刊发的几篇文章指出，成体干细胞可塑性可能是实验设计不严谨，判断错误所致，认为所谓的成体干细胞可塑性缺乏科学依据。

3 干细胞的分离培养由于干细胞的数目很少，因此需要在体外对干细胞进行非分化性增殖。

干细胞的分离培养的理论基础是其生物学特征，包括形态和结构特征及其生物学表型。

干细胞的分离培养实验主要是建立在老鼠的实验上，早在二十世纪七八十年代就已从小鼠中分离出胚胎干细胞并在体外进行培养成功。