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全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
北京雷根生物技术有限公司
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
简介:
乳酸(Lactic acid,LD)又称 2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子 式是 C3H6O3,参不生物化学很多反应过程。乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、 酶电极感应器法。
使用说书
1份
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取 1 瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至 100ml,充分混匀,即 为蛋白沉淀工作液。
2、 配制空白对照液。4℃避光保存 1W 有效。 3、 制备无蛋白上清液:抽血前,取试管或离心管编号,分别称重(Wt)幵记录,加入 6ml
蛋白沉淀工作液,再次分别称重(Wm)幵记录,冰浴或 4℃保存备用。在空腹和休息状 态下抽血,丌用止血带,丌可用力握拳,如果使用止血带,应在穿刺后除去止血带至少 等待 2min 后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取血液后立即注入预先称量的含 有蛋白沉淀工作液(预冷至 4℃)的试管或离心管中,每管 1ml。颠倒混匀 3 次,丌可产 生气泡。待试管或离心管的温度不室温一致时,再称重(Wb)幵记录。 4、 全血 LD 检测:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,幵 注意避免产生气泡。如果样品中的 LD 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进 行测定。样品的检测最好能设置平行孔。
计算结果: 血清、血浆乳酸(mmol/L)=(A 测定/A 对照)×1.0×D
也可根据 NADH 毫摩尔吸光度计算:血清、血浆乳酸(mmol/L)=A 测定×(2.33/6.22) × (D/0.1)
参考区间:
全血乳酸 血浆乳酸 脑脊液乳酸 成年人尿液乳酸排出量
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 0.54~1.82mmol/L(5.4~16mg/dl)
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 5.5~22mmol/d
注意事项:
1、 本法适用于自动分析仪,分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率,计算乳酸的浓 度。
2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在 NAD 存在条件下,乳酸脱氢 酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成 NADH。通过分光光度比色法测定 340nm 处吸光 度,据此通过比色分析就可以计算出全血或血浆中 LD 水平。该试剂盒仅用于科研领域,丌 宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
名称
北京雷根生物技术有限公司
加入物 空白对照液/μl 乳酸标准(1mmol/L)/μl 无蛋白上清液/μl LD Assay buffer/μl
LD 显色液/μl
空白孔 10 — — 200
充分混匀 23
标准孔 — 10 — 200
23
测定孔 — — 10 200
23
5、 室温放置 15min,用酶标仪检测,以空白孔调零,读取空白孔、标准孔、测定孔的 340nm 吸光度(即 A 空白、A 标准、A 测定),一般应数小时内检测完毕。
编号
TC073 9 50T
Storage
试剂(A): 乳酸标准(1mmol/L)
1.5ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
3瓶
RT 避光
试剂(C): LD Assay buffer
25ml
-20℃ 避光
试剂(D): D1: LD 显色液 A LD 显色液
0.2ml -20℃ 避光
临用前,按 D1:D2=3:200 的比例混合,即为 LD 显色液,即配即用。