单向流空 气区域、 工作台面 及环境应
限 度 检
域内进行)【10版： 在环境洁净度10000 级下的局部洁净度 100级的单向流空气
得影响供试品 中微生物的检 出
定期进行 监测
查
区域内】
9
非 1.1 总则：
无
菌
产
品
微
如供试品有抗菌活
生
性，应尽可能去除
物
或中和；供试品检
限查时, 若使用了中度和剂或灭活剂，应
编辑版ppt
产
1.2 计数方法：平皿法、薄膜过滤法、最可能数
品
法（MPN法）
微 生 物 限 度
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计数方法适 用性试验：菌种及菌液制备、培养基适用性 检查、计数方法适用性试验
1.4 供试品检查：检验量、供试品检查
检
1.5 结果判断
查
1.6 稀释液、冲洗液及培养基
7
非 1.1 总则：
生
MPN 法用于微生物计数时精确度较差，但对于某些微 生物污染量很小的供试品，MPN 法可能是更适合的方
物
法
限
供试品检查时, 应根据供试品理化特性和微生物限度标
度 检
准等因素选择计数方法，所选的方法必须具备检测充足 样品量的能力，以保证所获得的试验结果能够判断供试 品是否符合规定；所选方法的适用性须经确认
编辑版ppt
无
菌
当本法用于检查 本检查法可
产 品 微
微生物计数 法系用于能
非无菌制剂及其 原、辅料等是否 符合规定的微生 物限度标准时，
采用替代的 微生物检查 法，包括自
生
在有氧条件 应按规定进行检 动检测方法，
物
下生长的嗜 验，包括样品的 但必须证明
限
温细菌和真
取样量和结果的 判断等；除另有
替代方法等
胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基
30～35 ℃ 不超过5天
20～25 ℃ 不超过5天
物
每一试验菌株平行制备2 管或2 个平皿；接种量不大于100cfu ；
检
用性检查 该产品的微生 行适用性试
查
物计数
验
12
非 无
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
菌 产
1.3.1菌液制备及使用
编辑版ppt
品 1.3.2计数培养基适用性检查
微 生 1.3.3计数方法适用性试验
物
限
度
检
查
13
非 无
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
8℃，可在24小时内使用；稳定的黑曲霉孢子悬液可保存在2～
8℃，在验证过的贮存期内使用
非 1.3.2计数培养基适用性检查【15版】
无 菌
需氧菌总 金黄色葡萄球菌 胰酪大豆胨琼脂培养基
数计数
铜绿假单胞菌
或 胰酪大豆胨液体培养基
30～35 ℃ 不超过3天
产 品 微 生
霉菌和酵母 菌总数计数
枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 白色念珠菌 黑曲霉
查
11
非 无
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
菌
产
编辑版ppt
品
供试品微 供试品的微生 若检验程序
微 生 物 限 度
生物计数 中所使用 的培养基 应进行适
物计数方法应 或产品发生
进行方法适用 性试验【10版： 方法验证】，
变化可能影 响检验结果
以确认所采用 时，计数方
的方法适合于 法应重新进
编辑版ppt
课前复习
1
编辑版ppt
问题导入：药品中微生物限度检测现状
受污染的药品中，最 为普遍的是中成药
一些中小型企业 在检验过程中对 药品质量﹑溶出 度等把关严，但 对微生物限度的 控制和检验大都 没有严格的要求
药品质量的好坏直接关系到病人的安危，药品微生物限度检
测是全面控制药品质量的一个重要环节
养基，20～25℃，2～3 天
物
【10版：改良马丁（琼脂）培养基，23~28 ℃ ，24~48h】
限
黑曲霉
沙氏葡萄糖琼脂培养基或马铃薯葡萄糖琼脂
度
〔CMCC(F) 98 003〕
培养基 ，20～25℃，5～7天 ，或直接获得 丰富孢子
检
【10版：改良马丁琼脂斜面培养基，23~28
查
℃ ，5~7天】
菌液制备后若在室温下放置，应在2 小时内使用；若保存在125～
2
编辑版ppt
药品微生物限度检测技术
3
掌握
药品细菌﹑酵母菌及霉 菌的检测方法
理解
药品大肠菌群﹑沙门菌 ﹑金黄色葡萄球菌﹑铜 绿假单胞菌的检测方法
了解
药品微生物限度检测检 验记录的书写方法
教学目的 及要求
重点
药品细菌﹑酵母菌 及霉菌的检测方法
难点
4
编辑版ppt
编辑版ppt
药品微生物检查
无菌检查法 非无菌产品微生物限度检查 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法 非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法 非无菌药品的微生物限度
菌 1.3.1菌液制备及使用
产
品
菌种
编辑版ppt
微 生
试验用菌株的传代次数不得超过5
物
代（从菌种保藏中心获得的干燥菌
限
种为第0代），并采用适宜的菌种保
度 检
藏技术进行保存，以保证试验菌株
查
的生物学特性
14
1.3.1菌液制备及使用
非
试验菌株
试验菌液的制备
无 菌 产
金黄色葡萄球菌 〔CMCC(B) 26 003)〕
度
菌的计数
规定外，本法不 效于药典规
检
适用于活菌制剂 定的检查方
查
的检查
法
8
非 1.1 总则：
无
环境：
菌
编辑版ppt
产
微生物计数试验环
品 微 生 物
境应符合微生物限 度检查的要求 (在不 低于GMP现行版要 求的D级洁净环境、 局部洁净度不低于B 级的单向流空气区
检验全过程必 须严格遵守无 菌操作，防止 再污染，防止 污染的措施不
铜绿假单胞菌 〔CMCC（B)10 104〕
胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨 液体培养基 【10版：营养肉汤或营养琼脂培养基 】
编辑版ppt
品 微
枯草芽孢杆菌 〔CMCC(B) 63 501〕
白色念珠菌
30～35℃，18～24小时
沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培
生
〔CMCC(F) 98 001〕
5
非 无
微生物限度检查法
菌 《中国药典》2015年版修订后将分为三个
产 品
附录：
编辑版ppt
微
1、非无菌产品微生物限度检查：微生
生
物计数法
物 限
2、非无菌产品微生物限度检查：控制
度
菌检查法
检
3、非无菌药品微生物限度标准
查
6
非 无
1.非无菌产品微生物限度检查： ----微生物计数法
菌
1.1 总则：环境、要求
检 查
确认其有效性及对 微生物无毒性
供试液制备时如 果使用了表面活 性剂，应确认其 对微生物无毒性 以及与所使用中 和剂或灭活剂的 相容性
10
编辑版ppt
非 1.2计数方法：
无
菌
平皿法
产
薄膜过滤法
编辑版ppt
品
最可能数法（Most-Probable-NumberMethod，
微
简称MPN 法）