7
Minutes
恒定柱长时；UPLC™的灵敏度提高1.7倍（170%）！
AU
AU
恒定L/dp时；UPLC™的灵敏度提高三倍（300%）！
0.050
0.040
0.030
0.020
0.010
5.0 µm
0.000
0.050
0.040
可看到更多
0.030
0.020
的样品信息
0.010
1.7 µm
0.000
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
0.024
Minutes
0.020
0.016
0.012
使用1.7µm颗粒度的填
0.008 0.004
料增加灵敏度
0.000
1.70 1.80 1.90 2.00 2.10 2.20 2.30 2.40 2.50 2.60 Minutes
8
AU
Ultra Performance LC™
速度、灵敏度与分离度的结合
60% 更快
0.050 0.040
30% 更灵敏
0.030
70% 更高分离度
0.020
0.010
5.0 µm
AU
0.000
0.00
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
12.00
0.050
Minutes
15.00
0.040
如果填料的颗粒继续演变……
12
填料颗粒尺寸的演变
AU
0.040 0.020 0.000
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
Minutes
一分钟以内！
前景： 2.1×100mm色谱柱 1.7µm杂化填料颗粒
可达到15,000psi 通常有每米200,000理论 塔板数的柱效
速度、灵敏度及 分离度的完美结合
13
3.UPLC仪器介绍
检测器：
• 光学及/或质谱检测器 • 可调紫外或光电二极管矩阵 • 为UPLC™专门优化的流动池 • 高速检测
样品管理器：
• 低扩散XYZZ’形式 • 快速进样周期 • 低交叉污染 • 样品盘及/或样品瓶 • 可选样品组织器
色谱柱管理：
• 创新的枢轴转动设计 • 置色谱柱出口直接到检测器
在杂化的碳-硅基质内具有桥式乙烷的1.7µm颗粒
三官能团键合C18配体
16
3.1.2 色谱柱硬件
17
筛板、柱管和连 接件，可在超过 140MPa压力下 装填，保证色谱 柱高柱效和长寿 命。
18
eCord 装置
可记录进样次数、最大反 压及温度 智能芯片自动下载关键参 数到色谱柱历史文件 信息不可删除 含有该色谱柱独特的分析 证书
两元溶剂管理：
• 高压混合 • 两元梯度 • 四溶剂选择 • 在线脱气 • 低扩散设计 • UPLC的耐压能力
14
3.1 超高效液相色谱的C18色谱柱
固定相粒度
直径可达
dpLeabharlann 1.7µm色谱柱长可
达3-5cm
15
3.1.1 色谱柱颗粒化学
改善了高pH稳定性 改善了硅胶的柱效和反压 改善了低pH稳定性
0.030
AU
0.020
0.010
1.7 µm
0.000
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
Minutes
在改进获得信息质量的前提下提高分析速度
9
Ultra Performance LC™
速度、灵敏度与分离度的结合
生产力：每次实验得到更多信息
AU AU
0.012 0.010 0.008 0.006 0.004 0.002 0.000 -0.002
超高效液相色谱
1
目录
1
绪论
2
理论基础
3
仪器介绍
4
应用和展望
2
1.绪论
3
超高效液相色谱的发展
站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的 需求。首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很 短的时间内完成；其次是在生化样品及天然产物样品的分析 中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在 与质谱等检测技术联用时，也提出了更高的要求。
5.00 5.00
HPLC 3.5µm
UPLC™ 1.7µm
对流出时间接近的色谱峰有更好的分离度及更高的灵敏度
10
AAUU
2.理论基础
在高效液相色谱速率理论中， Van Deemter方程式的简 化表达式：
如果仅考虑固定相的粒度 对 的影响，其简化方程式可表 达为：
11
更小的颗粒度……
van Deemter 曲线带来的承诺
0.00
0.012 0.010 0.008 0.006 0.004 0.002 0.000 -0.002
0.00
0.50 0.50
1.00 1.00
1.50 1.50
2.00
2.50 Minutes
3.00
2.00
2.50 Minutes
3.00
3.50 3.50
4.00 4.00
4.50 4.50
因此，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术
角度的改进已经不行，或者说必须从理论高度对液相色谱重
新认识。由此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，
将HPLC的极限作为自己的起点。
4
超高效液相色谱技术的实现，主要是依靠以 下几个方面的进步：
（1）小颗粒、高性能微粒固定相的出现； （2）超高压输液泵的使用； （3）高速采样速度的灵敏检测器； （4）使用低扩散、低交叉污染自动进样器， 配备了针内进样探头和压力辅助进样技术； （5）仪器整体系统优化设计：色谱工作站配 备了多种软件平台，实现超高效液相分析方法与 高效液相分析方法的自动转换。
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
4.00
4.50
5.00
5.50
6.00
UPLC™
0.20
样品的组份数：5
1.7µm颗粒度
完全分离的时间：0.60分钟
0.10
增加了样品 的通量
0.00
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60
5
超高 效液 相色 谱的 优点
分析速度快 灵敏度高
分离度好
6
UPLC的速度提高了！
AU AU
1. z0n.oelz0nue4een6ne-e-0-.01.08.1203878 5. hexylbenzene - 0.360
1. Thiourea - 0.430 2. toluene - 1.034
3. propylbenzene - 1.742 4. butylbenzene - 2.413 5. hexylbenzene - 5.058
0.24
UPLC™
0.20
0.16
0.12
HPLC
样品的组份数：5 5µm颗粒度 完全分离时间：6.00分钟
0.08
0.04
0.00
0.00
0.50
1.00