酶标仪软件操作步骤
一、软件运行前得连接
酶标仪插上电源,与电脑连接好后,打开电脑与酶标仪开关,酶标仪至少稳定15min后开始读数,效果比较好。
注意,当酶标仪处于poweron 得状态时,不要手动打开酶标板室与比色皿室得门,以免紫外辐射得伤害或者仪器得损伤。
二、软件得运行
1、打开桌面快捷方式SkanItREfor MSS 2.4.2运行软件,出现L og on To SkanIt software得界面。
2、use name默认为“admin”,password为空
3、点OK进入SkanItsoftware 2.4.2界面,New session-新建任务程序,Open session-打开已有程序。
4、在界面上方得setting中选择Instrument,出现Instrument setting 得界面,在Instrument中选中Multiskan spectrum on Ⅰ,ThemoElectron。
点击右侧得setup,在serialnumber中输入1500-850,然后点击OK。
再点击Default instrument右边得connect,即可设定好连接。
然后点击close关闭窗口。
三.New session操作
1.新建任务程序:
→点击new session进入protocoloptions界面,在session nam e中输入新得程序名称
→点击next进入plate layout options界面,在select plate templat e中选择所需模板类型(一般96孔板选择usedefault,比色皿选择cuvette,其她得可以选择相应得类型)
→输入plate layoutname(系统默认得与session name相同)
→点击next进入Definition done界面,在select location中选择任务程序所要保存得目得文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作) →点击finish完成新建,进入SkanItsoftware 2.4.2程序操作主界面(主要有三大块: platelayout用于模板区域选择,protocol用于程序编辑,results用于数据处理)。
2、plate layout对模板区域进行选取
→点击wizard进入选取模板区域操作界面fill wizard(任务类型type有: blank空白,calibrator标准蛋白,control对照,empty空白,unkown一般为样品)。
→在右边模板中选取开始点位置,即红圆点所在位置。
→选取方向,在Filling order中可通过箭头设定。
→对于blank,在No、of replicates中填写好重复数,选择好开始位点与方向,点击Add可完成。
→对于calibrator,在No、of calibrators 中填写标准蛋白得个数,在No、of replicates中填写好重复数,选择好开始位点与方向。
如有浓度梯度,可选择Generate series进行设置。
例如,取7个浓度蛋白做标准曲线,稀释倍数分别为20,40,80,160,320,640,1320,每个浓度重复两次,则在No、of calibrators中填写7,在No、of replicates中填写2,选择好开始位点与方向。
然后选中Generate series,出现conventions得界面,在Initialvalue中填写20,在operators中选择Multiply,step by中填写2,点击ok。
→对于control,操作基本与calibrators相似。
→对于Empty操作基本与blank相似。
→对于unknown,填写好No、of replicates,No、of unknowns并选择好开始位点与方向,点击Add即可完成。
→第一块板填满后,有时会自动进入第二块板得编辑,注意瞧Fill wizard得模板下方得current plate,如果显示为2/2,则可以直接关掉窗口,模板区域即可编好。
标注:对于单一型任务可先选取全模板【即在No、of unkown选项中设为模板最大孔数】,然后对不要得区域进行删除。
对于非blank与empty型任务,若有浓度差,可勾选generateseries,然后进行设定:series为有规则得浓度差,multiplevalues为不规则得浓度差。
有规则得可通过运算公式,系统直接算出,无规则得通过键盘输入,点击add进行添加。
3、编辑程序
→选好所用模板区域后,点击protocol进入程序编辑界面。
→在protocolproperties所属框内得execution order选项中选中数据读取路径(共有四种,第一种一般为常用路径,一次读四个孔)。
→在Settle delay选项中设定读数时间间隔。
一般比色皿不需要读书时间间隔,设置为零即可,对于测量板而言,由于板在移动过程中液体表面共振波得影响,需要稳定一段时间,一般设置为5s in a6-well plate,300ms in a 96-well plate,<20ms in a 384-well plate。
→在steps所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单。
→在子菜单中选取您所要运行得程序(如常用得程序有photometric,photometric-scanning,Incubate与shake等),并在该程序得选项中设定您所需得参数。
一般测蛋白含量选择photometric,在wavelength中设置好波长即可。
→所有程序编写好后,在session中点击save保存好模板程序,不保存将无法运行上面所设得模板程序。
4.测读数据
→在Execution所属框内点击connect链接机器,链接过程中会出现机器状态列表窗口,无异常后点Close关闭。
→在Execution所属框内点击runplateout弹出酶标板载板,把酶标板底部擦干后放上去后,确保平稳后点击run plate in,等酶标板进去。
→在Execution所属框内点击Execute session按钮运行所设程序,弹出Run name窗口,点击Ok确认运行。
接着会出现读数窗口,不要关闭读数窗口,读数完毕后窗口会自动消失,并弹出酶标板载板。
注:以前,无法进行人工读板,这就是因为机器序列号得设置不对,要仔细查瞧机器上得机器序列号,将正确得序列号填入操作软件中得设置中。
5.数据分析及保存
→仪器读数完毕后,系统自动进入Results操作界面,在Result界面所属框中,可对所得数据进行分析。
→在Result所属框中,单击要分析数据得程序,如测蛋白一般选择得photom
etric,点鼠标右键得到数据分析方法主菜单。
→选择要分析得方法,测蛋白选择Quantitative Curve Fit,出现Parameters,Graph,Table,List可以点击查瞧结果。
→如果需要标准曲线,则在Graph得曲线图中单击右键选择Toolbar,图标上方会出现一系列图标,点击Copy to clipboard选择As a Bitmap,将其粘贴在新建word文档中并保存。
→点击Result左侧图标框中选择Export,在Parameters中得select items to report中选择要保存得内容,一般选择layout,Photometric,QuantitativeCurve Fit,然后点击Add,在;右边得Report items中出现所选择得内容。
→在After execution中选中Savetofile,通过右下方得Browse 选择要保存得文件。
注意此次操作可能没有保存到目得文件夹。
必须进行以下步骤。
→点击上方得Report可瞧见结果,点击Save选择所要保存到得目得文件夹。
并检查就是否所有要保存得数据都已经保存到相应文件夹中。
四、Open session操作
若要运行或查瞧已有得程序,在登录界面点击Open session,打开程序所在文件夹,单击所要运行或查瞧得程序(提示:在该界面中,点NewFolder可新建文件夹,Rename可对已有文件夹重命名,delete可对程序及文件夹进行删除),点O pen打开。
然后可进行所需操作。
五、仪器得断开与关闭
在读数完成后若要关闭仪器,应先在Execution所属框内点击Run plate in,待酶标板载板进去后,点击disconnect断开仪器,然后再关闭仪器开关,盖好外罩。