洁净服洗涤灭菌效果
验证方案
验证立项申请表
验证立项审批表
验证方案审批
1 引言1.1 概述
本公司洁净区划分为D级及C级，洁净服按其区域及用途使用不同颜色进行了区分，D级区及质量部生测区的洁净服统一在D级区域进行清洗灭菌。

洁净服清洗灭菌的效果直接会对洁净区的净化造成影响, 因此必须对其清洗灭菌的操作程序进行验证，确认其效果。

产品生产线，为防止上批产品对下批产我公司非无菌原料药车间为专业生产硝酸硫胺、VB
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生污染或混淆，这对清洁工作提出了一定的要求，为了确定洁净服清洗过程中使用的清洁方法的有效性，进行此项验证。

本验证和工艺验证同时进行，每批工艺验证后的洁净服清洁后，进行此项验证。

1.2 验证产品及批次：硝酸硫胺，批号：TH201212001、TH201212002、TH201212003，连续进行3次试验。

1.3 验证目的
非无菌原料药车间D级洁净区洁净服在使用后，按照经批准的清洁方法操作后，能够达到清洁要求，生产时，操作人员穿着清洁后的洁净服生产产品时，没有来自上批产品所带来污染的风险。

验证过程应严格按照本方案规定的容进行，若因特殊原因需变更时，应填写验证方案变更
申请及批准书，报批准。

1.4 验证围
本方案适用于洁净工作服洗涤效果的验证。

2 验证条件
验证实施前，洁净区环境应符合要求，D级洁净服已按照规定的方法清洁完成，涉及到
的文件、记录草案均起草完成，参与验证的所有人员均已培训并考核合格。

3 验证进度
验证实施小组提出完整的进度计划，经验证委员会批准后实施。

清洁验证第一批: 年月日
清洁验证第二批：年月日
清洁验证第三批：年月日
4 验证容
4.1 验证用文件的确认
4.1.1 验证实施前，检查确认验证所需使用的规、标准及操作规程齐全，将确认结果记录在《文件资料确认记录》中。

详见附件1。

4.1.2 合格标准：验证所需使用的规、标准及操作规程齐全，满足验证需要和GMP的要求。

4.2 验证用培养基的确认
验证实施前，检查确认验证使用的营养琼脂培养基的适用性检查是否符合规定；将确认结果记录在《培养基检查确认记录》中。

合格标准：验证使用的培养基经适用性检查，结果符合规定。

详细确认记录见附件2。

4.3 可接受标准
4.3.1 清洁度：目测在不低于300勒克斯照明下目测检查已清洗消毒的洁净服，应无可见污迹及药物残留物。

4.3.2 微生物限度（菌落数）：＜50cfu/棉签。

4.4 清洗消毒
4.4.1 按《洁净区工作服清洗灭菌、发放标准操作规程》对洁净服进行清洗消毒，取样。

4.4.2 清洁剂：雕牌洗衣液。

4.4.3 消毒，用紫外灯进行消毒。

清洗消毒及取样详见附件3。

4.5 检测程序 4.5.1 目测检验
QA 检查员首先检查清洗消毒后的洁净工作服，要求洁净光亮，无可见的析出物等脏污，然后用纯化水浸润的灭菌棉签4个，分别对洁净服袖口、拉链两旁的外表面进行擦拭（如图1），每个棉签擦拭面积为25cm 2。

QA 检查员检查棉球擦拭后的表面，要求棉签表面洁净，无可见的污迹。

如果达不到以上要求，洗衣工必须继续进行清洗，直到符合要求。

25cm 2取样区域
25cm 2取样区域
图1-洁净服棉签擦拭取样示意图
棉签擦拭取样示意图：
洁净工作服表面洁净度检查记录见附件4。

4.5.2 微生物检验
4.5.2.1 微生物检验由质量部QA 人员在洁净服清洁（消毒）目视合格后，用纯化水浸润的4个灭菌棉签分别擦拭已清洁（消毒）的洁净服袖口和拉链两旁的外表面，每个棉签擦拭面积为25 cm 2，共取100 cm 2 ，将取样后4个棉签放于无菌生理盐水20ml 中，充分振摇
后，取洗涤水进行微生物限度检查，用琼脂培养基，倒入培养皿中。

取棉签洗涤水0.1ml 均匀涂布在每个培养皿的培养基上，各接种10个培养皿，30－35℃培养3天，观察菌落数。

将每个培养皿菌落总数相加，每个棉签菌落数＝(菌落数总和×总体积)／4，另外，应用经过灭菌的生理盐水或缓冲液，润湿的灭菌脱脂棉签作空白对照。

棉签擦拭取样示意图：
洁净服表面微生物限度检验记录见附件5。

4.6 清洗效期的确定
4.6.1 为有效防止污染，在清洗验证过程中初步设定检查时间：清洗后当天、清洗后第1天、清洗后第2天、清洗后第3天、清洗后第4天，确定安全有效的清洁效期。

QA 检查员分别进行以下取样:用灭菌棉签分别平稳而缓慢地擦拭洁净服袖口和拉链两旁的外表面，分别共擦拭100cm 2，擦拭完毕后将棉签放入盛有20ml 无菌生理盐水的已灭菌的具塞玻璃瓶，用于微生物限度检查。

清洗后洁净工作服表面微生物限度检查记录见附件6。

4.7 偏差管理
对于验证方案执行过程中，任何与方案容不符的项目均应记录，针对项目对洁净工作服洗涤效果验证影响程度，组织相关人员进行偏差调查，并根据调查结果做出继续或终止方案执行的决定。

偏差应根据调查结论采取纠偏行动，经评估合格后，方案才能继续执行。

5 结论与评价
得出洁净工作服洗涤效果的最终结论，并对洁净工作服洗涤效果验证进行总的评价。

6 再验证
再验证周期：验证小组负责依据洁净工作服洗涤效果验证的情况，拟订洁净工作服洗涤效果验证再验证周期，报验证委员会审批。

7 会审及批准
会审：
批准：
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操作人/日期：复核人/日期：
附件2 培养基检查确认记录验证记录样
操作人/日期：复核人/日期：
附件3
清洗消毒过程及取样记录验证记录样
附件4 洁净工作服表面洁净度检查记录验证记录样
操作人/日期：复核人/日期：
注：空白对照的细菌数应为零。

微生物应≤50cfu/棉签。

操作人/日期：复核人/日期：
附件6 洁净服表面微生物限度检验记录验证记录样
注：空白对照的细菌数应为零。

微生物应≤50cfu/棉签。

操作人/日期：复核人/日期：。