病毒中和试验测定法
1.固定病毒稀释血清法(α法) 本法用于抗血清的中和价。

试验需先滴定病毒
毒价，试验时将其稀释成每一单位剂量含200个TCID
50
，再将待检血清倍比稀释
加等量200个TCID
50
/ml的病毒液，混匀后37℃1h，每一稀释度接种24孔细胞
培养板4孔，每孔。

5%C0
2
培养箱培养一定时间后，记录出现CPE孔数，以不出现CPE数和接种数的比为中和比值。

按Karber法计算中和价。

其公式如下：
Log TCID
50
=L+d（）
（TCID50用对数计算，L为病毒最低稀释度的对数。

d为组距，即稀释系数，在10倍系列稀释则为-1，S为各组CPE与接种数比值之和）
50%中和试验举例
每一接种剂量含病毒 100TCID50或 100LD50或100EID50或100ID50
L=-1，d=，S=4/4+4/4+4/4+4/4+2/4=
代入Karber公式：LogND
50= -1－* 该抗血清ND
50
(半数中和单位)为，即1/160，
则其中和价为160 ND
50
/ml，可以简写成160。

2.固定血清稀释病毒法(β法) 本法用于测定抗血清的中和指数。

将病毒原液10倍系列稀释，分列于2排无菌管，第一排加等量正常血清（对照组）；第二排加待检血清（中和组），混匀后，置37℃1h，分别接种细胞板孔（或鸡胚、实验
动物）进行培养，记录CPE（鸡胚、动物死亡数），计算TCID
50（或LD
50
），按下
式计算中和指数。

中和组TCID
50（或LD
50
）
中和指数= ————————————
对照组TCID
50（或LD
50
）
查反对数，即得该待检血清的中和指数。

通常中和指数>50者判为阳性，
10-49为可疑，<10者为阴性。

例如：
对照组滴度的LD
=
50
=
中和组滴度的LD
50
中和指数=10 中和指数的对数Log=Log100=
一般来说，以10倍稀释进行滴度测定，Log10=1。

因此小于10（1<Log）则认为中和指数无意义，10-50之间的值（）则为可疑，超过50((Log>则是有意义的.。