毕业论文题目: 对厚朴有效成分的提取方法的比较目录摘要 (3)关键词 (3)1前言 (4)1.1厚朴简介 (4)1.2有效成分 (5)1.3概述 (6)2 实验操作部分 (6)2.1超声波提取法 (6)2.2乙醇提取法 (8)2.3碱提酸沉法 (11)3 分析与讨论 (12)4 参考文献 (14)5 综述 (15)对厚朴有效成分的提取方法的比较摘要：厚朴主要化学成分有木脂素酚类（厚朴酚与和厚朴酚等）、挥发油类成分（β-桉叶醇、单萜、倍半萜及其含氧衍生物）、生物碱类（木兰箭毒碱等）这三大类。
而且据中国药典记载，目前对中药厚朴质量评价的主要指标成分是厚朴酚及和厚朴酚两者的含量；故在本次实验中将着重对厚朴酚与和厚朴酚两个成分进行一定程度的研究。
并在多种方法中选取了其中三种提取方法，来完成此次有效成分提取的探究。
药典中明确规定，其两者含量的总和不得少于2.0%。
关键词：厚朴;厚朴酚;和厚朴酚;提取分离ABSTRACT:The main chemical constituents of Magnolia officinalis with phenolic lignan (magnolol and honokiol etc.), volatile oil composition (beta eudesmol, monoterpenes, sesquiterpenes and oxygenated derivatives), alkaloids (magnocurarine etc.) these three categories. And according to the Chinese Pharmacopoeia records, currently main component index evaluation on the quality of Magnolia officinalis is content of magnolol and Hou Pufen both; so in this study will focus on a certain degree of magnolol and honokiol in two components. And we choose three methods to extract the effective components. The Pharmacopoeia clearly states that the sum of their contents shall not be less than 2%.KEY WORDS: Cortex Magnoliae officinalis;Magnolol;Honokiol;Extraction separation1.前言1.1厚朴简介我国传统的珍贵中药材厚朴[1](Cortex Magnoliae officinalis)是一种常用中药。
最初记载于《神农本草经》，中品。
厚朴来自于木兰科木兰属植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)或凹叶厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils. var. biloba Rehd.et Wils.)的干燥干皮、根皮和枝皮；现在以栽培为主。
因其主产于四川、湖南、湖北一代，故又名川朴、紫油厚朴；另外，主产于浙江（在温州集散）、福建等省的厚朴又称为温朴。
每年4~6月剥取生长了十五年的树干皮。
直接阴干根皮和枝皮，而干皮是在沸水中微煮后，再于阴湿处“发汗”，等到其内表面变成棕褐色或红褐色时，再蒸软，卷成筒状，干燥[2]。
干皮外形呈卷筒状，也有双卷筒状。
“筒朴”长约三十厘米左右，厚0.2-0.7厘米；“靴筒朴”近根部的干皮形状像喇叭口，长二十厘米左右，厚0.3-0.8厘米。
外表面颜色呈灰棕色或灰褐色，手摸有粗糙感，有的厚朴外表面呈鳞片状，比较容易剥落，椭圆形皮孔和纵皱纹明显，刮去粗皮者显黄棕色。
内表面的颜色呈紫棕色，手摸较平滑，细密纵纹，在厚朴划一道痕迹会出现油痕。
质地坚硬，不易折断，断面颗粒性，外层灰棕色，内层紫褐色或棕色，有油性，有的可见多处小亮星。
气香，味辛辣、微苦。
根皮即根朴，呈单筒状或不规则片状；有像鸡肠一样弯曲，习称“鸡肠朴”。
质地坚硬，但较易折断，断面呈纤维性。
枝皮即枝朴，呈单筒状，长十到二十厘米，厚0.1-0.2厘米。
质地较脆，比较容易折断，断面纤维性。
1.2.有效成分厚朴有三类主要的化学成分:酚类、挥发油类、生物碱类；还含有少量的木兰毒碱、厚朴碱及鞣质等[3]化合物。
（1）酚类成分酚类物质是厚朴中的主要化学成分。
厚朴酚与和厚朴酚是厚朴中发挥药效的最主要成分，含量约在5%左右。
厚朴的树皮，根皮是其主要来源，另外少部分也来自于叶中。
厚朴酚于和厚朴酚的化学结构极为相似，为同分异构体，仅一个羟基的结构不同。
（2）挥发油类厚朴中含有的挥发油成分，其含量一般大约为1%。
在不同药用部位的挥发油成分没有明显差异，但含量却有不同。
张强等[4]采用毛细管气相色谱-质谱联用方法对中药厚朴不同部位中挥发油成分进行了初步研究。
结果表明，挥发油主要成分含有桉叶油醇及其异构体，占有其总量大约在40%～55%左右；其次是聚伞花素，大约占其总量的10%～20%左右。
另外，α-蒎烯、莰烯、D-柠檬烯、桉叶油素、(士)-芳樟醇、樟脑、龙脑、α-萜品醇(松油醇)、佳味酚等含量较高(含量大于1%)，除此之外还含有香芹醇、香芹酮、丁香酚、甲基丁香酚、乙酸肉桂酯、十四烷酸、薄荷酮、油酸、十六烷酸和9,12-十八碳二烯醛等化合物。
（3）生物碱王洪燕[5]等利用强酸型阳离子交换树脂法提取总生物碱，并经过硅胶柱层析和离心薄层层析法分离、纯化单体化合物。
结果发现有11种异喹啉类生物碱，分别是：鹅掌楸碱(liriodenine)、罗默碱(roemerine)、瑞枯灵(reticuline)、番荔枝碱(anonaine)、N-降荷叶碱(N-nornuciferine)、降南天竹碱(nornantenine)异萨苏林(isosalsoline)、N-甲基异萨苏林(N-methylisosalsoline)、阿西米洛宾(asimilobine)。
其中有8种化合物为阿朴菲类异喹啉生物碱，2种是简单异喹啉生物碱，1种为简单苄基异喹啉生物碱。
此外还含有少量木兰箭毒碱，氧化黄心树宁碱等。
另外有不少研究结果表明，植物内所含有的生物碱含量会随着树龄的增加而逐渐减少；对于同一厚朴树株，其根皮生物碱的含量最高，而干皮最低；“发汗”会让其干皮生物碱含量进一步减少[6]。
1.3概述厚朴是一种成分复杂的中药材，它既是一味独立的中草药，又可以经过提取加工做成多种中成药。
但其中所含的厚朴酚、和厚朴酚是主要的药效成分，所以对中药厚朴药理药效的研究大都是集中在这两个组分。
在实际生产中，对中药材厚朴的有效成分的提取分离以及纯化，都是有着很严格的操作要求，以及对实验仪器设备的需求也是较高的。
厚朴在实际临床上的药理作用主要是抗菌[7]、抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化活性[8]；当然在心血管、中枢神经[9]等方面也有一定的药理作用。
2.实验操作部分三种提取方法2.1超声波提取法2.1.1仪器与试药DL-360A型超声波清洗器（厦门中村光学仪器厂）；RE-300A型旋转蒸发仪（湖南湖南弘林科学仪器有限公司）；LC-20型高效液相色谱仪（济南前程分析仪器有限公司）、SPD-10Tvp型紫外检测器、循环水式真空泵（郑州探索者实验室设备有限公司）。
厚朴酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110732-200414）；和厚朴酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0735-9209）；厚朴饮片（广州致信药业有限公司，批号：150910）；柱层析用聚酰胺（上海今瑞化工产品有限公司）；甲醇作为色谱纯，分析纯有氢氧化钠（NaOH）、乙醇、苯、盐酸、苯等。
2.1.2实验步骤①用称量纸称取药材粗粉100 g，采用95％乙醇溶液超声提取3次，每次30min，体积均为8倍量；②每次提取好即进行过滤提取液操作，三次后合并滤液；③再进行乙醇回收操作，得到总浸膏；④随后用稀盐酸（PH=2）溶解总浸膏，产生褐色酸不溶物，收集此褐色不溶物，烘干，备用。
2.1.3实验结果样品含量测定色谱条件流动相:甲醇-0.5％磷酸（70∶30）；流速：1.0mL/min；柱温：20℃；（250mm×4.6mm，进样量：20μL；检测波长：294nm；色谱柱：Spherisob ODS C185μm）；。
其高效液相色谱图如图1所示。
对照品溶液的制备精密称取厚朴酚对照品104.0 mg、和厚朴酚对照品102.0 mg，分别用甲醇溶解并且定容至100.0 mL。
供试品溶液的制备称取褐色不溶物0.95 g，用甲醇溶液溶解并定容到100.0 mL。
样品含量测定按照上述色谱条件，采用外标一点法测定各样品含量。
得到结果为，每100 g原药材中，浸膏得率为15％，厚朴酚、和厚朴酚、总酚含量分别为1.25％、0.68％、1.93％。
At/min0 4 8 12 16 20Bt/min0 4 8 12 16 20Ct/min0 4 8 12 16 20图1-HPLC图谱分别为A.和厚朴酚B.厚朴酚C.总物质2.2乙醇提取法2.2.1仪器与试剂圆底烧瓶1000ml、球形冷凝管、称量纸、天平、烧杯150ml、布氏漏斗、滤纸、抽滤瓶、SHZ-DⅢ型循环水真空泵（郑州探索者实验室设备有限公司）、BDJK/1KW 电炉（深圳市博大精科技实业有限公司）65%乙醇溶液、厚朴粗粉（中药材市场购买）、5% NaOH溶液、10%盐酸、环己烷2.2.2实验步骤（1）提取①往圆底烧瓶中加入65%的乙醇溶液500ml，再用称量纸称取厚朴粗粉100g倒入其中，并搭好回流提取装置，回流提取1小时；②此时进行第一次过滤，滤液置于洁净烧杯；③药渣再加入65%的乙醇（体积同第一次提取）进行第二次回流提取1小时；④之后进行第二次过滤，并合并2次的滤液；⑤再将滤液进行乙醇回收操作，得稠膏。
（2）纯化①将上述稠膏分多次缓慢加入5%NaOH溶液，边加边搅拌，大约加入200ml的5%NaOH溶液；②静置一段时间后过滤，得到澄明溶液；③用滴管向其中滴加10%盐酸调节至PH3-4（与标准比色卡对比），放置；④过滤得沉淀，再用环己烷进行重结晶，得到总酚结晶（主要是厚朴酚与和厚朴酚）。
（3）分离①聚酰胺柱的准备聚酰胺粉（30-60目）20g用水搅匀，超声5分钟进行脱气泡，装柱，要求保持聚酰胺柱上端平整，水平垂直。
②上样称取总酚0.5g，置于蒸发皿中，加入5ml无水乙醇溶解，另外加入聚酰胺2g，搅拌均匀，并于水浴上缓慢蒸出溶剂，然后将附有样品的聚酰胺装入色谱柱的上端，并盖有一层厚度约1cm的聚酰胺。