28
红外光谱（IR） 红外光谱（IR）
分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测 得的吸收图谱，称为红外光谱。 得的吸收图谱，称为红外光谱。
4000
3600
3000
1500
1000
625cm-1
特征频率区 特征官能团的鉴别
指纹区
29 化合物真伪的鉴别
羟基（酚羟基、醇羟基） 羟基（酚羟基、醇羟基） 3600~3200 cm-1 游离羟基 ~3600 cm-1 氢键缔合羟基 3400~3200 cm-1 羰基 1600~1800 cm-1 酮 ~1710 cm-1 酯1710~1735 cm-1 芳环 1600、1580、1500cm-1 、 、 有2~3个峰 个峰 双键 1620~1680 cm-1
第二章
中药化学成分提取分离方法
1
一、中药化学成分的提取
(一)溶剂提取法 依据：化学成分的溶解性（极性） 依据：化学成分的溶解性（极性） 关键： 关键：提取溶剂的选择 溶剂的选择原则：相似相溶的原则， 溶剂的选择原则：相似相溶的原则， 价廉、易得、无毒、安全等。 价廉、易得、无毒、安全等。 提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、 提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、 回流提取法、连续回流提取法。 回流提取法、连续回流提取法。
溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发， 丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发， 不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 常用于分离、精制。 常用于分离、精制。
6
亲脂性有机溶剂
对化合物溶解选择性较强 水溶性杂质少、 水溶性杂质少、易纯化 挥发性大、 挥发性大、易燃烧 有毒、价格昂贵， 有毒、价格昂贵， 对提取设备要求高 穿透力较弱， 穿透力较弱，提取时间长 作为提取溶剂不常用 。
9
具有液体和气体的双重特性， 特点：具有液体和气体的双重特性， 如：密度与液体近似 黏度与气体近似 扩散系数是液体 100倍 的100倍 对很多物质有很强 的溶解能力
中药提取常用的超临界流体 ：二氧化碳
10
优点： 优点：
1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 热敏成 临界温度 分稳定. 分稳定. 2.临界压力（ MPa）不高, 易操作. 2.临界压力（Pc=7.37 MPa）不高, 易操作. 临界压力 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 本身呈惰性 4.价格便宜. 4.价格便宜. 价格便宜
Pa） 压 力（Pa）
> 20.2 ×105
分离规模
1mg左右 1mg左右 > 5mg > 100mg 10mg～ 10mg～1g > 10mg
23
葡聚糖凝胶色谱
类 型 原 理 溶胀溶剂 葡聚糖凝胶 分子筛 水 （大→小） 应 用 多糖、多肽、 多糖、多肽、 蛋白质分离
羟丙基 分子筛 水、极性 适于不同类型 糖苷） 葡聚糖凝胶 （糖苷） 有机溶剂 吸附原理 或二者的混合溶剂 苷元） （苷元） 化合物分离
12
二．中药化学成分分离与精制方法
分离依据 分 配 系 数 （ ） 差 异 分离方法 分离原理或特点
二相萃取法 逆流分溶法（CCD） 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱法（DCCC） 液滴逆流色谱法（DCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 液 液分 色谱 相色谱 恪液相色谱法 相色谱 速色谱 恪液相色谱（ C） 恪液相色谱（ C） 中恪液相色谱（ C） 中恪液相色谱（ C） 高恪 液相色谱法（H C） 液相色谱法（ C）
两个化合物完全相同的条件 1、 特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致 、
1H-NMR（核磁共振氢谱）: （核磁共振氢谱） 信息参数：化学位移（ ）、峰面积、 ）、峰面积 信息参数：化学位移（δ）、峰面积、峰裂分 （s 、d、t、q、m）及偶合常数（） 、 、 、 ）及偶合常数（ ）
30
（1）化学位移（δppm）: 化学位移（δppm） 1H核所处的化学环境 1H核周围的 核所处的化学环境（ 与1H核所处的化学环境（1H核周围的 电子云密度） 电子云密度）有关 电子云密度大，处于高场，δ值小 电子云密度大，处于高场， 电子云密度小，处于高场， 电子云密度小，处于高场，δ值大
2
常用提取溶剂性能特点
提取溶剂 性能特点 强极性溶剂 溶解范围广 水 穿透能力强 易得、安全 易得、 适宜提取成分 生物碱盐 苷类 糅质 糖类 氨基酸 蛋白质 提取方法
煎煮法 渗漉法
3
有些苷类成分的酶解 有些脂溶性成分溶解不完全 水提液易发霉、 水提液易发霉、变质 水溶性杂质多， 水溶性杂质多，过滤困难 沸点高， 沸点高，浓缩困难
31
~0.9-C-CH3
氧化铝 活性炭
吸附原理 吸附原理
非极性吸附剂 从稀水溶液中富集微量物质 脱色（脂溶性色素） 吸附规律与上相反 脱色（脂溶性色素）
19
聚酰胺
酚羟基数目多， 氢键吸附 酚羟基数目多，吸附力强 能形成分子内氢键者， 能形成分子内氢键者，吸附力下降 黄酮、蒽醌的芳香化程度高 黄酮、 吸附力增强 水洗脱力弱
4
亲水性有机溶剂
（和水可任意混溶） 和水可任意混溶） 溶解范围广 水溶性杂质溶出少 乙醇 可抑制酶的活性 提取液不易发霉、变质 提取液不易发霉、 大部分可回收利用 但有挥发性、易燃烧 但有挥发性、 除多糖、 除多糖、 蛋白质外 大多数 化学成分 均可溶解 渗滤法 浸渍法 回流法 连续回流法
5
甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒 溶解特点与乙醇相似，
碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌） 碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附 酸性硅胶对生物碱的吸附 氢键吸附） 聚酰胺 （氢键吸附） 大孔吸附树脂 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 原理（ 的） 原理（ 孔性 的性 的）
16
分 子 大 小 差 别
透析法 (半透膜膜孔的 分子筛作用) 分子筛作用) 凝胶滤过法 (三维网状 结构的分子筛作用) 结构的分子筛作用) 超滤法 (分子大小不 同引起的扩散速度的 ) 超速离 法 ( 质 超速离 作用 的 )
26
（二）四大光谱在结构测定中的应用
可见光谱（ VIS） 紫外 — 可见光谱（UV -VIS）—— 共轭 体系特征 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 π*、 n-π*、π-π* 跃迁可因吸收紫外光及 可见光所引起， 可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫 外区和可见区（200～700nm） 外区和可见区（200～700nm）
24
离子交换吸附树脂
树脂类型
阳离子交换树脂
原理
离子交换
应 用
从酸水溶液中吸附碱性 成分（生物碱） 成分（生物碱） 除去酸性、 除去酸性、中性成分 从碱水溶液中吸附酸性 成分（有机酸） 成分（有机酸） 除去碱性、 除去碱性、中性成分
强酸性（ 强酸性（R-SO3-H+） 阳离子 ） 弱酸性（-COO-H+） 弱酸性（ ） 阴离子交换树脂 离子交换
90～ 脱脂、 90～120℃ 脱脂、脱色
8
适用于挥发性成分（ （二）水蒸气蒸馏法 适用于挥发性成分（主要 是挥发油） 是挥发油）的提取 二氧化碳超临界流体萃取技术（ SFE） （三）二氧化碳超临界流体萃取技术（CO2-SFE） CO2-SFE ：以超临界流体作为萃取 介质的一种提取新技术。 介质的一种提取新技术。 超临界流体：处于临界温度（Tc）、 ）、临界压力 超临界流体：处于临界温度（Tc）、临界压力 Pc）以上， （Pc）以上，介于气体与液体之间 的流体。 的流体。
类 型 正相色谱 固定相 流动相 应 用 BAW系统 水 > BAW系统 极性、 极性、中极性物质分离 PPC为例 为例） （以PPC为例） ODS<甲醇 甲醇乙腈最广泛，非极性、 反相色谱 ODS<甲醇-水 乙腈-水 最广泛，非极性、 中极性各类物质分离
22
加压液相色谱
类 型
分析用高压液相色谱（HPLC） 分析用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 中压液相色谱 ( MPLC ) 低压液相色谱 ( LPLC ) 快速色谱 5.05～20.2 ×105 5.05～ < 5.05 ×105 约2.02 ×105
7
连续回流法 回流法 苷元 某些苷类 游离生物碱
乙醚 氯仿
bp.35℃， bp.35℃，极易燃 bp.61℃、 1.48，不易燃， bp.61℃、d 1.48，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好
苯 bp.80.1℃，毒性大 bp.80.1℃， 沸程30 60℃、60～90℃、 30～ 石油醚 沸程30～60℃、60～90℃、
蛋白质的脱盐精制 蛋白、 蛋白、多糖的分离及 小分子化合物的分离 大分子化合物精制分离 同
17ห้องสมุดไป่ตู้
离 解 程 度 不 同 阳离子交换树脂 阴离子交换树脂 离子交换树脂法 氨基酸、生物碱、 氨基酸、生物碱、 有机酸的分离
18
常用色谱分离方法介绍 ：
吸附剂
硅胶
分离原理
吸附原理
吸附色谱 吸附规律
应
用
弱酸性、 广泛（ 弱酸性、极性吸附剂 广泛（酸、碱及 化合物极性越大、 中性成分均可） 化合物极性越大、 中性成分均可） 吸附能力强（难洗脱） 吸附能力强（难洗脱） 溶剂极性越小， 溶剂极性越小，吸附力越强 碱性、 碱性、极性吸附剂 吸附规律同上 碱性、 碱性、中性成分 （酸性成分与铝络合）
11
超临界流体萃取中药成分的主要优点： 超临界流体萃取中药成分的主要优点：
可以在接近室温下工作， 1. 可以在接近室温下工作，防止热敏成分 的破坏或逸散。 的破坏或逸散。 萃取过程几乎不用有机溶剂， 2. 萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中 无溶剂残留，对环境无污染。 无溶剂残留，对环境无污染。 提取效率高，节约能耗。 3. 提取效率高，节约能耗。