MM_FS_CNJ_0348出口食品沙门氏菌（辛酯酶荧光）
MM_FS_CNJ_0348
出口食品中沙门氏菌（辛酯酶荧光）检验方法
1.适用范围
本方法适用于出口肉品，蛋品沙门氏菌的检验，其他食品可参照使用。

2.定义
MUCAP：4－methylumbelliferyl－caprylate（4－甲基伞形酮辛）的缩写。

MUCAP试剂：用4－甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。

SS琼脂：沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。

HE琼脂：Hektoen Enteric琼脂培养基。

3.主要试剂和仪器
.主要试剂（包括培养基）
培养基与试剂按SN 0170第5章，另补充以下部分：
SS琼脂培养基（含1％蔗糖）：见附录A1；
HE琼脂培养基：见附录A2；
MUCAP试剂：见附录A3；
氧化酶试纸：见附录A4；
.仪器
紫外光灯：波长366nm，功率＞6W；
放大镜：3～4X；
毛细滴管。

4.样品制备及增菌培养
参照SN 0170进行。

5.分离培养
.将增菌培养液摇匀，挑取一接种环，划线接种于SS和HE琼脂培养基各一个，于36±1℃培养24±2h。

.观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。

如无可疑菌落，应再继续培养24±2h。

沙门氏菌的菌落特征见表1。

.从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落（尽量选较大，分离较好的单个菌落），用玻璃笔做好标记并编号。

.用毛细滴管吸取MUCAP试剂，加一滴于编号的菌落上，待一个平板的被检菌全部滴加试剂后，将平板拿至366nm紫外光灯下检视。

发蓝色荧光的为MUCAP试验阳性，将阳性菌落号记录下来。

.用接种环挑取荧光反应阳性菌落，涂于氧化酶试纸上，观察涂菌点是否变蓝色。

于10min内变蓝色为氧化酶试验阳性；不变色为阴性。

7.结果计算
试验阴性的样品，报告为“未检出沙门氏菌”。

试验阳性氧化酶试验阴性的样品，按SN 0170第四章继续进行生化和血清学试验，并根据试验结果报告。

8.来源：
SN 0332－94
附录 A
培养基和试剂
（补充件）
琼脂培养基（含1％蔗糖）
牛肉浸膏胆盐煌绿
蛋白胨柠檬酸钠中性红
乳糖硫代硫酸钠琼脂
蔗糖柠檬酸铁蒸馏水1000mL
将各成分溶于水，煮沸4～5min。

最终±。

冷至55～66℃，倾注平板。

琼脂培养基
月示.蛋白胨水杨素柠檬酸铁铵
酵母浸出物混合胆盐溴麝香草酚蓝
乳糖氯化钠酸性复红
蔗糖硫代硫酸钠琼脂
蒸馏水1000mL
将各成分溶于水，煮沸4～5min。

最终±。

冷至55～60℃，倾注平板。

试剂
按生产者提供的使用说明制备工作稀释液，贮于4℃冰箱备用。

A4.氧化酶试纸
氧化酶试液：
甲液：1％α萘酚乙醇液；乙液：1％二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。

氧化酶试纸：
将甲液与乙液等量混合。

取定性滤纸＋，浸透混合液后，于70～80℃烘箱烘干。

剪成适当大小的纸条，密封于塑料袋或瓶中，贮于4℃冰箱备用。