引物查询方法
一共有两种查询引物的方法，包括primerbank和primer3，当我
们查到引物时，我们需要用Pubmed来验证。

详细说明见下文。

1.Primerbank
用引物银行查询引物时，我们只需要输入引物的名称，种属
网址：
1.将search by 修改为
keyword
2.将species修改为您
所需要的种属，如
mouse
3.输入您所需查的基因
的名字，如atg5
4.点击submit
您将得到所需查的基因的引物
的结果
点击这里，您将看到引物在编码
序列中的位置
点击这里绿色的部分，您可
以看到这个引物的Qpcr的
结果
2.primer 3
使用这个工具之前您需要在Pubmed中查到您的目的基因的序列，然后黏贴到
primer3中，软件便会自动设计引物。

Pumed的使用方法如下：
网址：
修改为nucleotide
输入您的目
的基因，如
atg7
最后单击search 点击这里选种属
筛选符合您需求的，我们
是自噬相关的atg7，因此
选这个
点击fasta选项
这就是您所要的序列，
复制
Primer3
网址：打开primer3的网址
修改为None
黏贴如在pubmed中查到
的基因序列
选中pick left和pick right
修改为您所需产物的大小
范围
点击这个选项
这就是结果的页面
这个是软件默认的最
好的引物，下面还有其
他引物
完成引物的设计后，我们可以用pubmedblast来验证引物
Blast
网址：
输入网址会显示以下页面，按照以下步骤便可验证
下拉页面，您将看到软件
对您的基因锁设计的全部
引物
.输入网址后选择网页下面的这个
地方，primer blast
输入查得的上下游引物的序
列
修改您所期望得到的扩增产物
的大小，如qpcr 一般在200以
内
修改种属
最后点击页面最下的此选项
点击这个紫色的，这是引物的一
个编号，您会看到详细的介绍
大概就是这样，不足之处还望大家给予建议和谅解。