12、抗体由浆细胞产生。

抗体分子上 VH 和VL （高变区）是抗原结合部位。

临床免疫学检验免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。

中枢免疫器官：骨髓、胸腺； 外周 免疫器官：淋巴结、 脾脏（最大 ）、黏膜相关淋巴组B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导 体液免疫;B 细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smig ）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。

成熟B 细胞：CD19 CD20 CD21 CD22 （成熟B 细胞的 mig 主要为mIgM 和mIgD ）同时检 测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。

B 细胞功能检测方法： 溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。

5、T 细胞：介导细胞免疫。

共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T 细胞的标志是CD4; 杀伤T 细胞的标志是 CD8 T 细胞受体=TCRT 细胞和NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）；CD 外CD4+ CD8-=辅助性T 细胞（Th ）CD 外CD4 CD8+ =细胞毒性T 细胞（Tc 或CTL ）（ T 细胞介导的细胞毒试验）CD 知CD25^ =调节性T 细胞（Tr 或Treg ）T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA ）刀豆素（CONA 刺激T 细胞增殖。

增殖试验有：形态 法、核素法。

T 细胞亚群的分离： 亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法*E 花环试验是通过检测SRBC 受体而对T 细胞进行计数的一种试验;6、NK 细胞：具有细胞介导的 细胞毒作用。

直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC ）、 CD56。

测定人NK 细胞活性 的靶细胞多用 K562细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1细 胞株。

7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统 （MPS 表面标志CD14包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。

（表达MH ffi 类分子）8、人成熟树突状细胞 （DC （专职抗原呈递功能）： 表面标志为CD1a CD11C 和CD839、免疫球蛋白可分为分泌型（sig ，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（mIg ，作 为抗原受体 表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白）10、免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG > IgA > IgM > IgD > IgE 五类（按重链恒定区抗原性（CH 排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。

11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（ CH 、 CL ）1、 免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、3、4、30、抗血清常见保存条件：2-8 C 保存；冷冻保存（最常用）；真空干燥保存（ 5-10 年）。

13、IgG :血清中含量最高的免疫球蛋白（IgG1最高），血液和细胞外液中的主要抗体。

也 是再次免疫应答 的主要抗体，是 唯一能通过胎盘 的抗体，大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是 IgG ，某些自身抗体及超敏n 型抗体是 IgG ，免疫学检测中第二抗体也以 IgG 为主。

14、IgA :分血清型（单体存在）及分泌型；分泌型 IgA （sIgA ）为二聚体，性能稳定，主 要存在于胃肠道、支气管分泌液、 初乳、唾液 、泪液中，局部浓度高，是参与 黏膜局部免疫 的主要抗体。

15、IgM ：为五聚体，主要存在于血液中，是 Ig 中分子量最大的（又称巨球蛋白）。

个体发 育最早合成 和分泌的抗体。

抗原刺激后体液免疫应答中 最先产生 的抗体，感染过程中血清 IgM 水平升高，说明 近期感染。

新生儿脐血中若IgM 增高，提示有宫内感染。

16、IgE :为单体结构，正常人血清中 含量最低。

IgE 为亲细胞抗体，介导 I 型超敏反应。

特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。

17、 补体 :具有酶样活性的球蛋白（肝细胞、巨噬细胞产生）；激活途径主要有三种:经典 途径（以结合抗原后的IgG 或IgM 类抗体为主要 激活剂（双链 DNA , C1〜C9全部参与）、 替代途径（病原微生物 细胞壁成分（脂多糖）直接激活补体 C3,然后完成C5〜C9的激活过 程）完全抗原 =反应原性 +免疫原性。

半抗原 =反应原性（ 无免疫原性 ）抗原抗体反应 的四大特点：特异性 、可逆性、 比例性、阶段性 ；受反应条件（如温度、 电解质、抗原抗体比例等）的影响。

抗原抗体反应 可分为两个阶段： 第一阶段 为抗原与抗体发生特异性结合的阶段， 此阶段 反应快， 仅需几秒至几分钟， 但不出现可见反应；第二阶段 为可见反应阶段， 此阶段 反应慢， 往往需要数分钟至数小时。

26、颗粒性抗原出现凝集反应。

可溶性抗原出现沉淀反应。

单价抗原与相应抗体结合不出现 沉淀现象。

27、 木瓜酶 水解 IgG 为 2Fab+Fc ； 胃蛋白酶 水解 IgG 为 F （ab ）2+nFc 。

28、最常用于免疫 动物 的佐剂是 弗氏佐剂 ，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂 （弗氏不完全佐剂加 卡介苗）和弗氏不完全佐剂两种。

29、R （兔子）型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适 较宽 ，适于作 诊断试剂 。

H （马）型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较 用作 免疫治疗 。

、MBL 途径 （由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素 （MBL 与病原体结合后启动激活）。

18、补体系统中C3含量最多, C2含量最少。

19、灭活：加热 56 C 30分钟, 补体丧失活性 20、补体清除免疫复合物的方式： 吞噬调理；免疫粘附；免疫复合物抑制。

21、 22、 抗原抗体结合力 （分子间引力）：静电吸引、范德华力、氢键、 疏水作用力（最强） 23、 pH 24、 抗体过量——前带；抗原过量——后带（钩状效应）25、 范围窄 ，一般杂交瘤细胞放入液氮（-196 C ）前，需要逐步降温。

复苏细胞时，从液氮罐内取出冻存 立即浸入37 C 水浴。

凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。

直接凝集反应 ：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的 电解质（ 0.85%氯化钠） 参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。

抗原 =凝集原，抗体 =凝集素。

34、玻片凝集试验：主要用于抗原的定性分析， AB0血型的测定。

试管凝集试验 ：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验；35、正向间接血凝反应（PHA :红细胞包被 抗原，用以检测抗体。

（凝集）反向间接 血凝反应（RPHA ：红细胞包被 抗体，用以检测抗原。

（凝集）36、间接血凝抑制试验： 可用于检测抗体、 自身抗体、 变态反应性抗体， 也可测定抗原。

（ 不 凝集） 37、金黄色葡萄球菌 A 蛋白（SPA --协同凝集反应（反向间接凝集）38、血凝试验（载体为绵羊、家兔、鸡的红细胞及 0型人红细胞）可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为 1:64，同时设不含标本的稀释液为对照孔。

凡红细胞沉积 于孔底， 集中呈一圆点 的为不凝集 。

如红细胞 凝集，则分布于孔底 周围。

39、 胶乳凝集 试验（间接凝集），所用载体为 聚苯乙烯 胶乳； 明胶凝集 试验（间接）将病毒 抗原或重组抗原吸附于 粉红色明胶颗粒 ： HIV-1 抗体和抗精子抗体检测40、抗球蛋白试验，又称 Coombs 试验，是检测抗红细胞 不完全抗体的一种很有用的方法。

包括直接Coombs 试验（检测红细胞上的不完全抗体） 和间接Coombs 试验（游离在 血清中的 不完全抗体） 41、沉淀反应分两个阶段：第一阶段 为抗原抗体发生特异性结合，几秒到几十秒即可完成， 出现可溶性小的复合物， 肉眼不可见 。

第二阶段 为形成可见的免疫复合物， 约需几十分钟到 数小时才能完成，如沉淀线、沉淀环。

絮状沉淀试验： 抗原抗体溶液在电解质的存在下结合， 形成絮状沉淀物， 这种絮状沉淀受抗 原和抗体比例的直接影响，因此 常用 来作为测定 抗原抗体反应最适比例 的方法。

42、免疫比浊：最适pH 为6.5〜8.5，磷酸盐缓冲液。

（R 型抗体，增浊剂如聚乙二醇（PEG 、 吐温 -20）。

适合于 大批量标本 的检测。

当反应液中 抗体过量 时， IC 的形成随着抗原递增而增加，至抗原、抗体最适比例处达最高 峰，这就是经典的 海德堡曲线理论 。

当抗原过量 时，形成的 IC （免疫复合物）分子小，而且会发生再解离，使 浊度反而下降 ， 光散射亦减少 ，这就是高剂量 钩状效应 。

43、 单向扩散试验 是在琼脂内混入抗体， 测抗原 。

Mancini 曲线适用大分子抗原和长时间扩散（＞48小时）的结果，沉淀环直径的平方与抗原浓度呈线性关系。

Fahey 曲线 适用于小分子抗原和较短时间扩散的结果处理，用半对数值画线，浓度对数与 扩散环直径呈线性关系。

双向扩散试验 是对抗原或抗体进行定性分析。

31、 32、 33、EIA :异相法：先分离，后测定。

固相酶免疫测定（如 ELISA )沉淀线如果 靠近抗原孔 ，则表示 抗体含量较大 沉淀线如果 靠近抗体孔 ，则表示 抗原含量较大 。

不出现沉淀线 则表明 无对应的抗体或抗原 或者抗原 过量 。

* 分子量小者扩散快，反之则较慢。

由于慢者扩散圈小，局部浓度则较大，形成的沉淀线弯向分子量大的一方。

如果两者分子量大致相等，则形成直线。

* 两条沉淀线互相吻合相连 ，表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀，两个 沉淀线呈部分相切，说明两个抗原之间有部分相同。

两条沉淀线交叉而过，说明两个抗原完全不同。

*出现沉淀线最高的抗体稀释度为该抗体的效价。

*出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯。

出现多条沉淀线说明不纯。

44、对流免疫电泳 （ 双向免疫扩散 与 电泳 相结合的 定向加速 的免疫扩散技术）：抗体流向负 极，抗原流向正极；最适比例出现沉淀线。

火箭免疫电泳 是将单向免疫扩散与电泳相结合的一项定量检测技术， 实质上是加速的单向扩 散试验。

（抗体混合于琼脂 中，样品孔中的抗原置于负极端，电泳时抗体 不移动 ，抗原向正 极泳动 ，随着抗原量的逐渐减少， 抗原泳动的基底区越来越窄， 抗原抗体分子复合物形成的 沉淀线逐渐变窄， 形成一个形状如火箭的不溶性复合物沉淀峰。

）顶部呈不清晰的云雾状或 圆形，则表示未达终点 。

免疫电泳技术：区带电泳 +免疫双向扩散。

用于纯化抗原和抗体成分的分析免疫固定电泳：电泳+沉淀反应技术，可用于各种蛋白质的鉴定 （M 蛋白的鉴定与分型， 也 用予尿液中本-周蛋白的检测及K 、入分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。