Ab
（）
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抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应的原理 1、抗原抗体结合力（4种） 2、抗原抗体亲和力和亲合力 3、亲水胶体转化疏水胶体
电荷引力（静电引力） 范德华引力 氢键结合力 疏水作用力
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1、抗原抗体结合力 --静电引力（electrostatic forces）
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1、荧光免疫技术
将结合有荧光素的荧光抗体进行抗原抗体反应的技术。 常用的荧光素有异硫氰酸荧光素（FITC)和罗丹明（RB200)等。它们可 与抗体球蛋白中赖氨酸的氨基结合，在蓝紫光激发下，可分别出现鲜明 的黄绿色及玫瑰红色。
Ab光或Ag光 固相吸附抗原或抗体
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1、抗原抗体结合力 --疏水作用力（hydrophobic interactions）
水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的 排斥而趋向聚集的力。作用力最强，占总结合力的50％。
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1、抗原抗体结合力
静电引力：异性相吸 （electrostatic forces），离子键 （Ionic bond） 范德华引力: 作用最小 （van der Waals interactions） 氢键: 最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力: 作用最大 （hydrophobic interactions）
静电引力或库仑引力（Cou-lombic forces）是因抗原、抗体带有 相反电荷的氨基（—NH3+）与羧基基团（—COO-）间相互吸引的 能力，之间的引力，距离越近引力越大。
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1、抗原抗体结合力 --范德华引力（Van der Waals forces）
Ab － Ag光 或
Ag－Ab光
光激发
发光
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荧光免疫技术的应用
抗核抗体 (均质型)
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①自身抗体检测
抗核抗体 (斑点型)
抗核抗体 (核膜型)
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欧蒙 21
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荧光免疫技术的应用
②病原体检测
呼吸道合胞 病毒
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疏水作用力>氢键结合力>静电引力>范德华引力
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2、抗原抗体亲和力和亲合力
亲和力（affinity)
是指抗体分子上一个抗 原结合点与对应的抗原决 定簇之间相适应而存在着 的引力，是抗原抗体间固 有的结合力。
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2、抗原抗体亲和力和亲合力
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内容
一、抗原抗体反应的基本原理 二、抗原抗体反应的类型 三、免疫标记技术的应用
抗原抗体反应及其应用
一、抗原抗体反应的基本原理
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抗原抗体反应
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抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应。
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Ag
（） 如同钥匙和锁的关系
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检测荧光现象 检测放射性强度 检测酶底物显色
检测发光强度 检测金颗粒沉淀
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三、免疫标记技术的应用
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免疫标记技术的应用
免疫标记技术是用荧光素、放射性同位素、酶等标记抗体或抗 原等所进行的抗原抗体反应。
特点：敏感度高 特异性强 快速 容易观察 能进行定性、定量、定位检测等
抗原 + 抗体
(亲水胶体) (亲水胶体)
抗原抗体复合物 电解质 可见反应
(疏水胶体)
(沉淀)
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二、抗原抗体反应的类型
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抗原抗体反应的类型
反应类型 沉淀反应 凝集反应 补体参与反应 中和反应 免疫标记
抗原 可溶 颗粒 细胞 毒素等 标记
测定其放射活性
抗原抗体复合物沉淀
分子间（或原子间)相互接近，分子极化产生引力，其作用取决于分 子空间构型，如：凹槽与凸起互补，抗原与抗体，酶与底物。能量 小于静电引力。
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1、抗原抗体结合力 --氢键结合力（hydrogen bond ）
是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。其结合力较 强于范德华引力 ，能量大于范德华引力。
抗体 无标记 无标记 无标记 无标记 或 标记
补体 无 无 有 无 无
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抗原抗体反应的类型
反应类型 沉淀反应
凝集反应
补体参与 反应
实验技术 液相沉淀试验 免疫电泳技术 直接凝集试验 间接凝集试验 抗球蛋白试验 补体溶血试验 补体结合试验
结果判断 观察沉淀，检测浊度 观察扫描沉淀峰、沉淀弧
观察凝集现象 观察凝集现象 观察凝集现象 观察测定溶血现象 观察测定溶血现象
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抗原抗体反应的类型
反应类型 中和反应
免疫标记
实验技术 病毒中和试验 毒素中和试验 荧光免疫技术 放射免疫技术
酶免疫技术 发光免疫技术
金免疫技术
结果判断 检测病毒感染性 检测外毒素毒性
流感病毒 A/B型
③免疫病理检测 ④细胞表面抗原和受体检测
⑤特殊应用：流式细胞分析 抗原抗体反应及其应用
副流感病毒 22
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2、放射免疫技术及其应用
用放射性同位素标记技术来检测抗原抗体反应的高灵敏度方法。 反应特点：灵敏，精确；不稳定 ；安全性差
标记Ag或Ab
标记物纯化
抗原抗体反应
现临床实验室 应用较少
亲合力(avidity)
亲和力是指反应系统中复杂 抗原与相应抗体之间的结合 能力。与抗体结合价、抗体 的亲和性、抗原有效表位数 目等相关。
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抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的血清学反应条件下均带有负电荷， 使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，因此蛋白质不会自行凝 集出现沉淀。当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化层变薄;而且由于抗原 抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。此 时在电解质(如NaCl，的作用下，使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形成可 见的抗原抗体复合物。