❖果蝇三龄幼虫 virilis 2n=12 melanogaster 2n=8
流程：剥离唾液腺-解离-染色-压片-镜检
1 剥离唾液腺
❖ 唾腺位置：头部两侧、位置在虫体的1/3-1/4 ❖生理盐水：0.7% NaCl *
2 解离 *
❖ 目的：破坏胞间质及组织结构，使细胞容易散开 ❖方法：1M HCl 室温 处理3-5min
多线染色体的生理意义 *
❖ 分泌腺体需要在一定空间范围内具备高效分泌的 能力——细胞体积大、蛋白合成能力强。
❖ 多线染色体能够增加细胞核体积，进而增加细胞 体系。
❖ 多线染色体每一个基因具有数千拷贝，为细胞提 供更高的基因表达水平，提高蛋白合成能力。
多线染色体的形态特点 *
❖1 拟联会（体细胞联会）：同源染色体的同源臂 紧密结合，在DNA复制过程中新产生的染色质纤 丝互相缠绕，在光学显微镜石碳酸品红（卡宝品红），染色质特异 染料
❖ 步骤： 1 滴加1-2滴染色液 2 染色8min
4 压片
❖ 单侧慢放盖玻片（领取） ❖ 用解剖针轻敲样本上方使其组织细胞分散 ❖ 用拇指按压载玻片使细胞膜破裂，细胞质流走，
染色体臂散开
5 镜检
JLU
果蝇唾液腺染色体的制片与观察
多线染色体（polytene chromosome）*
❖ 1881年首次发现
❖ 在双翅目昆虫的分泌组织细胞内存在一种光学显 微镜下可见的巨大染色体。称为多线染色体，是 细胞内持续进行的DNA的复制造成的。这种细胞 不分裂而DNA持续复制的现象被称为核内有丝分 裂（endomitosis）。多线染色体的每一条染色单 体都拥有数千个拷贝。
多线染色体的带型（banding pattern）*
❖ 深色带：螺旋程度高、难接近、非活化 ❖ 浅色带：螺旋程度低、易接近、活化 ❖ 胀泡（puff）：基因活跃转录区域
❖ 带型：种属特异性（缺失、重复、倒位、易位）
实验目的
❖ 掌握果蝇唾液腺染色体的制片技术 ❖ 了解唾腺染色体的形态特点。
实验材料及流程 *
❖2 染色中心：所有染色体的着丝粒及附近的异染 色质区域都集中在一起，染色后形成一个深色的 染色中心。
3 多线染色体形态：以染色中心为中心，向四周伸 出数条拟联会染色体臂。
果蝇唾液腺染色体形态 *
❖黑腹果蝇 2n=8
❖5长臂 1短臂
果蝇唾液腺染色体形态 *
❖virilis果蝇 2n=12
❖5长臂 1短臂