发酵工业培养基 ppt课件
工业发酵培养基
活性物质 矿质养分 生长因子
氮源 碳源
成分与 功能
水 前体
多 快 好 省
概念与 共性
培养基
类型
固态发酵 液态发酵 半固态发酵
斜面培养基
对底物的 利用速率 C/N 原料 pH 浓度
设计配制 与原则
灭菌
5点注意事项 组成确定
种子培养基 发酵培养基
连续灭菌 分批灭菌
第4章:发酵工业培养基
§4.1 发酵工业培养基概述
只考虑细胞繁殖数量,不考虑产物合成
三.发酵培养基!!! 用于发酵产品生产的培养基 1.作用:两大功能 ①.提供菌体生长繁殖所需各种营养成分: ②.提供发酵产品生物合成所需原料: 2.要求 ①能满足细胞快速繁殖的需要:短时间得到大量细胞 培养基成分适当丰富、完全、具特异性:“因菌而异” 适合于该菌种的生理特性,菌体生长、繁殖迅速、健 壮,能在较短周期内得到大量的细胞数。 ②含有目标代谢产物合成必需的前体、活性因子: ③培养基要适当丰富与完全: 防止 “大量速效养分抑制次级代谢产物合成”
二.种子培养基
1.制备发酵“种子”(发酵剂)的目的
提高发酵罐的利用率:为了增加发酵罐的接种量, 往往先将斜面菌种在种子罐中繁殖到一定数量,以缩 短菌体在发酵罐内生长繁殖所需时间,缩短延滞期, 提高发酵罐的设备利用率。
2.发酵级数
菌种从种子罐到发酵罐扩大的次数。 二级发酵=1个种子罐+1个发酵罐; 三级发酵=2个种子罐+1个发酵罐; 在三级发酵中,将小种子罐(一级种子罐)的菌剂 接入到较大的二级种子罐中培养,繁殖后再接入发酵 罐中。
适于微生物快速生长繁殖与目的产物合成; ②不需另加微量元素、维生素: ③来源广泛,价格低廉: 缺点:组分复杂,不易重复→影响生产稳定性。
(二).按状态分 1.固态:用途:菌种分离、保存;真菌子实体生
产;真菌酶制剂生产;放线菌活菌制剂生产等 2.半固态:琼脂:0.5%~0.8%。 ①菌种鉴定:细菌“运动特征”观察; ②小曲酒生产:糖化、酒化并行; 3.液体培养基:!!发酵工业最重要的培养基, O2与养分传递容易。
4.对种子的3大要求: 纯:无杂菌; 壮:健壮,活力旺盛,繁殖快; 多:有足够的数量。
5.对种子培养基成分的要求: 目的:菌种繁殖快;数量多 ①丰富、完全、特异、浓度适当:繁殖快 ②易被菌体吸收利用:速效 ③尽量与发酵培养基接近:减少延滞期, “宾至如归” ④C/N控制合理: 过大,产酸,→pH稳定 ⑤非连动型产物之发酵:
一.概念 1.培养基 提供微生物生长、繁殖及代谢需要的营养基质。 2.发酵工业培养基: 能用于工业生产的微生物培养基
二.确定培养基组成的原则!! 有利于细胞快速繁殖;有利于积累大量的发酵产物。
三.培养基的成分、配比对发酵的影响 1.微生物生长: 2.发酵产品的生物合成量、速度及提取的难易程度: 3.产品的产量、质量:
种子培养基不需添加形成产物所需前体等特殊物质
6.注意事项 ①种子扩大条件与发酵条件一致: 种子培养基的主要成分和培养条件: 应尽可能与 发酵培养基及发酵条件一致,以减少菌种转入发酵罐 后菌体为适应新环境而进行的酶诱导等生理适应,使 菌种迅速转入旺盛生长繁殖; ②不考虑产物合成所需的特殊成分: 对于非生长连动型产物的发酵,种子培养基不需 要添加用于形成产物的前体等特殊物质(次生代谢产 物形成所需的物质),以节约生产成养基组成时,除了营养要求外,还 要考虑:原料来源与生产成本
工业培养基原料选择3原则: A.营养特性:营养丰富 B.原料来源:来源广泛 C.生产成本:价格低廉
原料类型: 6种 普通原料:碳源,氮源,矿质养分,生长因子; 特殊原料:前体,活性因子
一、碳源及其主要功能 (一).生理功能 A.菌体生长、繁殖:提供碳源、能源 B.目的产物合成:提供C架、能源 (二).常用碳源 ①糖类(淀粉) ②油脂 ③有机酸 ④低碳醇等 在碳源严重缺乏时,Pr水解物AA亦可作为C源。 工业发酵所用天然C源(玉米粉,薯干粉、野生植
3.设计发酵级数依据的3大原则:
①菌种的性质(孢子数、孢子发芽率及生长率): 单位体积或重量的孢子浓度大、发芽快、生长快
的菌种,发酵级数少,否则,级数多; ②发酵罐中种子的最低接种量: 接种量少者,级数少;否则,级数多(多次繁殖才
能得到足够的接种量); ③种子罐容积(V1)与发酵罐的容积(V2)比: 容积差异或V2/V1比值愈大,级数愈多。
3.目的 “两快、两多” 菌体:生长快而健壮,细胞数量多: 目的:代谢产物合成速度快,数量多:
四.培养基类型的其他分法 (一).按纯度划分
1.合成培养基:生理研究,用化学试剂配; 2.天然培养基:用植物、动物或微生物等天然有机 材料或农副产品下脚料配制。发酵工业最重要
优点:“不纯” →①营养丰富:
物淀粉、纤维及半纤维素等)中亦含有大量AA、维 生素和矿质养分,即C、N、矿质养分同时存在
1.糖类 A.葡萄糖(G):最易利用之糖,速效糖 注意两点副作用:
①产酸:G过多,呼吸作用过强,耗氧量过大, →溶解氧不能满足需要 ,培养体系处于厌氧发酵状态: →中间产物不能通过呼吸作用完全氧化,积累在菌体 或培养基中,如丙酮酸、乳酸、乙酸等导致pH下降 →影响酶活性,抑制微生物生长与产物合成;
§4.2 发酵生产的培养基类型 根生产工艺的要求及用途可分为3类: 一.斜面培养基 1.作用:供菌种活化、保存、繁殖用。 2.对斜面培养基的要求:
①使菌体生长快、繁殖快、健壮; ②不易引起菌种变异。 3.组成特点: ①C、N源物质:
不宜过多,尤其是C源,多了易引起pH波动; ②无机盐浓度:
亦要适当控制,以免引起菌种特性变化。
②“葡萄糖效应”:抑制次级产物合成!!
G分解产物阻遏或抑制某些目的产物合成所必需的 酶的形成与酶的活性:导致某些次级代谢产物(抗生 素等)不能合成
B.糖蜜!!! 糖厂生产糖时的结晶母液,副产物,含有丰富 的糖,氮素化合物,矿质元素,维生素,是发酵工 业价廉物美的原料。 糖蜜主要含蔗糖,含糖量达50%-70%(W/V)。 糖蜜分为甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜两种,成分不同, 使用时要查阅有关资料。 糖蜜常用于酶母的酒精发酵、丙酮丁酮生产及 抗生素发酵。