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动物病理生理学实验设计之肝性黄疸


黄疸指数测定
〃原理
血清黄色的深浅与胆红素含量有关。临床 检验规定0.01%重铬酸钾溶液的色度作为黄疸 指数1,将血清用生理盐水稀释,肉眼观察其 黄色深度与0.01%重铬酸钾溶液相当时,血清 的稀释倍数即为该血清的黄疸指数。
黄疸指数测定
〃方法
取血清0.1ml臵于小试管内,所用试管应与标 准管口径及厚度一致,用1ml吸管吸取生理盐水 溶液稀释血清,当与某一标准管的颜色相同时 ,计量所用生理盐水毫升数,再按公式求出黄 疸指数单位:
〃胆红素在肝内的代谢过程,包括肝细胞对血液内胆红 素的摄取、结合和排泄三个相互衔接的过程,由肝脏对 胆色素的处理能力下降所引起的黄疸称为肝性黄疸( hepatic jaundice),此类黄疸的发生于肝功能障碍有关。
〃新生霉素能抑制BGT(胆红素葡萄糖醛基转移酶)活 性、阻碍酯化的进行,使肝细胞对胆红素转化障碍,导 致(肝性)黄疸。
取血清0.2ml放入小试管内,沿管壁加入新 配制的重氮试剂0.5ml,立即计时和进行观察 。若在30s-10min内试剂与血清交界处出现紫红 色环,为直接反应阳性;若经10min仍不显色 ,而加入95%酒精0.2ml后才显色者,则为间接 反应阳性。
胆红素定性一凡登白实验
〃重氮试剂配制
甲液:取对-氨苯磺酸1g,浓盐酸15ml,加蒸馏 水至1000ml。 乙液:取50%亚硝酸钠液(亚硝酸钠25g,加 蒸馏水至50ml时,臵冰箱中保存)0.5ml,再加 蒸馏水50ml,此液可用1周。 临用前,取甲液5ml,加乙液0.15ml混合,在3h 内有效。
实验动物
体重相仿的小白鼠2只
实验器材与药品
〃5ml注射器、试管、试管架、离心管 、离心机、移液管、一般手术器材
〃150mg新生霉素、生理盐水、重氮试 剂、95%酒精、各种浓度重铬酸钾溶 液标准管
实验方法
〃实验前处理及病理模型复制
〃实验检查
实验前处理及病理模型复制
(1)实验前两天给小鼠禁水
(2)实验前一天将0.1g新生霉素溶100ml 水中并将其加入实验组小鼠的饮水,对照组 小鼠回复正常饮水。 (3)实验前一天将50mg新生霉素溶于5ml 水中配成新生霉素溶液,给实验组小鼠注射 两次,每次1ml,剩余保存留用。对照组小 鼠注射等量的生理盐水。
〃原理
胆红素与重氮试剂作用发生重氮反应,形 成红色的重氮胆红素。因血浆中的结合胆红 素可以溶于水,与重氮试剂作用后呈现红色 ,称为直接反应阳性;游离胆红素因不能与 重氮试剂直接作用,故呈阴性反应,但加乙 醇后游离胆红素则能与重氮试剂作用,呈现 阳性反应,称为间接反应阳性。
胆红素定性一凡登白实验
〃方法
(4)给实验小鼠注射1ml新生霉素溶液, 造成肝细胞损伤。对照组小鼠注射等量的生 理盐水。
实验检查
(1)观察记录动物的一般状态和巩膜,口腔 黏膜,耳及皮肤的颜色。
(2)摘除眼球采血1-1.5ml,放入干燥离心管 内,凝血后离心(2000/分),分离血清,进 行胆红素定性和黄疸指数检查。
胆红素定性一凡登白实验
(4)黄疸指数
谢谢大家!
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各管混合后,分别吸取和装入10只内径(不 超过1cm)与厚度相同的无色的小试管内,密封管 口,标明黄疸指数,备用。
实验结果预测
(1)实验组小鼠可能出现呼吸抑制,腹泻、 昏迷、体温下降、肌肉抽搐、僵直等症状, 排便颜色较淡或有恶臭。 (2)巩膜,口腔黏膜,耳及皮肤呈现黄色。 (3)胆红素定性试验呈间接反应阳性
肝性黄疸
组员: 料 - 查资 - 制作 - 解说
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实验目的
〃复制肝性黄疸病理模型
〃了解胆色素代谢的变化
〃观察黄疸的表现
实验原理
〃黄疸(jaundice):在正常的动物机体内,胆红素 的生成、结合和排泄三个主要环节上保持着动态平衡, 但当其中任何一个环节发生障碍,都会使胆红素在血清 中浓度升高,造成高胆红素血症,使机体的皮肤、粘膜 、巩膜、体液及实质器官发生黄染的病理过程。
所用生理盐水毫升数 + 0.1 黄疸指数= ×标准管单位 0.1
黄疸指数测定
〃 黄疸指数标准管制备
0.1%重铬酸钾溶液:精确称取重铬酸钾( A.R.)0.1g,臵于100ml容量瓶内,加蒸馏水约 90ml使其溶解,加浓硫酸0.1ml,再加蒸馏水至 100ml。取10ml试管10只,按下表操作:
黄疸指数 0.1%重铬酸钾 溶液(ml) 蒸馏水(ml) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
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